含1,3,4-噁二唑侧链氮唑衍生物的合成及抗真菌活性

张胜男,李新利,梁伦海,马光群,孟庆国,柴晓云

(1.烟台大学药学院，分子药理和药物评价教育部重点实验室(烟台大学),新型制剂与生物技术药物研究山东省高校协同创新中心，山东 烟台 264005;2.海军军医大学药学院有机化学教研室,上海 200433)

近几十年来,侵袭性真菌感染严重威胁着人类健康,尤其是癌症、艾滋病和器官移植患者[1-3]。致命的真菌感染主要与三种病原体有关:白念珠菌、新生隐球菌和曲霉菌[4-6]。每年全世界因酵母菌感染(主要是白念珠菌和新生隐球菌)引起的死亡人数大约有60万[7]。

目前临床常用的抗真菌药物有唑类、多烯类、氟嘧啶类、烯丙胺类和棘白菌素类[7-11]，但总体数量的抗菌抗生素要少得多。唑类药物具有广谱、高效、低毒等优点,是抗真菌药物治疗中最常用的药物之一[12-13],然而长期使用唑类药物将会产生耐药性,降低疗效[14]。因此,寻找具有良好活性的抗真菌药物,扩大其抗菌谱成为亟待解决的问题。

研究表明,唑类化合物中的三唑、苯并噻唑和噁二唑在药物化学中具有重要作用,研究表明含唑类结构的化合物具有显著的抗真菌作用[15]。通过对CYP51活性位点的结构分析和对氮唑类抗真菌药物构效关系的广泛深入研究[16],在保留氮唑类药物经典骨架的基础上,将氟康唑的一个三唑环替换成噁二唑侧链结构,采用微量液基稀释法评价目标化合物的体外抗真菌活性,以寻找高效、抗菌谱广的替代药物。

1 实验部分

1.1 实验仪器

RV3旋转蒸发仪(德国IKA公司);SHB-ⅡA循环水式多用真空泵(巩义市英峪予华仪器厂); C-MAG HS7型恒温磁力搅拌器(德国IKA公司);ME203E电子天平(博特勒-托利多仪器有限公司);CP-0320低温冷却循环泵(上海泰坦科技股份有限公司);ZF-7暗箱式三用紫外分析仪(上海嘉鹏科技有限公司);DHG-90513A电热恒温鼓风干燥箱(上海华连医疗器械有限公司);Yamato model MP-21型熔点仪(日本雅马拓公司);1100型质谱仪(安捷伦科技有限公司);AC-300P 核磁共振仪(安捷伦科技有限公司)。

1.2 实验材料和试剂

取代苯甲酸、水合肼(85%)、氢氧化钾、二硫化碳、氯化钠、碳酸氢钠、三乙胺、二氯甲烷、乙酸乙酯、无水硫酸钠购自上海泰坦科技股份有限公司; 1-[2-(2,4-二氟苯基)-2,3-环氧丙烷]-1H-1,2,4-三氮唑甲磺酸盐购自上海齐奥化工科技有限公司;无水甲醇购自安耐吉化学;氯化亚砜、盐酸购自国药集团化学试剂有限公司。

1.3 合成路线

以取代苯甲酸为原料,经亲核加成-消除、醇解、胺解和环合反应,合成中间体2-巯基-5-取代苯基-1,3,4-噁二唑5a—5r[17],再与关键中间体1-[2-(2,4-二氟苯基)-2,3-环氧丙基]-1H-1,2,4-三唑甲烷磺酸盐发生开环反应,得到目标化合物6a—6r,合成路线与目标化合物结构如图1。

图1 目标化合物6a—6r的合成路线

1.4 合成步骤

1.4.1 中间体2a—2r的合成 将取代苯甲酸1a—1r(21.43 mmol)与SOCl2(8.0 mL, 110.1 mmol)的混合液加热回流4～5 h,反应产生的废气通过NaOH尾气吸收装置中和。蒸馏除去多余的SOCl2,得到中间体2a—2r,无需进一步纯化,直接用于下一步反应。

