24孔板培养毕赤酵母GYW-1合成谷胱甘肽条件的优化

洪 伟,孙浩浩,王 洲

(1.芜湖职业技术学院生物工程学院，安徽芜湖 241003；2.安徽工程大学生物与食品工程学院，安徽芜湖 241000)

0 引言

谷胱甘肽(Glutathione ,GSH)是由谷氨酸、半胱氨酸、甘氨酸缩合而成的一种含γ-谷氨酰基和巯基的生物活性三肽类化合物[1-3]，在蛋白质和DNA的合成、氨基酸的转运、细胞的保护过程中起着重要作用.同时，谷胱甘肽具有抗衰老、抗氧化和免疫调节活性[4-6].它主要分布于动物、植物、微生物细胞中，被广泛应用于临床医学、运动保健、食品加工等很多领域.因此GSH已成为各国科学家研究和探索的热点[7].

目前国内外生产谷胱甘肽的方法主要有萃取法、化学合成法、发酵法、酶法[8].由于发酵法生产GSH具有菌种易于培养、原料来源方便廉价、反应步骤简单、成本低、转化效率高、生产速率快等优点，已成为当前生产谷胱甘肽的主要方法[9].但目前微生物发酵法生产谷胱甘肽的产量较低，因此通过诱变提高微生物合成谷胱甘肽能力具有重要意义.现行常用的菌种选育方法是随机筛选法，即采用摇瓶逐个进行发酵培养并测定菌株的目标产量，该方法存在工作量大、周期长和成本高等缺点[10].高通量筛选技术目前在微生物制药领域有很多成功的应用[11-12]，同时微孔板具有孔板工作容积小，高度平行化，可同时发酵大量突变株的优势.因此，将高通量筛选技术应用于GSH高产菌株的筛选中，可缩短筛选周期，提高工作效率.在GSH高产菌株的高通量筛选中，通过优化发酵条件……