胆木木质部中一个新的酚酸苷

杨 婷，黄圣卓，陈惠琴，蔡彩虹，王 婷，盖翠娟，梅文莉，戴好富,*

1黑龙江八一农垦大学生命科学技术学院，大庆 163319；2中国热带农业科学院热带生物技术研究所 海南省黎药资源天然产物研究与利用重点实验室；3中国热带农业科学院海南热带农业资源研究院，海口 571101

胆木Naucleaofficinalis(Pierre ex Pitard Merr.et Chun)又名乌檀、山熊胆、熊胆木等，为茜草科(Rubiaceae)乌檀属(NaucleaL.)植物，主产海南，并零星分布于广东和广西等地，是我国仅有的一种原生乌檀属植物[1]。胆木为海南特色黎药，是海南省重点研究传统黎族药用植物之一，其味苦性寒，具有清热解毒，消肿止痛等功效，黎族人民将其广泛用于感冒和外用抗菌消毒等方面。现在临床上常用于感冒发热，急性扁桃体炎、咽喉炎、支气管炎和肺炎等疾病的治疗[2]。其主要成分为生物碱、酚酸类、五环三萜类和黄酮类化合物等[3]。现代药理实验研究表明，胆木具有抗炎[4]、抗细胞增殖[5]和抑制胃酸分泌[6]等作用。目前对胆木的研究主要集中在生物碱部分，而对其非生物碱部分，特别是临床应用的胆木制剂中含量较多的大极性化合物(正丁醇提取物)及其生物活性关注较少。本研究从胆木正丁醇提取物中分离鉴定化合物，以酚酸类化合物为主，前人报道该类成分对抗肿瘤与降血糖有较好的功效[7-8]。因此，为了进一步探究胆木药用部位木质部中正丁醇提取物的化学成分及活性，对其进行了化学成分的分离与结构鉴定，并进行了α-葡萄糖苷酶抑制活性与细胞毒活性的研究，旨在为该植物开发利用与发现新用途提供科学依据。

1 材料与方法

1.1 仪器与材料

Agilent 1260高效液相色谱仪(美国Agilent公司)；Bruker Amazon SL质谱仪(德国Bruker公司)；Bruker AV-500超导核磁共振波谱仪(德国Bruker公司)，TMS为内标；Agilent Infinity 1260 Ⅱ半制备高效液相色谱仪(美国Agilent公司)；旋转蒸发仪(德国Heidolph Labo-rota公司)；分析型色谱柱(C18和Cholester，250 mm × 4.6 mm，5 μm)和半制备色谱柱(C18和Cholester，250 mm × 10.0 mm，5 μm)(日本COSMOSIL公司)；ELX-800 酶标仪(美国Bio-Tek公司)；α-葡萄糖苷酶、阿卡波糖、4-硝基苯基-β-D-吡喃葡萄糖苷(上海源叶生物科技公司)；人肺癌细胞株A549、宫颈癌细胞株HeLa和慢性髓原白血病细胞株K562(中国科学院上海生命科学研究院细胞库)；RP-18填料(20 μm～45 μm)(日本Fuji Silysia Chemical Ltd公司)；Sephadex LH-20(美国GE公司)；柱层析硅胶 G(200～300目和60～80目)及柱层析硅胶 H(青岛海洋化工厂)；检测用GF254薄层色谱板(青岛海洋化工厂)，展开剂展开后，254 nm紫外光下观察后，10% 硫酸乙醇显色剂喷雾，烘烤显色。

胆木于2018年10月采自海南省澄迈县，经中国热带农业科学院热带生物技术研究所黄圣卓副研究员鉴定其为茜草科(Rubiaceae)乌檀属植物乌檀Naucleaofficinalis(Pierre ex Pitard Merr.et Chun)，标本(HUANG0002018)保存于中国热带农业科学院热带生物技术研究所。