1.4.2 中间体3a—3r的合成 将中间体2a—2r(21.43 mmol)溶解在CH2Cl2(8.0 mL)中,然后加入5滴三乙胺,缓慢滴加CH2Cl2/CH3OH溶液(1∶2, 6.0 mL)。用薄层色谱法监测反应。反应结束,减压浓缩,剩余物用乙酸乙酯和水萃取,无水硫酸钠干燥,过滤,减压浓缩,得到中间体3a—3r,通过LC-MS确定分子质量,直接用于下一步反应。

1.4.3 中间体4a—4r的合成 将中间体3a—3r(21.43 mmol)溶解在CH3OH(10.0 mL)中,加入水合肼(3.0 mL, 61.8 mmol),加热回流6～8 h.反应溶液用饱和食盐水淬灭,二氯甲烷萃取。有机相用水洗涤,无水硫酸钠干燥,过滤,减压浓缩得粗产品。经硅胶柱层析,得到中间体4a—4r。

1.4.4 中间体2-巯基-5-取代苯基-1,3,4-噁二唑(5a—5r)的合成 将KOH(1.35 g, 24.11 mmol)加入到中间体4a—4r(20.78 mmol)的无水CH3OH(30.0 mL)中,再加入二硫化碳(1.8 mL, 29.84 mmol),加热回流5～6 h,同时用薄层色谱法监测反应进程。反应完全后,减压浓缩,向残余物中加入50 mL冰水,将5 mL浓盐酸溶液加入到反应体系中,搅拌15 min,过滤,分别用NaHCO3溶液和水洗涤滤饼,干燥得到中间体5a—5r。

1.4.5 1-(1H-1,2,4-三唑-1-基)-2-(2,4-二氟苯基)-3-[2-巯基-5-(2-氟苯基)-1,3,4-噁二唑]-2-丙醇(6a)的合成 将中间体5a(0.31 g, 1.58 mmol)和三乙胺(0.26 mL, 2.09 mmol)在室温下加入到1-[2-(2,4-二氟苯基)-2,3-环氧丙基]-1H-1,2,4-三唑甲烷磺酸盐(0.25 g, 1.05 mmol)的CH2Cl2溶液中,室温搅拌24 h。用适量水淬灭,以二氯甲烷(2×10.0 mL)萃取。有机相用饱和食盐水洗涤,无水硫酸钠干燥,过滤,减压浓缩。残余物经硅胶柱层析后,再经乙酸乙酯重结晶,得到0.31 g目标化合物6a。

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6a:收率68.4%; mp 118.8～120.4 ℃;1H NMR (300 MHz, CDCl3)δ7.66～7.86 (m, 4H), 7.25～7.32 (m, 2H), 7.08～7.16 (m, 1H), 6.98～7.01 (m, 1H), 6.86～6.89 (m, 1H), 4.97 (d,J=15.0 Hz, 1H), 4.85 (d,J=15.0 Hz, 1H), 3.97 (d,J=12.0 Hz, 1H), 3.75 (d,J=12.0 Hz, 1H);13C NMR (75 MHz, CDCl3)δ165.2, 160.7, 158.4, 157.6, 151.2, 144.8, 132.0, 130.7, 129.6, 128.4, 124.7, 123.4, 114.9, 111.1, 104.7, 74.5, 71.7, 48.5; ESI-MS (m/z): [M+H]+434.10。

参照化合物6a的合成方法,合成化合物6b—6r,收率、熔点、1H NMR、13C NMR和ESI-MS数据如下:

