枸杞枝条发酵饲料对肉牛育肥效果及免疫性能的影响

侯鹏霞， 王建东#， 安 魏， 王亚军， 梁小军

（1.宁夏农林科学院动物科学研究所，宁夏银川750002；2.宁夏农林科学院枸杞科学研究所，宁夏银川750002）

宁夏是全国枸杞主产区， 截至2020 年底，全区枸杞种植面积35 万亩，鲜果产量26 万t。 枸杞为茄科， 属多年生落叶灌木， 具有很强的萌蘖能力，在生长期需要不断的抹芽、剪枝；休眠期也需要对树体进行整形修剪。 枸杞枝条年剪枝量可达20 万t 以上，但其绝大多数用于焚烧、废弃，少数用于开展扦插育苗、 栽培基质的研究 （陈亮等，2015），造成占用土地资源和环境污染。

枸杞枝条含有粗蛋白质、粗纤维、多糖等多种营养物质（冯海萍等，2017），其中枸杞多糖、总黄酮等活性成分能够提高动物机体免疫力。 研究发现， 枸杞残次果含有枸杞多糖是一种天然免疫调节剂，可诱导动物机体产生免疫球蛋白、细胞因子等（王建东等，2018），奶牛日粮中添加枸杞枝条粉能够提高奶产量及乳品质（梁小军等，2008）。但枸杞枝条木质坚硬，难以消化，且适口性差，直接饲喂反刍动物消化率较低。 陈志龙等（2020）将枸杞枝条粉碎添加乳酸菌、 纤维素酶和酵母菌进行青贮调制，结果表明青贮后虽可一定程度改善其饲用价值，但降低了枸杞枝条功能性物质枸杞多糖和黄酮的含量。本试验将枸杞枝条进行生物发酵处理后饲喂育肥牛，研究枸杞枝条发酵饲料对肉牛育肥效果及免疫性能的影响，以期为枸杞枝条饲料化开发利用的可行性提供基础。

1 材料与方法

1.1 枸杞枝条生物发酵处理 参考刘杨等（2019）方法进行枸杞枝条生物发酵处理，其营养成分见表1。

表1 枸杞枝条发酵饲料营养成分（风干基础）%

1.2 主要仪器 酶标仪（SM-3），北京天石天力公司产品；自动洗板机（ST360W），上海科华公司产品；电热恒温器（HH-W21-600），天津泰斯特有限公司产品；离心机（TDL80-2B），上海安亭科学仪器有限公司产品；DFM-96 r-放射免疫计数仪，合肥众成机电。

1.3 试验设计 选择健康、体重400 kg 左右的西门塔尔杂交牛40 头，随机分为4 组，每组10 头，对照组饲喂基础日粮，试验1 组、试验2 组、试验3 组分别在基础日粮中添加1.95、2.95、3.95 kg/头枸杞枝条发酵饲料，预饲期10 d，正试期60 d。 试验牛的基础日粮根据育肥肉牛现阶段营养需要结合养殖场实际生产配制，干物质采食量11.50 kg。基础日粮组成及营养水平见表2。 各组牛均采用全混合日粮的饲养模式。

表2 育肥牛基础日粮组成及营养水平（干物质基础）

1.4 测定指标与方法

1.4.1 增重 试验开始及第30、60 天 （结束）分别对育肥牛空腹称重，计算平均日增重。平均日增重=（试验后体重-试验前体重）/试验天数； 料重比=日干物质采食量/平均日增重。 每日准确称量饲料投喂量，剩余料，做好记录。

1.4.2 免疫指标 试验开始、 结束分别尾静脉采血5 mL， 静置，2000 r/min 离心10 min， 收集血清，-20 ℃保存待测。 测定免疫球蛋白A（IgA）、免疫球蛋白G（IgG）、免疫球蛋白M（IgM）；外周血液免疫因子IFN- r、TNF-α、IL-2、IL-4、IL-8、IL-13含量，严格按照试剂盒说明书步骤操作检测，试剂盒由上海科淘生物科技中心生产。

1.5 数据处理 采用Excel 2010 对数据进行初步处理，SAS 8.2 软件中的ANOVA 进行方差分析和LSD 多重比较，结果以“平均值±标准差”表示，P< 0.05 为差异显著性判断标准。

2 结果与分析

2.1 枸杞枝条发酵饲料对育肥牛增重的影响由表3 可见， 育肥牛初始体重各组别间差异不显著（P> 0.05），试验30、61 d 体重出现差异；平均日增重试验组均高于对照组，其中试验2 组、试验3 组分别较对照组提高41.41%和37.37%，差异显著（P< 0.05）。 但试验组随着枸杞枝条发酵饲料增加平均日增重没有呈现线性上升； 料重比以试验2 组最低。

表3 育肥牛增重情况

2.2 枸杞枝条发酵饲料对育肥牛血清免疫指标的影响 由表4 可见，试验1 组、试验2 组IgA 含量分别较对照组提高47.74%、14.58%，试验1 组、试验2 组IgG 含量分别较对照组提高30.20%、15.10%， 试验1 组IgM 含量较对照组提高22.09%，差异均达到了极显著水平（P< 0.01）。 但试验组随着枸杞枝条发酵饲料添加量增加肉牛血清免疫球蛋白含量呈降低趋势，试验1 组> 试验2 组> 试验3 组，其中，试验3 组显著（P< 0.05）或者极显著（P< 0.01）低于试验1 组和试验2 组。