1.2 实验方法

1.2.1 提取分离

干燥的胆木木质部(290.0 kg)晾干粉碎后，用70% 乙醇提取后得到粗浸膏13.9 kg，提取物分散于水中成悬浊液，用50%盐酸调节pH至2.0，用石油醚萃取，再用1 mol/L NaOH调节pH至10.0后用二氯甲烷萃取，接着用50% 盐酸调节pH至7.0，再分别用乙酸乙酯和正丁醇萃取，正丁醇萃取液浓缩回收正丁醇，得到正丁醇组分268.0 g。正丁醇组分经硅胶柱色谱，以二氯甲烷∶甲醇(50∶1→1∶1，V/V)、丙酮梯度洗脱，得到18个流分(Fr.1～Fr.18)。Fr.3(1.3 g)经过重结晶得到化合物14(6.6 mg)。

Fr.4(9.0 g)经ODS柱色谱以甲醇∶水(2∶8→1∶0，V/V)梯度洗脱得到19个流分(Fr.4.1～Fr.4.19)。Fr.4.8部分经过重结晶得到化合物9(3.3 mg)。Fr.4.12(223.6 mg)经硅胶减压柱色谱以二氯甲烷∶甲醇(20∶0.7→1∶1，V/V)梯度洗脱得到4个流分(Fr.4.12.1～Fr.4.12.4)。Fr.4.12.1(159.2 mg)使用半制备高效液相色谱(Cholester柱，乙腈∶水 = 24∶76恒梯度洗脱；流速：4 mL/min；检测波长：220/254 nm)，得到化合物8(8.1 mg，tR= 15.0 min)。

Fr.12(13.6 g)经ODS柱色谱以甲醇∶水(2∶8→1∶0，V/V)梯度洗脱得到15个流分(Fr.12.1～Fr.12.15)。其中流分Fr.12.2(1.2 g)经减压柱色谱以二氯甲烷∶甲醇(15∶1→1∶1，V/V)梯度洗脱得到3个流分(Fr.12.2.1～Fr.12.2.3)。Fr.12.2.2(255.5 mg)使用半制备高效液相色谱(C18柱，甲醇∶水 = 25∶75恒梯度洗脱；流速：4 mL/min；检测波长：210 nm)，得到化合物11(11.7 mg，tR= 16.0 min)和化合物12(7.8 mg，tR= 20.0 min)。Fr.12.2.1(29.8 mg)使用半制备高效液相色谱(C18柱，甲醇∶水 = 25∶75恒梯度洗脱；流速：4 mL/min；检测波长：220/260 nm)，得到化合物13(8.1 mg，tR= 18.0 min)。Fr.12.3(623.7 mg)经硅胶减压柱色谱以二氯甲烷∶甲醇(15∶0.18→1∶1，V/V)梯度洗脱得到6个流分(Fr.12.3.1～Fr.12.3.6)。Fr.12.3.2(104.3 mg)使用半制备高效液相色谱(Cholester柱，乙腈∶水 = 10∶90恒梯度洗脱；流速：4 mL/min；检测波长：220/254 nm)，得到两个流分(Fr.12.3.2.1-Fr.12.3.2.2)。Fr.12.3.2.1经 Sephadex LH-20 凝胶柱色谱(甲醇)分离得到化合物15(3.5 mg)。Fr.12.3.2.2经 Sephadex LH-20 凝胶柱色谱(甲醇)分离得到化合物6(42.9 mg)。Fr.12.3.3(623.7 mg)经 Sephadex LH-20 凝胶柱色谱(甲醇)分离得到化合物7(3.7 mg)。Fr.12.6(1.2 g)经硅胶减压柱色谱以二氯甲烷∶甲醇(15∶1→1∶1，V/V)梯度洗脱得到9个流分(Fr.12.6.1～Fr.12.6.9)。Fr.12.6.4(78.0 mg)使用半制备高效液相色谱(C18柱，甲醇∶水 = 23∶77恒梯度洗脱；流速：4 mL/min；检测波长：220 nm)，得到化合物4(13.5 mg，tR= 13.0 min)、化合物2(12.3 mg，tR= 17.0 min)和化合物3(4.9 mg，tR= 25.0 min)。Fr.12.6.5(65.0 mg)使用半制备高效液相色谱(Cholester柱，乙腈∶水 = 28∶72恒梯度洗脱；流速：4 mL/min；检测波长：220/254 nm)，得到化合物1(5.5 mg，tR= 22.0 min)。Fr.12.13(2.4 g)经减压柱色谱以石油醚∶二氯甲烷∶甲醇(1∶2∶0.2→0.5∶1∶1，V/V)梯度洗脱得到6个流分(Fr.12.13.1～Fr.12.13.6)，Fr.12.13.3结晶纯化得到化合物10(50.0 mg)。Fr.12.13.4(45.0 mg)使用半制备高效液相色谱(C18柱，甲醇∶水 = 20∶80恒梯度洗脱；流速：4 mL/min；检测波长：220/260 nm)，得到化合物5(3.7 mg，tR= 22.0 min)。