6b:收率81.0%; mp 120.4～121.8 ℃;1H NMR (300 MHz, CDCl3)δ7.85～7.93 (m, 1H), 7.11～7.21 (m, 4H), 7.14～7.27 (m, 2H), 6.85～7.98 (m, 2H), 4.96 (d,J=15.0 Hz, 1H), 4.86 (d,J=15.0 Hz, 1H), 3.99 (d,J=12.0 Hz, 1H), 3.78 (d,J=12.0 Hz, 1H);13C NMR (75 MHz, CDCl3)δ165.4, 160.6, 158.2, 157.4, 150.9, 144.4, 132.5, 130.4, 129.6, 128.5, 124.6, 123.2, 114.7, 111.4, 104.6, 74.4, 71.3, 48.2; ESI-MS (m/z): [M+H]+434.09。

6c:收率80.4%; mp 118.5～120.2 ℃;1H NMR (300 MHz, CDCl3)δ7.82～8.22 (m, 2H), 7.65～7.89 (m, 3H), 7.09～7.21 (m, 2H), 6.84～7.02 (m, 2H), 4.96 (d,J=15.0 Hz, 1H), 4.85 (d,J=15.0 Hz, 1H), 3.98 (d,J=12.0 Hz, 1H), 3.76 (d,J=12.0 Hz, 1H);13C NMR (75 MHz, CDCl3)δ165.1, 160.3, 158.5, 157.4, 151.5, 144.3, 131.8, 130.5, 129.7, 128.1, 124.4, 123.8, 114.6, 111.4, 104.6, 74.7, 71.4, 48.1; ESI-MS (m/z): [M+H]+434.10。

6d:收率72.6%; mp 122.0～123.6 ℃;1H NMR (300 MHz, CD3OD)δ7.80～8.22 (m, 2H), 7.90 (s, 1H), 7.37～7.63 (m, 4H), 7.09～7.17 (m, 2H), 4.95 (d,J=15.0 Hz, 1H), 4.82 (d,J=15.0 Hz, 1H), 3.98 (d,J=12.0 Hz, 1H), 3.75 (d,J=12.0 Hz, 1H);13C NMR (75 MHz, CDCl3)δ165.4, 160.5, 158.6, 157.2, 151.3, 144.7, 132.1, 130.7, 129.5, 128.3, 124.5, 123.7, 114.5, 111.6, 104.5, 74.5, 71.7, 48.3; ESI-MS (m/z): [M+H]+450.08。

6e:收率84.1%; mp 124.2～125.9 ℃;1H NMR (300 MHz, CDCl3)δ7.72～7.92 (m, 4H), 7.32～7.50 (m, 2H), 7.12～7.20 (m, 1H), 6.80～6.99 (m, 2H), 4.94 (d,J=15.0 Hz, 1H), 4.84 (d,J=15.0 Hz, 1H), 3.97 (d,J=12.0 Hz, 1H), 3.73 (d,J=12.0 Hz, 1H);13C NMR (75 MHz, CDCl3)δ165.8, 160.4, 158.7, 157.4, 151.3, 144.5, 132.3, 130.8, 129.3, 128.4, 124.5, 123.6, 114.3, 111.5, 104.4, 74.4, 72.1, 48.0; ESI-MS (m/z): [M+H]+450.06。

6f:收率78.9%; mp 120.4～122.2 ℃;1H NMR (300 MHz, CDCl3)δ7.76～7.89 (m, 4H), 7.42～7.51 (m, 2H), 7.10～7.18 (m, 1H), 6.84～7.02 (m, 2H), 5.31 (s, 1H), 4.97 (d,J=15.0 Hz, 1H), 4.86 (d,J=15.0 Hz, 1H), 3.99 (d,J=12.0 Hz, 1H), 3.76 (d,J=12.0 Hz, 1H);13C NMR (75 MHz, CDCl3)δ165.5, 160.6, 158.5, 157.5, 151.0, 144.2, 132.8, 130.5, 129.4, 128.6, 124.5, 123.2, 114.7, 111.6, 104.5, 74.7, 72.3, 48.2; ESI-MS (m/z): [M+H]+450.08。

