魏静静 谢艳亭 岳娟 董军璐 司玮 王春梅 张红敏 王丽娅
郑州大学人民医院 河南省人民医院眼科 河南省立眼科医院 河南省眼科研究所 河南省眼科与视觉科学重点实验室,郑州 450003
腺嘌呤核糖核苷酸活化的蛋白激酶(adenosine 5’-monophosphate-activated protein kinase,AMPK)是一种由α、β和γ亚基组成的异源三聚体蛋白激酶,参与调节葡萄糖、脂质以及蛋白质的代谢和维持能量稳态,被称为细胞能量调节器[1-2]。近年来研究发现,AMPK信号通路除在能量代谢调节方面起关键作用外,在感染和宿主防御方面也起到重要作用[3-4]。真菌性角膜炎是由致病真菌引起的严重感染性、致盲眼病,临床抗真菌类滴眼制剂种类有限,治疗棘手[5-6]。位于角膜组织最外层的上皮细胞是角膜防御致病微生物侵袭的第一道屏障,是防御真菌感染的关键,目前角膜上皮细胞是否存在AMPK磷酸化尚不清楚。在真菌性角膜炎炎症初期及进展期,大量多形核中性粒细胞浸润[7],白细胞介素6(interleukin-6,IL-6)是一种由184个氨基酸组成的单链糖蛋白[8],其能促进多形核中性粒细胞的激活[9]。IL-6以自分泌-旁分泌的方式起作用,诱导驻留的角膜细胞产生巨噬细胞炎性蛋白(macrophage inflammatory protein,MIP)-2和MIP-1α[10],MIP能促进角膜局部炎症免疫细胞聚集,从而发挥杀菌作用。本实验拟研究角膜上皮细胞是否存在AMPK磷酸化以及真菌对角膜上皮细胞AMPK磷酸化及IL-6表达的影响,探讨AMPK磷酸化和IL-6在真菌性角膜炎中的作用。
1.1.1细胞和菌株来源 人永生化角膜上皮细胞系CRL-11135 HCE-2(50.B1)(美国ATCC公司)。腐皮镰孢菌(编号:3.5840)(中国科学院微生物研究所)。……