1.2.2 生物活性测试

采用pNPG法[9]和MTT法[10]分别测定化合物1～15的α-葡萄糖苷酶抑制活性和细胞毒活性。

2 结果与分析

本实验从胆木中共分离得到15个化合物，其中化合物1为新化合物，并命名为胆木酚苷 A(naucleaphenol A)。其结构根据HR-ESI-MS、1D和2D核磁共振结合参考文献对照结构相似的已知化合物鉴定，确定新颖性在于一个少见的(2E,6R)-8-羟基-2,6-二甲基-2-辛酸(含2个异戊二酸单位)取代在葡萄糖C-6位上。其余已知化合物结构均通过核磁共振和质谱数据对照参考文献鉴定，化合物结构见图1。

图1 化合物1～15结构Fig.1 Structures of compounds 1-15

2.1 结构鉴定

表1 化合物1的1H(500 MHz)和 13C NMR(125 MHz)核磁数据(CD3OD)

取而代之，该推断通过HMBC谱中关键信号：4.53(1H，dd，J= 11.8，2.2 Hz，H-6′α)，4.20(1H，dd，J= 11.8，7.5 Hz，H-6′β)与169.4 s(C-1′′)的相关，及高分辨质谱确定分子式C24H34O11验证了该酸连接于糖的6′位与之成酯。其余关键信号均通过HMBC谱相关信号(见图2)验证，从而确定了其结构，最终鉴定化合物为胆木酚苷A(naucleaphenol A)。化合物1的详细结构鉴定数据原始图谱可从本刊官网免费下载(www.trcw.ac.cn)。

化合物2白色粉末(甲醇)；ESI-MS：m/z481 [M + H]+，分子式为C22H24O12。1H NMR(500 MHz，CD3OD)δ：7.60(1H，d，J= 2.0 Hz，H-2)，7.58(1H，dd，J= 8.3，2.0 Hz，H-6″)，7.53(1H，d，J= 2.0 Hz，H-2″)，7.43(1H，dd，J=8.5，2.0 Hz，H-6)，7.14(1H，d，J= 8.5 Hz，H-5)，6.88(1H，d，J= 8.3 Hz，H-5″)，5.07(1H，d，J= 7.4 Hz，H-1′)，4.71(1H，dd，J= 11.9，2.2 Hz，H-6′β)，4.37(1H，dd，J= 11.9，7.6 Hz，H-6′α)，3.89(3H，s，3-OCH3)，3.86(3H，s，3″-OCH3)，3.82(1H，m，H-5′)，3.58(1H，dd，J= 9.0，7.4 Hz，H-2′)，3.54(1H，dd，J= 9.3，9.0 Hz，H-3′)，3.47(1H，d，J= 9.3 Hz，H-4′)；13C NMR(125 MHz，CD3OD)δ：126.0(s，C-1)，114.3(d，C-2)，150.4(s，C-3)，151.7(s，C-4)，116.4(d，C-5)，124.6(d，C-6)，169.4(s，C-7)，56.6(q，3-OCH3)，101.7(d，C-1′)，74.7(d，C-2′)，77.7(d，C-3′)，72.0(d，C-4′)，75.8(d，C-5′)，65.0(t，C-6′)，122.4(s，C-1″)，113.7(d，C-2″)，148.8(s，C-3″)，153.0(s，C-4″)，116.0(d，C-5″)，125.2(d，C-6″)，167.8(s，C-7″)，56.5(q，3″-OCH3)。以上数据与文献[12]报道基本一致，故鉴定化合物2为4-O-β-D-香草酸-6-O-香草酰基吡喃葡萄糖苷。

图2 化合物1关键的HMBC及1H-1H COSY信号Fig.2 Key HMBC and 1H-1H COSY correlations of compound 1

