云芝糖肽抗烟草花叶病毒活性及云芝液态发酵条件的优化

王 燕，米伟丽，吴 宽

(1.杨凌职业技术学院 生物工程分院，陕西杨凌 712100;2.西安理工大学，西安 710048；3.旱区作物逆境生物学国家重点实验室/西北农林科技大学 植保学院，陕西杨凌 712100)

病毒病是仅次于真菌病的第二大作物病害。由于作物病毒病在生产上易传播蔓延，每年都给世界作物造成巨大损失。中国是一个农业大国，病毒病严重损害水稻、小麦、玉米、马铃薯、苹果、猕猴桃、甜瓜、番茄等农作物，因此，有必要研究与开发新型抗病毒药物，以采用绿色防控，挽回产量损失。

云芝(Coriolusversicolor)在中国资源丰富[1]。采用多种方法，从云芝菌中提取云芝糖肽，是云芝细菌中的重要活性成分之一，具有提高人体免疫力和抵抗乙肝病毒和乳腺癌疾病的功能[2-7]。Zhao等[8]发现喷施云芝糖肽能增加植物体内水杨酸的含量，上调富含亮氨酸的抗病蛋白基因表达量，抵抗烟草花叶病毒(TMV)的感染。在前人抗病毒活性和发酵技术研究的基础上，本研究优化云芝发酵条件，测定PSP对烟草花叶病毒的钝化、预防与治疗作用，为工业化大批量连续性发酵生产云芝糖肽提供技术条件，期望研发成为一种新的微生物源抗病毒剂[9-12]与广谱免疫剂[13]。

1 材料与方法

1.1 材料与试剂

发酵菌株(杂色云芝菌)采集于秦岭森林腐木上。烟草花叶病毒(TMV)、三生烟(Nicotianatobacumvar.‘Samsun’)和心叶烟(N.glutinosa)由西北农林科技大学植保学院提供。烟草花叶病毒保存在防虫纱网内三生烟苗上。病毒必克药剂购买自杨凌农药经销店。PDA液态发酵培养基组成：葡萄糖20 g、蔗糖10 g、酵母提取物 2 g、蛋白胨2 g、K2HPO42 g、KH2PO41.5 g、MgSO41.5 g，加入蒸馏水1 L。……