Boc5对脑缺血再灌注小鼠血脑屏障损伤的保护作用

李纪宏，刘晨旭，冯颖达，孙 阳，李小强，张慧楠

(1.空军军医大学药学系药理学教研室，西安 710032；2.国家中医药管理局中药胃肠药理重点研究室，西安 710032)

脑卒中是严重威胁人类生命健康的重大疾病[1-2]。寻找并开发新的具有神经保护作用的药物对于减轻脑缺血再灌注损伤(CIRI)具有重要的临床意义[3-4]。星形胶质细胞是脑中数量最多的细胞，通过药物干预减轻星形胶质细胞炎症释放是改善CIRI预后的有效治疗策略[5-7]。

胰高血糖素样1受体(GLP-1R)属于G蛋白偶联受体，在心脏、肾脏、肝脏和脑等重要器官中均有表达[8-9]。脑内GLP-1R激动能够抑制神经细胞凋亡，减轻炎症损伤[10-11]。目前在临床上应用的GLP-1R激动剂均只能注射给药[12]。Boc5 (C54H52N4O16S2)是通过高通量筛选的方法在48 600个小分子化合物库中筛选得到的具有口服活性的GLP-1R小分子激动剂[13]。既往实验结果表明，Boc5能够通过激活GLP-1R降低血糖[14-15]，但其对CIRI的保护作用目前尚无报道，本研究通过小鼠大脑中动脉栓塞再灌注(MCAO/R)模型探讨其作用及机制。

1 仪器与材料

1.1仪器 SZM45型体式显微镜，宁波舜宇仪器有限公司；HC-X803型显微精细镊，宁波市成和显微器械厂；紫外分光光度计，美国Bio-Rad公司；FV1000型激光扫描共聚焦显微镜，日本Olympus公司；Tanon-4200型化学发光成像分析系统，上海天能科技有限公司。

1.2试药 Boc5，美国TargetMol Boston公司；2,3,5-三苯基氯化四氮唑(TTC)，美国Sigma公司；多聚甲醛溶液、磷酸盐缓冲液(PBS)，均购自北京里根生物技术有限公司；超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)和过氧化氢酶(CAT)试剂盒，均购自南京建成科技有限公司；抗闭合蛋白、紧密连接蛋白-5单克隆抗体、二抗，均购自美国Cell Signaling Technology公司；……