基于AMPK-mTOR信号通路探讨黑果枸杞花青素对小鼠巨噬细胞RAW264.7自噬的影响

武 强,薛才华，王梦杰，刘嘉华，张龙飞，屠园园，吴 华

(青海大学 农牧学院，青海 西宁 810016)

细胞自噬(autophagy)是真核生物进行自我保护的一种机制，主要是通过溶酶体对细胞内的蛋白质和细胞器进行融合降解从而达到细胞稳态[1]。目前，为了解自噬的免疫机制都会深入研究自噬的调节通路。其中,mTOR信号通路是最常见的通路之一,mTOR介导的信号通路是调控细胞能量和营养代谢的重要枢纽。当细胞在营养缺乏、新陈代谢紊乱、炎症反应及外界压力的刺激下,细胞会产生相应的应激反应,mTOR的活性会降低，同时激活细胞的自噬；当细胞营养充足时,mTOR活性又会被激活，从而抑制细胞自噬[2]。

从植物提取出来的花青素颜色呈紫红色，属于花色苷类色素，属于黄酮类物质，天然可食用。人们常将黑果枸杞称为“花青素之王”[3]。黑果枸杞中的花青素功能较多，在细胞免疫功能上，目前的研究主要有增强淋巴细胞增殖、促进肿瘤细胞的凋亡[4]。巨噬细胞是体内的“打扫机器”，在免疫系统功能中起重要的作用。它不仅能够清除体内坏死的细胞和病原体，还能与溶酶体融合形成自噬溶酶体，以有效杀伤清除细菌[5]。因此，本试验拟通过AMPK-mTOR信号通路探讨黑果枸杞花青素对小鼠巨噬细胞Raw264.7自噬的影响，从细胞自噬层面揭示黑果枸杞花青素的免疫机理。

1 材料与方法

1.1 细胞及主要试剂小鼠巨噬细胞株RAW264.7，购买于中国科学院上海细胞库；黑果枸杞花青素购自青海金麦杞生物科技有限公司(纯度61%、灰分0.6%、蛋白质6%、糖1.32%、氨基酸3.56%)；……