ECHS1基因在肝癌细胞迁移、侵袭及预后中的作用

杨 倩，姚跃英，林园园

厦门医学院临床医学系，福建 厦门 361023

原发性肝癌是消化系统最常见恶性肿瘤之一，其发病率和死亡率居高不下。现研究发现，肝癌的形成是多因素、多基因及多阶段的复杂过程，主要认为与癌基因激活、抑癌基因失活及各种生长因子表达失衡有关[1]。本研究采用8 064条人类靶基因的cDNA表达谱芯片对原发性肝细胞肝癌(primary liver cellular carcinoma,PLC)差异基因进行筛选和分析，发现烯脂酰辅酶A水合酶短链1(Enoyl coenzyme A hydratase short chain 1，ECHS1)基因在PLC中显著高表达。为进一步探讨该基因在PLC细胞迁移、侵袭中的作用，本研究依次干扰和过表达ECHS1基因观察对PLC恶性表型的影响，最后通过TCGA数据库分析ECHS1基因在肝癌组织中的表达及其对预后的影响。

1 材料与方法

1.1 材料来源选取12例厦门医学院附属第二医院2019年2月至2020年5月经手术切除、术后病理证实为PLC患者的标本12例，男8例，女4例；年龄41.3～64.8岁；术后病理证实为PLC。所有患者术前均未行放化疗、生物治疗等，切除术后新鲜标本予生理盐水冲洗，标记后置于液氮中储存。肝癌细胞株HepG2购自中科院细胞资源中心并采用STR技术鉴定细胞。将HepG2细胞置于含有10%FBS的RPMI-1640培养基中培养，在37 ℃、体积分数为5%的CO2恒温细胞培养箱中培养。该研究征得患者及其家属书面同意，并通过伦理委员会批准(批号：LL2019002)。

1.2 芯片杂交按Trizol法[2-3]提取肝癌及癌旁两组样本RNA，将两组RNA等量混合，予逆转录荧光标记，癌旁正常肝组织cDNA用Cy5-dUTP标记，而PLC组织cDNA用Cy3-dUTP标记。已标记过样品与含有8 064条人类靶基因芯片(购自深圳微芯生物公司)杂交，用……