朱乘光, 叶星辰, 任彪, 周学东, 程磊
1.口腔疾病研究国家重点实验室 国家口腔疾病临床医学研究中心 四川大学华西口腔医院牙体牙髓病科,四川成都(610041); 2.口腔疾病研究国家重点实验室 国家口腔疾病临床医学研究中心,四川 成都(610041)
近年来,随着抗生素的广泛使用、免疫缺陷疾病的发病率增高,我国侵袭性念珠菌病发病率呈现增高趋势[1]。白色念珠菌(Candida albicans,C.albicans)是人类主要的致病性真菌之一,可导致念珠菌血症及侵袭性念珠菌感染等诸多真菌感染性疾病,是临床上病死率最高的致病真菌,在免疫功能低下的人群中更为严重[2-3]。在抗真菌治疗应用中,多烯类药物,如两性霉素B(amphotericin B,AmB)和氮唑类药物,如氟康唑(fluconazole,FLC)是目前最为常用的抗真菌药[4]。临床上常将AmB与氮唑类药物联合应用以达到更好的治疗效果,减少副作用发生[5-7],但两者联用的作用机制仍存在较多争议[8-10]。本实验将探讨AmB 与FLC 在体外的时间依赖性相互作用,为揭示两者不同条件下的相互作用关系提供实验依据。
白色念珠菌标准株SC5314 购自美国标准生物品收藏中心(保藏号:ATCC MYA-2876,American Type Culture Collection)。使用平板画线法于酵母膏胨葡萄糖琼脂培养基(yeast extract peptone dextrose medium,YPD)活化菌株,配方:酵母提取物1%,蛋白胨2%,葡萄糖2%,琼脂2%,于35 ℃,5%CO2的条件下过夜孵育。于上述培养条件下的白色念珠菌,在RPMI 1640 培养基中制备菌悬液,菌液终浓度为(0.5 ~2.5)× 104CFU/mL。将AmB 和FLC 分别溶于二甲基亚砜(DMSO)中以制备药物储备液,浓度分别为10 mg/mL 与2 mg/mL,冷藏待用。