6g:收率76.7%; mp 127.2～128.8 ℃;1H NMR (300 MHz, CDCl3)δ8.09～8.16 (m, 2H), 7.82～7.87 (m, 3H), 7.63～7.68 (m, 1H), 7.12～7.16 (m, 1H), 6.83～7.09 (m, 2H), 4.97 (d,J=15.0 Hz, 1H), 4.86 (d,J=15.0 Hz, 1H), 3.99 (d,J=12.0 Hz, 1H), 3.77 (d,J=12.0 Hz, 1H);13C NMR (75 MHz, CDCl3)δ167.3, 162.2, 158.8, 157.4, 151.0, 144.7, 132.3, 130.5, 129.8, 129.2, 128.5, 123.7, 123.3, 114.5, 111.3, 104.8, 74.5, 72.8, 49.7; ESI-MS (m/z): [M+H]+484.08。

6i:收率82.4%; mp 115.5～116.9 ℃;1H NMR (300 MHz, CDCl3)δ7.80～7.90 (m, 4H), 7.43～7.60 (m, 3H), 7.09～7.17 (m, 1H), 6.83～7.01 (m, 2H), 4.97 (d,J=15.0 Hz, 1H), 4.85 (d,J=15.0 Hz, 1H), 3.97 (d,J=12.0 Hz, 1H), 3.75 (d,J=12.0 Hz, 1H);13C NMR (75 MHz, CDCl3)δ165.4, 160.5, 158.7, 157.3, 151.4, 144.2, 132.3, 130.6, 129.5, 128.8, 124.3, 123.9, 114.4, 111.6, 104.5, 74.1, 71.9, 48.6; ESI-MS (m/z): [M+H]+416.10。

6j:收率68.8%; mp 116.3～118.0 ℃;1H NMR (300 MHz, CDCl3)δ7.75～7.86 (m, 2H), 7.54 (d,J=4 Hz, 1H), 7.21～7.43 (m, 4H), 6.82～7.15 (m, 2H), 5.35 (s, 1H), 4.95 (d,J=15.0 Hz, 1H), 4.80 (d,J=15.0 Hz, 1H), 3.97 (d,J=12.0 Hz, 1H), 3.74 (d,J=12.0 Hz, 1H), 2.55 (s, 3H);13C NMR (75 MHz, CDCl3)δ165.7, 160.8, 158.5, 157.3, 151.3, 144.6, 132.4, 130.5, 129.7, 128.5, 124.4, 123.3, 114.4, 111.5, 104.7, 74.5, 72.1, 48.6, 19.3; ESI-MS (m/z): [M+H]+430.14。

6k:收率78.4%; mp 117.5～119.7 ℃;1H NMR (300 MHz, CDCl3)δ7.63～7.86 (m, 4H), 7.35～7.39 (m, 2H), 7.08～7.16 (m, 1H), 6.94～7.01 (m, 1H), 6.83～6.88 (m, 1H), 4.97 (d,J=15.0 Hz, 1H), 4.85 (d,J=15.0 Hz, 1H), 3.97 (d,J=12.0 Hz, 1H), 3.75 (d,J=12.0 Hz, 1H), 2.45 (s, 3H);13C NMR (75 MHz, CDCl3)δ165.4, 160.3, 158.7, 157.4, 151.5, 144.5, 131.7, 130.3, 129.5, 128.2, 124.6, 123.7, 114.2, 111.6, 104.6, 74.6, 71.8, 48.6, 18.7; ESI-MS (m/z): [M+H]+430.12。

6l:收率74.8%; mp 116.4～117.7 ℃;1H NMR (300 MHz, CDCl3)δ7.69～7.86 (m, 4H), 7.23～7.38 (m, 2H), 7.08～7.16 (m, 1H), 6.94～7.01 (m, 1H), 6.83～6.88 (m, 1H), 4.96 (d,J=15.0 Hz, 1H), 4.85 (d,J=15.0 Hz, 1H), 3.97 (d,J=12.0 Hz, 1H), 3.75 (d,J=12.0 Hz, 1H), 2.44 (s, 3H);13C NMR (75 MHz, CDCl3)δ165.3, 160.4, 158.3, 157.7, 151.6, 144.3, 132.0, 130.7, 129.9, 128.4, 124.6, 123.5, 114.7, 111.3, 104.4, 74.5, 71.7, 48.3, 18.8; ESI-MS (m/z): [M+H]+430.14。

