miR-493-5p抑制人卵巢癌细胞系SKOV3增殖和迁移

李少儒，秦海霞，刘珊珊，侯瑞杰

(新乡医学院第一附属医院 妇产科，河南 新乡 453100)

卵巢癌(ovarian cancer)是女性生殖系统最常见的恶性肿瘤，研究表明miRNA与卵巢癌的发生发展相关[1]。miR-493-5p的过表达通过下调类Kruppel因子5(Kruppel-like factor 5，KLF5)并使磷脂酰肌醇3激酶/蛋白激酶B(phosphoinositide 3 kinese/protein kinase B，PI3K/AKT)信号通路失活而抑制骨肉瘤细胞的增殖和转移[2]。高表达miR-493-5p通过调控囊泡相关膜蛋白2(vesicle-associated membrane protein-2，VAMP2)抑制肝癌细胞的增殖、迁移和侵袭，诱导其衰老凋亡[3]。然而miR-493-5p对卵巢癌的影响及机制尚不清楚。G蛋白偶联受体激酶相互作用因子1(G-protein-coupled receptor kinase interactor-1，GIT1)是介导各种肿瘤进展的多功能支架蛋白，研究发现，GIT1可促进肝癌细胞的侵袭、迁移和增殖[4]。miR-149-5p可通过靶向GIT1抑制甲状腺髓样癌中的细胞增殖和侵袭[5]。而GIT1对卵巢癌的影响也尚不清楚。本实验通过在线生物信息学软件预测发现miR-493-5p与GIT1有结合位点，因此，本实验旨在研究miR-493-5p/GIT1对卵巢癌细胞系增殖和迁移的影响以及miR-493-5p是否通过调控GIT1影响卵巢癌细胞系的增殖和迁移。

1 材料与方法

1.1 材料

人卵巢癌细胞系A2780、SKOV3及OVCAR3和人卵巢上皮细胞系IOSE80(中国科学院典型培养物保藏委员会细胞库)；胎牛血清、RPMI-1640培养基(上海谷研实业有限公司)；胰蛋白酶(广州威佳科技有限公司)；Trizol试剂、反转录试剂盒(北京百奥莱博科技有限公司)；荧光定量PCR试剂盒(上海吉玛制药技术有限公司)；MTT试剂盒(大连美仑生物技术有限公司)；BCA试剂盒(上海经科化学科技有限公司)；双荧光素酶报告实验试剂盒(GeneCopoeia公司)；Transwell小室、Matrigel(上海代轩生物科技有限公司)。

1.2 方法

1.2.1 细胞的分组及处理：常规培养卵巢癌……