二甲双胍对人急性髓系白血病KG1a细胞增殖和凋亡的影响及其机制

崔珊珊,李雅慧，赵晨瑾，张 震，姬曼曼，王桐桐，司晓慧，牛新清

(新乡医学院医学检验学院，河南 新乡 453003)

二甲双胍作为单磷酸腺苷激活的蛋白质激酶(AMP-activated proteinkinase，AMPK)的激活剂，近年来已从治疗2型糖尿病的一线药物逐渐发展为抗癌药物。二甲双胍通过调控多种信号通路抑制肿瘤细胞的生长，对食管癌、肝癌、胃癌、结直肠癌等多种肿瘤细胞的生长均有抑制作用[1]。ARRIETA等[2]研究发现，二甲双胍联合酪氨酸激酶抑制剂可显著延长携带表皮生长因子受体突变的晚期肺癌患者的无进展生存期和总生存期，且不良反应与单独使用靶向药物一致。但目前二甲双胍对急性髓系白血病(acute myeloid leukemia，AML)作用的相关研究报道较少。急性髓系白血病KG1a细胞系在形态上处于细胞发育的早期阶段，是具有白血病干细胞特性的早期髓系白血病细胞，对常规化学治疗药物耐药[3-4]。因此，本研究选取KG1a细胞为研究对象，探讨二甲双胍对其增殖、凋亡的影响及作用机制，以期为二甲双胍用于临床难治性白血病的治疗提供实验依据。

1 材料与方法

1.1 细胞、试剂与仪器AML细胞株KG1a由南方医科大学珠江医院提供，本实验室冻存。胎牛血清和RPMI1640 培养液购自美国Gibco 公司，100×链霉素/青霉素溶液购自美国Hyclone公司，二甲双胍购自上海生工生物工程技术服务有限公司，细胞计数试剂盒-8(cell counting kit-8,CCK-8)购自日本Dojindo公司，膜联蛋白V-异硫氰酸荧光素(annexinV-fluorescin isothiocyanate，AnnexinV-FITC)/碘化丙锭(propidium iodide,PI)细胞凋亡检测试剂盒购自美国BD公司，放射免疫沉淀实验细胞裂解液(radio immunoprecipitation assay lysis buffer,RIPA)、二喹啉甲酸(bicinchoninic acid，BCA)蛋白浓度……