6m:收率70.0%; mp 124.6～126.2 ℃;1H NMR (300 MHz, CDCl3)δ8.22 (s, 1H), 7.87 (s, 1H), 7.85 (d,J=9.0 Hz, 1H), 7.61～7.69 (m, 1H), 7.52 (d,J=9.0 Hz, 1H), 7.04～7.09 (m, 2H), 6.81～6.88 (m, 2H), 5.31 (s, 1H), 4.75 (d,J=12.0 Hz,1H), 4.67 (d,J=12.0 Hz, 1H), 3.97 (s, 3H), 3.93 (d,J=15.0 Hz, 1H), 3.73 (d,J=15.0 Hz, 1H);13C NMR (75 MHz, CDCl3)δ166.5, 160.8, 159.1, 157.9, 152.4, 145.1, 132.7, 131.0, 129.7, 128.6, 124.4, 123.6, 114.5, 111.7, 104.5, 75.0, 72.2, 60.3, 49.3; ESI-MS (m/z): [M+H]+446.13。

6n:收率70.1%; mp 126.0～127.8 ℃;1H NMR (300 MHz, CDCl3)δ7.91 (s, 1H), 7.82 (s, 1H), 7.37～7.48 (m, 3H), 7.08～7.13 (m, 2H), 7.00～6.82 (m, 2H), 4.96 (d,J=15.0 Hz,1H), 4.84 (d,J=15.0 Hz, 1H), 3.97 (d,J=12.0 Hz, 1H), 3.88 (s, 3H), 3.75 (d,J=12.0 Hz, 1H);13C NMR (75 MHz, CDCl3)δ166.3, 160.5, 159.3, 157.7, 152.5, 145.1, 132.6, 130.8, 129.4, 128.7, 124.1, 123.2, 114.7, 111.9, 104.7, 75.2, 72.3, 59.6, 48.9; ESI-MS (m/z): [M+H]+446.12。

6o:收率68.6%; mp 118.8～120.4 ℃;1H NMR (300 MHz, CDCl3)δ7.66～7.86 (m, 4H), 7.25～7.32 (m, 2H), 7.08～7.16 (m, 1H), 6.98～7.01 (m, 1H), 6.86～6.89 (m, 1H), 4.97 (d,J=15.0 Hz, 1H), 4.85 (d,J=15.0 Hz, 1H), 3.97 (d,J=12.0 Hz, 1H), 3.75 (d,J=12.0 Hz, 1H), 2.67 (t,J=6.0 Hz, 2H), 1.63～1.75 (m, 2H), 0.98 (t,J=6.0 Hz, 3H);13C NMR (75 MHz, CDCl3)δ164.7, 159.5, 158.3, 157.7, 151.9, 144.5, 132.3, 130.4, 129.5, 128.6, 124.0, 123.4, 114.7, 111.5, 104.2, 74.5, 71.7, 48.5, 38.5, 26.3, 14.1; ESI-MS (m/z): [M+H]+458.16。

6p:收率64.0%; mp 117.5～119.3 ℃;1H NMR (300 MHz, CDCl3)δ7.70～7.87 (m, 4H), 7.26 (d,J=6.0 Hz, 2H), 7.08～7.16 (m, 1H), 6.98～7.01 (m, 1H), 6.86～6.88 (m, 1H), 4.97 (d,J=15.0 Hz, 1H), 4.85 (d,J=15.0 Hz, 1H), 3.97 (d,J=12.0 Hz, 1H), 3.75 (d,J=12.0 Hz, 1H), 2.92～3.04 (m, 1H), 1.27 (d,J=4.0 Hz, 6H);13C NMR (75 MHz, CDCl3)δ164.3, 159.6, 158.5, 157.4, 151.7, 144.2, 132.6, 130.7, 129.5, 128.7, 123.8, 123.1, 114.4, 111.3, 104.0, 74.7, 71.4, 48.8, 35.4, 19.7; ESI-MS (m/z): [M+H]+458.16。

