诊断用D-乳酸脱氢酶研究进展

罗维晓 徐振上 刘新利

摘要 D-乳酸脱氢酶是乳酸脱氢酶根据结构进行区分的重要的一类工具酶。从不同微生物中提取的D-乳酸脱氢酶的来源、基因工程以及固定化等方面综述了D-乳酸脱氢酶的研究进展，以期为获取优质的诊断用D-乳酸脱氢酶提供理论指导。

关键词 D-乳酸脱氢酶;来源;基因工程;酶固定化

中图分类号 Q 936  文献标识码 A  文章编号 0517-6611（2021）23-0011-04

doi：10.3969/j.issn.0517-6611.2021.23.003

Research Progress of D-lactate Dehydrogenase for Diagnosis

LUO Wei-xiao，XU Zhen-shang，LIU Xin-li

（School of Bioengineering，Qilu University of Technology / State Key Laboratory of Bio-based Materials and Green Paper Making，Jinan，Shandong 250353）

Abstract D-lactate dehydrogenases （D-LDHs） are an important class of enzymes that differentiate lactate dehydrogenases according to their structure. In this paper， the source， genetic engineering and immobilization of D-lactate dehydrogenase extracted from different microorganisms were summarized in the research progress of D-lactate dehydrogenase， in order to provide theoretical guidance for obtaining high-quality diagnostic D-lactate dehydrogenase.

Key words D-lactate dehydrogenase;Source;Genetic engineering;Enzyme immobilization

作者简介 罗维晓（1990—），男，山东济南人，工程师，硕士，从事诊断酶研究。通信作者，教授，博士，硕士生导师，从事微生物活性代谢产物研究。

收稿日期 2021-03-18

D-乳酸脱氢酶以氧化型辅酶Ⅰ（NAD+）/还原型辅酶Ⅰ（NADH）作为辅酶，可以可逆催化氧化乳酸生成丙酮酸，根据这一反应原理D-乳酸脱氢酶在分析其他酶和生物制品中广泛应用，在临床诊断中D-乳酸脱氢酶作为天门冬氨酸氨基轉移酶[1]、丙氨酸氨基转移酶[2]、同型半胱氨酸[3]、钾离子酶法[4]等诊断项目中的关键工具酶，用于人体各项疾病的辅助诊断。

决定试剂性能的关键是工具酶的质量，而工具酶的生产工艺又是决定其质量和产率的关键因素，由于诊断酶试剂自身的复杂性，作为诊断工具酶应该具备对底物专一性高、酶自身热稳定性好、酸碱耐受范围宽、比活性高、有害杂酶含量低等要求[5]，为了能够提高工具酶的质量，首先需要选育高产菌株，探索最优化的发酵工艺和后提取纯化技术，以提高酶的产率，保证原酶质量。目前随着基因工程菌技术的不断成熟，通过基因改造，能够大大提高目的酶的产量以及改善酶的性质。……