测定大豆中氯虫苯甲酰胺残留量的方法研究

冯柳娟

（深圳市深业航天食品与环境检测科技有限公司，广东深圳 518040）

0 引言

氯虫苯甲酰胺（Chlorantraniliprole） 是一种双酰胺类杀虫剂，于2008年上市，目前已在世界上100多个国家销售，中国也是氯虫苯甲酰胺的大市场。氯虫苯甲酰胺具有高效广谱的特点，广泛应用于农作物中。据报道大豆、水稻是氯虫苯甲酰胺的最大的用药作物[1]。大豆是中国重要粮食作物之一，常用于制作各种豆制品、榨取豆油、酿造酱油和提取蛋白质。目前，对大豆中氯虫苯甲酰胺的研究较少，氯虫苯甲酰胺常用的检测技术有液相色谱法、液相色谱质谱法、气相色谱质谱法。杨森等人[2]利用液相色谱法测定大豆中的氯虫苯甲酰胺残留量。赵军溪[3]利用LC-MS/MS测定蔬菜中氯虫苯甲酰胺残留量。林毅楠等人[4]利用LC-MS/MS测定茶叶中氯虫苯甲酰胺残留量。国际《GB 2763—2019食品安全国家标准食品中农药最大残留限量》中氯虫苯甲酰胺的限量为临时限量，没有相应的检测方法。采用GC-MS/MS法建立大豆中氯虫苯甲酰胺残留量测定的分析方法，为大豆的安全检测提供技术支持。

1 试验部分

1.1 仪器

气相色谱-三重四极杆质谱联用仪（TRACE 1300-TSQ 9000），美国赛默飞公司产品；氮吹仪（可控温）、电子天平（感量0.01 g）、均质器（转速不低于15 000 r/min）、涡旋振荡器、粉碎机。

1.2 试剂

乙腈（色谱纯）、正己烷（色谱纯）、氯化钠（分析纯）、乙二胺-N-丙基硅烷化硅胶（PSA）（40～60 μm）、HC-C18 专用超洁净填料 （40～63 μm）、100 mg/L氯虫苯甲酰胺标准物质（Anpel）、纯度≥95%环氧七氯标准物质（Dr.Ehrenstorfer GmbH）。

1.3 仪器条件

1.3.1 色谱条件

色谱柱：TG-5MS（30 m×0.25 mm×0.25 μm）石英毛细管柱。

色谱柱温度程序：初始温度40℃，保持1.5 min，然后以25℃/min程序升温至90℃，保持1.5 min，以25℃/min程序升温至180℃，以5℃/min程序升温至280℃，以10℃/min程序升温至300℃，保持5 min。

载气为氦气（纯度≥99.999%），恒流，流速1.2 mL/min。进样量1 μL，不分流进样。进样口温度270℃。

1.3.2 质谱条件

离子源温度300℃，传输线温度280℃，扫描方式为SRM，方法模式为Timed，离子化模式为EI。

1.4 测定方法

1.4.1 提取

取整粒大豆样品充分混匀，将其粉碎，放入聚乙烯瓶中。用电子天平准确称取均匀的试样5 g（精确至0.01 g）于50 mL塑料离心管中，加入10 mL水混匀，静置30 min。再加入15 mL乙腈，均质2 min，倒入已称好的NaCl 5 g，剧烈振荡1 min，以转速5 000 r/min离心5 min。

1.4.2 净化

取8 mL上清液至400 mg PSA、800 mg C18、1 200 mg无水硫酸镁的离心管中，充分涡旋混匀1 min后，取净化后的上清液2 mL于40℃水浴中氮吹至近干，加入正己烷980 μL，环氧七氯20 μL复溶后，过0.22 μm疏水性滤膜上机待测。同时，做基质空白试验。

2 结果与分析

2.1 氯虫苯甲酰胺仪器方法的确定

配制500 μg/mL的氯虫苯甲酰胺标准工作液，采用Full Scan、AUTOSRM及SRM等方式确定氯虫苯甲酰胺的保留时间及特征离子对，通过调节程序升温得到较优的仪器方法。

氯虫苯甲酰胺和环氧七氯的离子信息见表1。

表1 氯虫苯甲酰胺和环氧七氯的离子信息

2.2 净化材料的比例选择

试验方法前处理是采用净化填料的不同比例（PSA∶C18=1∶1，PSA∶C18=1∶2，PSA∶C18=2∶1）进行优化，C18主要吸附油脂等弱极性杂质，PSA去除有机酸、色素、金属离子和酚类等。结果显示，3种方式的回收率均能达到回收率合格范围（80%～120%），但PSA∶C18=1∶2杂质峰的干扰较小，故试验选择PSA 400 mg，C18 800 mg进行净化。

不同的净化填料比例对氯虫苯甲酰胺试验结果回收率的影响见表2，不同的净化填料比例在空白基质中对氯虫苯甲酰胺的干扰情况见图1。

表2 不同的净化填料比例对氯虫苯甲酰胺试验结果回收率的影响

图1 不同的净化填料比例在空白基质中对氯虫苯甲酰胺的干扰情况

2.3 方法的最低检出限

通过逐级稀释确定氯虫苯甲酰胺的测定低限为0.01 mg/kg （S/N=10）。

2.4 方法的线性

精确吸取一定量的10 mg/L的标准溶液，用基质空白溶液配制标准工作液，加入20 μL内标，配制成质量浓度依次为20，50，100，200，500 μg/L的标准工作溶液，曲线回归方程为Y=2.433×106X-3.152×104，相关系数为0.999，表明该方法线性良好。

空白基质配制的氯虫苯甲酰胺标准曲线见图2。

图2 空白基质配制的氯虫苯甲酰胺标准曲线

2.5 方法的准确度

称取大豆样品各6份，按照0.02，0.06，0.10 mg/kg的质量浓度进行试验。

氯虫苯甲酰胺试验结果回收率及重复性结果见表3。

表3 氯虫苯甲酰胺试验结果回收率及重复性结果

结果显示，0.02，0.06，0.10 mg/kg质量浓度对氯虫苯甲酰胺回收率的影响不大，均可以达到90%以上。

2.6 方法的精密度

将处理好的大豆样品中的氯虫苯甲酰胺试样重复进样6次，查看峰面积，试验结果显示RSD为2.9%。

3 结论

采用GC-MS/MS进行大豆中的氯虫苯甲酰胺的残留量的测定试验可靠性高、准确度好，可用于日常检测工作中，可为消费者的食品安全提供保障，可为推动相关标准的建立提供一份依据，同时满足市场的需求，将大豆中的氯虫本甲酰胺的研究延伸到多个领域。