表4 育肥牛血清免疫球蛋白测定结果

2.3 枸杞枝条发酵饲料对育肥牛血清细胞因子的影响 由表5 可见， 试验组IL-2、IL-4、IL-13含量与对照组差异不显著（P> 0.05），但试验组随着发酵枸杞枝条饲料添加量增加呈降低趋势，其中试验3 组较试验1 组分别降低了10.28%、10.36%和28.35%，差异达到了显著（P< 0.05）或极显著水平 （P< 0.01）；IL-8 含量各组别间差异不显著 （P> 0.05）；TNF-α、IFN-γ 含量各组别间差异不显著（P> 0.05）。

表5 育肥牛血清细胞因子含量测定结果

3 讨论

3.1 枸杞枝条发酵饲料对育肥牛增重的影响

中草药多糖可作为优势 “碳源” 调控机体微生态，改善肠道健康，提高养分利用率（张丽萍等，2018）。 佘禄明等（2019）研究报道，断奶仔猪添加枸杞多糖400 mg/kg 能极显著提高日均增重。刘亚娟等（2018）研究报道，獭兔饲粮中添加1%的枸杞多糖可有效促进生长发育， 提高生产性能。 而发酵饲料含有大量有机酸、酶、胞外多糖等代谢产物， 可增加饲料适口性同时也能改善胃肠道微环境， 促进肠道的健康和营养物质的消化吸收， 提高动物生长性能 （史蓉等，2018；Lemh 等，2016）。孔雪旺等（2020）研究报道，肉牛日粮添加底物为50%米糠+50%麸皮发酵饲料组日增重较对照组显著提高了18.92%。 本研究中枸杞枝条经过发酵，具有酒香味和微酸味，改善了适口性， 测得试验组肉牛平均日增重均高于对照组， 这可能与日粮添加了发酵枸杞枝条饲料，增加了干物质采食量有关，与上述研究结果一致。 但试验组随着枸杞枝条发酵饲料添加平均日增重没有呈现线性上升， 以试验2 组平均日增重（1.40 kg）最高，较对照组提高了41.41%，这可能与本研究中肉牛日粮营养已经满足增重需求， 同时饲料中多糖等有效成分发挥作用有关。

3.2 枸杞枝条发酵饲料对育肥牛血清免疫指标的影响 IgA、IgG 和IgM 是机体免疫系统的重要组成部分， 其含量的上升预示着体液免疫启动，其中，IgG 是血清中免疫球蛋白的主要成分，约占血清中免疫球蛋白的75%， 具有调节机体代谢、免疫力及抗感染等多种功能（王丽群等，2014；周顺伍，2008）。 植物多糖可以诱导动物机体产生免疫球蛋白，继而增强机体免疫功能。 其中， 枸杞多糖能够通过激活免疫细胞和诱导细胞因子分泌， 进一步激活机体的非特异性免疫应答和特异性免疫应答（邵伟等，2021）。 王启菊等（2016）研究报道，藏羊饲料中添加2%枸杞可显著提高血清中IgA、IgM 和IgG 水平；Long 等（2020）研究表明，饲粮添加2 g/kg 的枸杞多糖可增强肉鸡抗氧化能力和免疫性能。 本研究中，日粮添加发酵枸杞枝条， 育肥牛血清免疫球蛋白含量试验1 组高于对照组， 达到了极显著水平，与上述研究结果一致，说明发酵枸杞枝条饲料具有的多糖等有效成分含量， 提高了肉牛机体免疫力； 但试验组随着发酵枸杞枝条饲料添加量增加肉牛血清免疫球蛋白含量降低， 呈试验1 组> 试验2 组> 试验3 组趋势，这可能是因为枸杞枝条发酵饲料本身营养成分中蛋白含量较低，只是有效成分发挥了作用，为了充分利用其有效的功能性营养成分， 肉牛日粮中需控制添加量或者适当提高日粮蛋白含量。

3.3 枸杞枝条发酵饲料对育肥牛血清细胞因子的影响 动物血清中免疫细胞因子不同程度地反映了机体健康状况， 在机体炎症和抗炎过程中发挥重要作用（胡迎利等，2005）。 白介素是由多种细胞产生， 可以作用于多种细胞且具有重要调节作用而统一命名的一类细胞因子。 其中，IL-4 是一种具有多种生物效应的细胞因子，如对于B 细胞、T 细胞、肥大细胞、巨噬细胞和造血细胞都有免疫作用， 可以增强IgG、IgE 水平，进而促进细胞免疫；IL-2 激活和促进T 细胞，是一种淋巴因子，两者具有抗病毒、抗肿瘤、增强机体免疫的功能。 研究表明，架子牛饲喂枸杞多糖免疫增效剂7 d，可提高免疫球蛋白水平，促进细胞因子的分泌，激活体内淋巴细胞和白细胞，提高机体免疫力（马吉锋等，2019）；围产期奶牛饲喂枸杞多糖免疫增效剂7 d，可增加抗体水平和细胞因子分泌， 提高奶牛机体免疫力 （王建东，2018）。 本研究中，育肥牛日粮添加枸杞枝条发酵饲料对血清IL-2、IL-4、IL-13 含量均无显著影响，与上述结果相比效果不明显，可能是上述试验直接添加了枸杞多糖， 而本研究是对枸杞枝条进行了发酵， 本身的枸杞有效成分含量差异较大。 且试验组随着发酵枸杞枝条饲料添加量增加免疫细胞因子均呈降低趋势， 进一步表明枸杞枝条可进行发酵处理饲料化利用，但育肥牛日粮添加量不宜过高。

4 结论

枸杞枝条经过生物发酵育肥肉牛，能够提高肉牛育肥性能及机体免疫性能， 但添加量不宜过高，本研究中以不超过2.93 kg/d·头为宜。 为枸杞枝条有效的饲料化利用的可行性提供了基础。