6q:收率66.5%; mp 121.3～123.0 ℃;1H NMR (300 MHz, CDCl3)δ7.71～7.88 (m, 4H), 7.29～7.31 (m, 2H), 7.12～7.17 (m, 1H), 6.96～6.99 (m, 1H), 6.85～6.88 (m, 1H), 4.96 (d,J=15.0 Hz, 1H), 4.86 (d,J=15.0 Hz, 1H), 3.96 (d,J=12.0 Hz, 1H), 3.74 (d,J=12.0 Hz, 1H), 2.68 (t,J=6.0 Hz, 2H), 1.58～1.68 (m, 2H), 1.27～1.43 (m, 2H), 0.89～0.97 (m, 3H);13C NMR (75 MHz, CDCl3)δ164.8, 159.6, 158.5, 157.4, 152.2, 144.7, 132.0, 130.2, 129.3, 128.5, 124.0, 123.2, 114.6, 111.7, 104.3, 74.7, 72.1, 49.2, 36.8, 33.4, 24.7, 14.4;ESI-MS (m/z): [M+H]+472.16。

6r:收率69.4%; mp 118.4～120.5 ℃;1H NMR (300 MHz, CDCl3)δ7.74～8.27 (m, 4H), 7.47～7.54 (m, 2H), 7.12 (d,J=9.0 Hz, 1H), 6.83～7.01 (m, 2H), 5.32 (s, 1H), 4.97 (d,J=15.0 Hz, 1H), 4.85 (d,J=15.0 Hz, 1H), 3.97 (d,J=12.0 Hz, 1H), 3.76 (d,J=9.0 Hz, 1H), 1.37 (s, 9H);13C NMR (75 MHz, CDCl3)δ164.5, 159.4, 158.2, 157.5, 151.8, 144.3, 131.7, 130.5, 129.4, 128.8, 124.2, 123.0, 114.4, 111.5, 104.7, 74.6, 72.3, 48.7, 35.6, 31.4; ESI-MS (m/z): [M+H]+472.17。

1.5 目标化合物体外抗真菌活性筛选

1.5.1 体外抗真菌试验材料 (1)试验菌株:白念珠菌(CandidaalbicansY0109和SC5314,C.alb.)、新生隐球菌(Cryptococcusneoformans,C.par.),近平滑念珠菌(Candidaparapsilosis,C.neo.)、红色毛癣菌(Trichophytonrubrum,T.rub.)、石膏状小孢子菌(Microsporumgypseum,M.gyp.)和薰烟曲霉菌(Aspergillusfumigatus,A.fum.)均由上海长征医院真菌分子生物学重点实验室提供,并经形态学和生化学鉴定。

(2)实验对照品:氟康唑(FCZ,≥99.0%)、伊曲康唑(ICZ,≥99.0%)、酮康唑(KCZ,≥99.0%)、伏立康唑(VCZ,≥99.0%)、特比萘酚(TRB,≥99.0%)和两性霉素 B(AMB,≥99.0%)均购于上海泰坦科技股份有限公司。

1.5.2 体外抗真菌实验方法 体外最低抑菌浓度(MICs)采用国家临床实验室标准委员会(NCCLS)M27-A2文件推荐的标准化抗真菌敏感性试验方法。

2 结果与讨论

采用微量液基稀释法检测化合物6a—6r对7株常见致病真菌的最低抑菌浓度值MIC80(真菌生长80%被抑制时的药物质量浓度),实验结果见表1。所有数据是对每种抗真菌化合物进行三次重复试验的平均值。

表1 目标化合物6a—6r体外抗真菌活性结果(MIC80)

