副猪嗜血杆菌和PCV2共感染对猪肺泡巨噬细胞免疫分子表达的影响

郑新添 ， 林成鸿 ， 李晓华 ， 林炜明 ， 黄翠琴

(1.龙岩学院生命科学学院 ， 福建 龙岩 364000 ； 2.福建省家畜传染病防治与生物技术重点实验室 ， 福建 龙岩 364000)

副猪嗜血杆菌(Haemophilusparasuis,Hps)是定植于猪上呼吸道的一种常在菌，在一定条件下可侵入肺部，引起猪的格拉氏病。副猪嗜血杆菌感染引起系统性疾病，特别是断奶仔猪的系统性炎症，如浆膜炎、腹膜炎、心包炎和关节炎等[1-2]。Hps至少拥有15个血清型，其中血清4型和5型[3]是主要流行株。Hps菌株感染的多样性及与其他病原共感染，如与猪圆环病毒2型(Porcine circovirus 2,PCV2)、猪繁殖与呼吸综合征病毒、胸膜肺炎放线杆菌[4-6]，加剧了猪的发病，增加了防控难度[7]。肺泡巨噬细胞(Porcine alveolar macrophage，PAM)是抵抗病原体感染的重要防线，在天然免疫和特异性免疫功能发挥重要作用[8]。Hps通过黏附并侵入PAM，后者能吞噬并清除低毒力细菌，以及通过释放细胞因子和趋化因子修复宿主由于炎症引起的创伤[9]。猪圆环病毒2型是猪场普遍存在的一种病毒，可以直接或间接导致机体免疫抑制，PCV2单独感染时不产生明显症状，但其他病原微生物混合感染能加重病情[10]。Hps和PCV2共感染在猪场广泛流行，但其致病机制尚不清楚。本试验建立了体外Hps和PCV2共感染PAM模型，通过检测感染后不同时间细胞因子和抗原递呈相关分子的表达水平，以探讨Hps和PCV2共感染的致病机制。

1 材料与方法

1.1 菌株和毒株 副猪嗜血杆菌Hps LY02株(血清5型)、Hps LYH5株(血清4型)、PCV2 LY株(TCID50为10-5.0/mL)，均由福建省家畜传染病防治与生物技术重点实验室分离并保存。

1.2 主要试剂 总RNA提取试……