刘文华 于小雲 魏敏 段世航 张长朝 郭东会*
(山东第一医科大学生命科学学院,山东泰安 271016)
黄连别名味连、鸡爪连,属毛莨科、黄连属草本植物,有清热解毒的功效,可以降血糖、治疗痢疾等。连翘属木樨科、连翘属落叶灌木,有清热、解毒、消肿等功效,可治温热、丹毒、斑疹、小便淋闭。
提取总黄酮的方法包括浸提法[1]、超声法[2]、超临界流体萃取法[3]、酶提取法等[4],通过不同的微生物发酵方法从黄连和连翘中提取黄酮类化合物的文献较少。此方法通过微生物发酵方法生产复合酶制剂,并利用它们分解植物细胞壁中的木质素和纤维素等大分子物质,从而促进析出有效成分。此方法,操作更简便,花费更少。本实验采用两种固体发酵法方法提取黄酮过程:一为使用黑曲霉或枯草芽孢杆菌单一菌种;二为使用两种菌混合来。并分析其黄酮的抗氧化活性为黄连和连翘的开发与使用提供丰富的理论基础[5]。
黄连、连翘(安国市旭芳中药材经营有限公司),粉碎。黑曲霉、枯草芽孢杆菌由山东第一医科大学生命科学学院微生物实验室提供。芦丁(中国药品生物制品检定所)、DPPH(上海源叶生物科技有限公司)、啡啰嗪(阿拉丁试剂);其他试剂均为分析纯。
1.2.1 黄酮提取方法的优化
1.2.1.1 超声提取中草药黄酮。中草药(黄连或连翘)10g,加乙醇(65mL,60%),30℃、45Hz、功率为50%,超声(50min),纱布(4 层)过滤。取滤液20mL,用乙醇(60%)将液体定容至100mL,即为中草药黄酮的提取液,将提取液放入冰箱备用[5]。
1.2.1.2 黑曲霉固体发酵法辅助提取中草药黄酮。……