体外抗真菌活性试验结果表明,与阳性对照药物相比,所有化合物对白念珠菌、新生隐球菌和近平滑念珠菌均表现出较高的活性,尤其是对白念珠菌活性最好。化合物6a、6b、6c、6e和6f对白念珠菌具有较好的抗真菌活性;化合物6a、6b和6c对近平滑念珠菌具有较好的抗真菌活性;6b和6c对新生隐球菌具有良好的抗真菌活性;化合物6a、6d和6m对红色毛癣菌具有较好的抗真菌活性;化合物6d、6g、6l、6m和6o对石膏状小孢子菌具有较好的抗真菌活性;化合物6c、6d和6f对薰烟曲霉菌具有较好的抗真菌活性。其中,化合物6a—6c对除熏烟曲霉菌外的6种真菌均表现出广谱的抗真菌活性。

侧链噁二唑结构的引入使化合物的体外抗菌活性有所提高。化合物6a—6f在1,3,4-噁二唑侧链苯环上引入氟和氯原子,对6种真菌感染均表现出良好的抗真菌活性,这可能是因为氟原子和氯原子的大小和位置使化合物与靶酶活性腔恰好吻合[18]。化合物6c对白念珠菌Y0109、白念珠菌SC5314、新生隐球菌、近平滑念珠菌、红色毛癣菌、石膏状小孢子菌和薰烟曲霉菌的MIC80值分别为0.062 5、0.062 5、0.062 5、0.062 5、0.5、0.25和16 μg/mL,抑菌活性分别是氟康唑的256倍、128倍、128倍、64倍、16倍、64倍和4倍。此外,化合物6a、6b和6f对白念珠菌Y0109的抑菌活性最高(MIC80=0.062 5 μg/mL),分别是氟康唑(MIC80=16 μg/mL)和特比萘酚(MIC80=32 μg/mL)活性的256倍和512倍。化合物6d和6f对薰烟曲霉菌具有较好的活性(MIC80=16 μg/mL),优于其他化合物,且优于六种阳性对照药(MIC80均>64 μg/mL)。说明卤素在1, 3, 4-噁二唑侧链的苯环上的取代位置可能是影响抗真菌活性的因素[19]。化合物6c的抑菌活性优于6a和6b,同时化合物6f的抑菌活性优于6d和6e。结果表明,1, 3, 4-噁二唑侧链苯环上4-取代衍生物比2-取代衍生物和3-取代衍生物具有更高的抗真菌活性。

化合物6i和6j—6l对白念珠菌SC5314(MIC80=0.125 μg/mL)和近平滑念珠菌(MIC80=0.125 μg/mL)也表现出较强的活性,分别是氟康唑活性的64倍和32倍。4-甲基取代的化合物6l对石膏状小孢子菌(MIC80=0.125 μg/mL)具有较好的抗真菌活性,分别是氟康唑(MIC80=16 μg/mL)和酮康唑(MIC80=8 μg/mL)活性的128倍和64倍。一般地,苯环上烷基取代有利于活性提高[20],但是化合物6q(正丁基取代)和6r(叔丁基取代)对7种菌株的抑菌活性均低于其他目标化合物,可能是由于正丁基和叔丁基较大的空间结构影响了化合物与靶酶的结合。

3 结 论

以取代苯甲酸为原料,经亲核加成-消除、醇解、胺解和环合反应,合成2-巯基-5-取代苯基-1,3,4-噁二唑,再与环氧化物中间体1-[2-(2,4-二氟苯基)-2,3-环氧丙基]-1H-1,2,4-三唑甲烷磺酸盐发生亲核取代反应,得到18个含1,3,4-噁二唑侧链的氮取代的氟康唑类衍生物。经文献检索,所得目标化合物均为新化合物,结构均经1H NMR、13C NMR和MS确证。抗真菌活性测试结果表明,噁二唑侧链结构的引入使氮唑类化合物的体外抗真菌活性有所提高,但是侧链苯环上取代基较大时,影响其抗真菌活性,可能是较大的取代基或较长的脂肪链影响了化合物与靶酶的结合。化合物6c对所有菌株均具有较好的活性,有进一步研究价值。