继发性噬血细胞综合征患者NK细胞KIR受体及功能与CTL细胞功能的研究*

梅仁 蔡梦洁 戴兰 沈文红 朱明清

噬血细胞综合征（HLH）被认为是一种淋巴单核巨噬细胞系统反应增生的组织细胞病，主要是由于杀伤性T细胞（CTL）及NK细胞功能缺陷导致抗原清除障碍，刺激巨噬细胞活化增殖，分泌大量炎症细胞因子而导致的一组临床综合征[1]。噬血细胞综合征主要分为两种，原发性（遗传性）存在明确基因缺陷或家族史，为常染色体隐性遗传或X连锁遗传，常见的基因有PRF1基因；继发性可由感染（主要为EB病毒感染）、恶性肿瘤、自身免疫性疾病、药物、获得性免疫缺陷（如移植）等多种因素引起[2]。目前诊断主要参照国际组织细胞协会2004年修订标准[3]。HLH的诊断比较复杂，临床表现不典型，特异性差，诊断难度大。因此，探求有效诊断方式，及时采取干预措施以减少预后风险极为重要。研究表明，HLH患者的NK细胞功能和CTL细胞功能存在缺陷[4-5]。本文旨在探索NK细胞功能和CTL细胞功能在辅助诊断继发性噬血细胞综合征中的作用，为临床早发现、早诊断、早治疗提供参考依据。

资料与方法

1 一般资料 选取苏州大学附属第一医院2018年2月～2021年2月收治的26例继发性HLH患者。入选标准：符合国际组织细胞协会制定的2004年诊断标准[3]。26例患者男性18例，女性8例，中位年龄45岁。同期选择17例在我院门诊接受体检的健康者作为对照组，男性12例，女性5例，中位年龄41岁。本研究通过院伦理委员会审批。

2 试剂及仪器 仪器采用Navios流式细胞仪（Beckman coulter公司），离心机，涡旋振荡仪等。单抗：CD3-ECD、CD56-PC7、CD8-APC（Beckman coulter公司）、CD158a-PCP5.5（Invitrogen）、CD158b-FITC（Novus Biologicals）、CD158e-PE（mitengi Biotec）、CD158i-APC（Novus Biologicals）、Perforin-FITC（BD Pharmingen）、GranzymeB-PE（BD Pharmingen），氯化铵溶血剂（QIAGEN公司），破膜剂Intracell（Dako公司）。……