1株羊源产气荚膜梭菌的分离鉴定及毒素分型检测

张疏桐，胡天豪，孙筱峰，陈思怀，张 耕，宋振辉，郭建华

(西南大学动物医学院，重庆 荣昌 402460)

产气荚膜梭菌(Clostridiumperfringens)旧称魏氏梭菌，可引起人和动物急性腹泻、坏死性肠炎、肠道出血、气性坏疽等疾病，是许多国家人和动物食源性感染的重要病原[1-4]。该菌是一种革兰阳性厌氧菌，菌体直杆状，边缘整齐，两端钝圆，大小为(0.6～2.4)μm×(1.3～19.0)μm，单在或成双，短链，无鞭毛，不能运动，能产生荚膜并释放毒素。在一般条件下罕见形成芽孢，在适宜的pH、温度、合适比例的碳源等条件下才可形成芽孢。根据产生4种致死性毒素(α、β、ε、ι)的能力可将产气荚膜梭菌分为A、B、C、D和E五个毒素型，每个毒素型均能引起人或畜禽特定的疾病[5-6]。

据相关文献报道，产气荚膜梭菌可引起羊只腹胀、腹泻、食欲废绝甚至突然死亡，感染病例剖检可见心、肺、肾、胃肠道等多器官坏死、水肿或充血、出血等病变[7]。更为严重的是，该菌感染可引起膘情较好的羊急性死亡，且病死率超过40%[8]。因而，选择合适的疫苗对防治羊产气荚膜梭菌病显得至关重要。

本试验通过对某黑山羊养殖场猝死羊进行剖检观察，从1只小肠严重出血坏死的羊的回肠内容物中分离得到1株溶血性厌氧致病菌，对该菌进行培养特性观察、生化试验、药敏试验、小鼠致病性试验，16S rDNA PCR扩增及测序、产气荚膜梭菌毒力基因PCR试验，旨在鉴定该病原菌药物敏感性、致病性和毒素分型，为该病防制及疫苗研究提供理论指导。

1 材料与方法

1.1 病料 某黑山羊养殖场急性死亡羊只，腹部膨大，剖检后发现回肠浆膜面严重出血，呈黑色，心包积液。……