携带NDV HN 基因的减毒鼠伤寒沙门菌Ⅲ型分泌系统构建及其生物学特性分析

宋敏杰，周小双，石胜丽，朱文文，田文静，程相朝，郁 川，

（1. 洛阳职业技术学院宠物与人类健康工程技术中心，河南洛阳 471900；2. 河南科技大学动物科技学院/洛阳市活载体生物材料与动物疫病防控重点实验室，河南洛阳 471023；3. 新乡市动物卫生监督所，河南新乡 453000）

鸡新城疫（Newcastle disease，ND）是由新城疫病毒（Newcastle disease virus，NDV）引起的一种对家禽业发展危害严重的传染病[1]，其防治一直受到业界的广泛关注。近年来，被发现的NDV 基因型种类越来越多，ND 在我国的流行形势也越来越严重，给我国家禽业养殖造成了严重的经济损失[2]。NDV 为副黏病毒科禽腮腺炎病毒属成员，为有囊膜的单股负链RNA 病毒，其基因组编码6种病毒结构蛋白[3]，分别为核衣壳蛋白（Nucleocapsid protein，NP）、磷酸化蛋白（Phsphorylated protein，P）、基质蛋白（Matrix protein，M）、融合蛋白（Fusion protein，F）、血凝素-神经氨酸酶蛋白（Hemagglutinin‑neuraminidase protein，HN）及依赖RNA 的RNA 聚合酶（L）。HN 蛋白是NDV 粒子重要的免疫原性蛋白和毒力因子，能够诱导机体产生抗体，使之具有宿主保护性[4‑5]。因此，NDV HN蛋白是目前研究新城疫DNA疫苗的首要选择，为ND的防控及新型疫苗的研制提供了新思路。

减毒活疫苗因其具有很好的安全性，是良好的载体和天然免疫佐剂，备受医学与兽医学的广泛关注[6‑8]。鼠伤寒沙门菌为胞内侵袭性菌，通过基因工程方法减毒后不影响其侵袭能力，携带质粒DNA 的细菌在抗原递呈细胞内发生溶解或以宿主吞噬小体进入胞质，并将DNA 释放到细胞核，从而使抗原基因在体内进行表达，并诱导相应的细胞免疫和体液免疫。减毒沙门菌作为活疫苗本身具有免疫佐剂的作用，通过口服可诱导黏膜免疫[9‑10]。……