盐度对SBR短程硝化系统中硝化细菌的影响*

余志英，龚泽平，王小兰

(广州大学生命科学学院，广东 广州 510006)

由于目前国内外对于高盐渗滤液的研究极少涉及盐度对SBR短程硝化过程中硝化细菌的影响，因此，逐步增加盐度至25 g/L，探究SBR反应器中AOB与NOB在数量与种群多样性的变化，可以为处理高盐渗滤液的短程硝化工艺提供污水可处理盐度参考范围。

1 实 验

1.1 材 料

实验材料取自胡雪柳[11]的SBR短程硝化系统处理模拟垃圾渗滤液过程中的活性污泥。模拟垃圾渗滤液水质情况如表1所示。从初始盐度为5 g/L的垃圾渗滤液中取出的活性污泥作为样品1，逐步提高盐度至25 g/L的垃圾渗滤液中取出的活性污泥作为样品2，均在提高盐度后运行周期的中后期取样。各周期出水的三氮浓度、亚硝化率和氨氮去除率情况如图1所示。

表1 模拟垃圾渗滤液水质Table 1 Water quality of simulated landfill leachate

图1 不同盐度下的出水水质Fig.1 Effluent quality under different salinities

1.2 实验方法

1.2.1 荧光定量PCR法

绝对实时荧光定量PCR法一般是利用一系列已知浓度的标准品制作标准曲线，然后将在相同的条件下目的基因测得的荧光信号量同标准曲线进行比较，从而得到目的基因的量[12]。本实验将标准品稀释为10-5～10-9五个浓度梯度，然后进行定量PCR，以标准品拷贝数的对数值为横坐标，以测得的CT值为纵坐标，绘制标准曲线[13]。制作标准曲线时质粒拷贝数公式：

C=6.02×1023×C0/M

(1)

式中：C为拷贝数(copies/μL)；C0为质粒浓度(g/mL)；M为含目的基因质粒的分子量(g/mL)。

采用PowerBiofilmTMDNA Isolation Kit试剂盒分别提取2个活性污泥样品总DNA，经梯度PCR，重组DNA的构建，转化大肠杆菌感受态细胞，筛选鉴定和荧光定量PCR，最后测出2种样品中AOB和NOB的CT值即可计算出拷贝数。……