葛根总黄酮联合三氧化二砷体外诱导NB4-R1细胞凋亡的实验研究

陈 婷，蔡亚云，沈 群

（1.如皋市人民医院，江苏 如皋 226500；2.南京中医药大学第一附属医院，江苏 南京 210029）

急性早幼粒细胞白血病（acute promyelocytic leukemia，APL）是急性髓细胞性白血病的特殊亚型。全反式维甲酸和/或砷剂[特别是三氧化二砷（As2O3）]成功诱导APL细胞分化或凋亡是白血病治疗领域靶向治疗的成功典范，使高危白血病成为真正意义上可以治愈的一种白血病，然而维甲酸综合征和维甲酸耐药是部分诱导治疗失败的根源。近年来，从传统中药中寻找开发新型抗肿瘤药物已成为研究热点。目前针对抑制早幼粒细胞耐药细胞株NB4-R1增殖、诱导凋亡的特异性靶点的高效低毒的天然新药，报道鲜少。葛根总黄酮是从葛根提取出的黄酮类化合物，近年来通过体内外实验发现葛根总黄酮可以不同程度诱导多种白血病细胞株凋亡，已经证实了其抗白血病效应与凋亡通路密切相关[1-3]。本研究以低剂量葛根总黄酮（10、30、50μg/mL）和/或联合As2O3（1μmol/L）体外诱导NB4-R1细胞凋亡，探讨低剂量葛根总黄酮联合As2O3对NB4-R1细胞增殖及凋亡的影响。

1 材 料

1.1 细胞系NB4-R1细胞由上海交通大学医学院附属瑞金医院惠赠，将NB4-R1细胞接种于约每瓶10 mL的含10%胎牛血清的RPMI1640培养基[含青霉素（100 U/mL）和链霉素（100 U/mL）]中，置于恒温细胞培养箱（37℃、5%CO2）中培养。

1.2 试剂 葛根总黄酮（南京泽朗生物有限公司，纯度约为80%，货号：FY1238）；二甲基亚砜（DMSO）（Sigma公司，货号：D5879）；RPMI 1640培养基（Sigma公司，货号：RNBH5043）；胎牛血清（GIBCO公司，货号：10099-141）；MTT细胞增殖及细胞毒性检测试剂盒（Sigma公司，货号：M2128）；Annexin VFITC/PI双染细胞凋亡检测试剂盒（凯基生物技术有限公司，货号：KGA512）；As2O3溶液（哈尔滨伊达药业有限公司，规格：10 mg，10 mL，货号：2010-05-04）。……