黄 博,程苾恒,解美婷,刘珊汕,魏 敏
(湖北省人民医院 妇产科,湖北 武汉 430000)
子宫内膜癌(endometrial carcinoma)是常见的妇科恶性肿瘤,目前手术仍是其主要的治疗方法[1]。Forkhead家族转录因子叉头框蛋白M1(forkhead box protein M1,FOXM1)作为调控细胞周期的癌基因,对肿瘤的病理改变起促进作用,并对肿瘤的生长、侵袭与转移具有调控作用[2]。有研究发现,FOXM1是一种细胞增殖特异性转录因子,与非恶性前列腺上皮细胞相比,其在前列腺癌细胞中高表达,提示FOXM1异常过表达有助于前列腺癌的发生发展[3]。另有研究发现,宫颈癌细胞中抑制FOXM1的表达可以抑制肿瘤细胞的增殖、迁移、侵袭和药物敏感性[4]。然而,FOXM1对子宫内膜癌的影响目前研究甚少,本研究探讨抑制FOXM1的表达对子宫内膜癌细胞系HEC-1B增殖、迁移和侵袭的影响,为子宫内膜癌的临床治疗提供新靶点的实验依据。
1.1.1 细胞系:选择人子宫内膜癌细胞系HEC-1B和人正常子宫内膜上皮细胞系hEECs,购自中国科学院上海细胞生物学研究所细胞库。
1.1.2 实验试剂:LipofectamineTM2000(上海碧云天生物技术有限公司);siRNA-NC和siRNA-FOXM1(上海吉玛制药技术有限公司);Trizol(赛默飞世尔科技(中国)有限公司);CCK8试剂盒(苏州瑞诺德生物科技有限公司);FOXM1、血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)、碱性成纤维细胞生长因子(basic fibroblast growth factor,bFGF)、GAPDH上下游引物(生工生物工程(上海)股份有限公司);FOXM1兔多克隆抗体(Abcam公司);VEGF、bFGF兔多克隆抗体、山羊抗兔二抗(LI-COR公司)。
1.2.1 细胞分组及转染:子宫内膜癌细胞系HEC-1B,培养于37 ℃、5% CO2、相对湿度90%、含有10%胎牛血清的RPMI-1640培养基中。取对数生长期细胞,采用LipofectamineTM2000进行转染。……