易慧敏,陆韵薇,许孟秋,于顾然
(南京中医药大学附属医院, 江苏 南京 210029)
多发性硬化是最常见的炎症性脱髓鞘疾病之一,是发生于中枢神经系统的一种慢性的自身免疫疾病,主要累及脑室周围白质、视神经、脊髓、脑干及小脑等[1]。多发性硬化常于青壮年起病,影响全球约280万人,患病后反复发作,是成年人致残的原因之一[2-4]。多发性硬化属于中医“痿证”范畴,《素问·生气通天论》:“湿热不攘,大筋软短,小筋弛长,软短为拘,弛长为痿。”提示湿热是痿证主要病机之一。现代医学对于多发性硬化的治疗主要是调节或抑制免疫的疾病修饰治疗,有不错的疗效但多有一定的不良反应[5]。中药治疗多发性硬化的疗效已在诸多实验中得以证明,包括抑制免疫、对抗炎症、保护神经功能等[6-7]。2018年《多发性硬化/视神经脊髓炎中医临床诊疗规范》[8]将以黄柏、苍术为基本药对的二妙散或四妙丸作为治疗多发性硬化或视神经脊髓炎湿热证的推荐用药。其中小檗碱是黄柏的主要入血成分,而苍术的成分白术内酯Ⅱ入血能够转化成白术内酯Ⅲ(苍术内酯Ⅲ)[9-10]。据此,本实验以脂多糖(LPS)激活小鼠BV2小胶质细胞活化产生炎症反应为多发性硬化模型,探讨小檗碱和白术内酯Ⅲ配伍对脑小胶质细胞活化炎症反应的作用及其机制,以揭示二妙散治疗多发性硬化的机制。
1.1细胞 小鼠脑BV2小胶质细胞株购自上海中乔新舟生物科技有限公司。
1.2试剂 磷酸盐缓冲液(PBS,美国Gibco公司);3-(4,5-二甲基噻唑-2)-2,5-二苯基四氮唑溴盐(MTT,Sigma公司);……