诱变筛选高产虾青素法夫酵母及发酵条件优化

刘 晓 桐，孙 欣 宇，刘 玥，王 一 惠，刘 冰 南

(大连工业大学 生物工程学院,辽宁 大连 116034 )

0 引 言

虾青素是一种类胡萝卜素，具有很强的抗氧化性能[1-3]。与化学合成的虾青素相比，天然虾青素更加安全、易利用[4-6]。法夫酵母作为目前最主要的天然虾青素来源之一，具有发酵条件简单、易于高密度培养、生长周期较短等特点[7-9]。野生型红法夫酵母含30～100 μg/g的类胡萝卜素，其中90%为虾青素，但虾青素的总产量低，同时菌种的发酵温度较低(20 ℃)等因素限制了其工业生产的可能性[10-12]。王立梅等[13]采用析因设计法、中心组合设计及响应面分析法使得虾青素产量从5.89 μg/mL提高到10.9 μg/mL。郑蕾等[14]研究发现蔗糖和葡萄糖分别是红法夫酵母生长和积累虾青素的最佳碳源；在最佳氮源组成的情况下，虾青素的产量达到6.78 mg/L。因此，提高法夫酵母的发酵温度和虾青素的产量、降低成本成为当前的研究热点。

本试验以在25 ℃下可以生长且产虾青素的突变菌株XD-YB作为出发菌株，使用亚硝基胍(NTG)作为诱变剂，对法夫酵母进行诱变[15]。后使用二苯胺(DPA)作为筛选剂，筛选出一株性状稳定、高产虾青素的突变菌株——法夫酵母X-NTG-25。为确定最佳发酵工艺条件，以虾青素为指标，采用响应面法对培养基和培养条件进行优化[16]，以期得到虾青素产量的最优培养基成分和条件。

1 材料与方法

1.1 材 料

菌株：红法夫酵母(XD-YB)，实验室前期诱变获得的耐热菌株。

培养基：PDA培养基

1.2 方 法

挑取斜面上的菌株至装有50 mL新鲜PDA培养基的250 mL锥形瓶，置于25 ℃、180 r/min的恒温摇床，培养36～48 h至对数生长期。……