化合物3白色粉末(甲醇)；ESI-MS：m/z467 [M + H]+，分子式为C22H26O11。1H NMR(500 MHz，CD3OD)δ：7.56(1H，dd，J=8.3，2.0 Hz，H-6″)，7.52(1H，d，J= 2.0 Hz，H-2″)，7.03(1H，dd，J= 8.1 Hz，H-5)，6.99(1H，d，J= 1.9 Hz，H-2)，6.86(1H，d，J= 8.3 Hz，H-5″)，6.63(1H，d，J= 8.1 Hz，H-6)，4.89(1H，d，J= 8.5 Hz，H-1′)，4.66(1H，dd，J= 11.8，2.2 Hz，H-6′α)，4.49(2H，s，H-7)，4.38(1H，dd，J= 11.8，7.4 Hz，H-6′β)，3.85(3H，s，3″-OCH3)，3.84(3H，s，3-OCH3)，3.74(1H，ddd，J= 9.7，7.4，2.2 Hz，H-5′)，3.53(1H，dd，J= 8.9，8.5 Hz，H-2′)，3.51(1H，dd，J= 8.9，8.5 Hz，H-3′)，3.43(1H，dd，J= 9.7，8.5 Hz，H-4′)；13C NMR(125 MHz，CD3OD)δ：136.3(s，C-1)，111.2(d，C-2)，149.4(s，C-3)，145.6(s，C-4)，116.5(d，C-5)，119.1(d，C-6)，63.6(t，C-7)，55.2(q，3-OCH3)，101.3(d，C-1′)，73.5(d，C-2′)，76.4(d，C-3′)，70.6(d，C-4′)，74.2(d，C-5′)，63.5(t，C-6′)，121.0(s，C-1″)，112.4(d，C-2″)，147.4(s，C-3″)，151.6(s，C-4″)，114.6(d，C-5″)，123.9(d，C-6″)，166.5(s，C-7″)，55.1(q，3″-OCH3)。以上数据与文献[13]报道基本一致，故鉴定化合物3为saccharumoside B。

化合物4白色粉末(甲醇)；ESI-MS：m/z533 [M + Na]+，分子式为C23H26O13。1H NMR(500 MHz，DMSO-d6)δ：7.42(1H，d，J= 1.9 Hz，H-2′)，7.30(1H，dd，J= 8.5，1.9 Hz，H-6′)，7.18(1H，d，J= 8.5 Hz，H-5′)，7.16(2H，s，H-2″，6″)，5.10(1H，d，J= 7.4 Hz，H-1)，4.59(1H，dd，J= 12.0，2.0 Hz，H-6α)，4.12(1H，dd，J= 12.0，7.6 Hz，H-6β)，3.80(1H，m，H-5)，3.76(3H，s，3′-OCH3)，3.73(6H，s，3″，5″-OCH3)，3.31(1H，m，H-2)，3.28(1H，m，H-3)，3.20(1H，dd，J= 8.5，8.3 Hz，H-4)；13C NMR(125 MHz，DMSO-d6)δ：99.1(d，C-1)，73.0(d，C-2)，76.6(d，C-3)，70.1(d，C-4)，74.1(d，C-5)，64.0(t，C-6)，124.2(s，C-1′)，112.7(d，C-2′)，150.0(s，C-3′)，147.6(s，C-4′)，114.7(d，C-5′)，122.5(d，C-6′)，166.9(s，C-7′)，55.6(q，3′-OCH3)，119.2(s，C-1″)，107.1(d，C-2″，6″)，148.4(s，C-3″，5″)，141.0(s，C-4″)，165.4(s，C-7″)，56.2(q，3″，5″-OCH3)。以上数据与文献[14]报道基本一致，故鉴定化合物4为1-O-香草酸-6-(3″,5″-二甲氧基没食子酰)-β-D-吡喃葡萄糖苷。

化合物5黄色粉末(甲醇)；ESI-MS：m/z359 [M + H]+，分子式为C16H22O9。1H NMR(500 MHz，CD3OD)δ：7.62(1H，d，J= 2.5 Hz，H-3)，5.57(1H，d，J= 1.7 Hz，H-1)，5.55(1H，dd，J= 17.0，10.0 Hz，H-8)，5.33(1H，dd，J= 17.2，1.8 Hz，H-10β)，5.29(1H，dd，J= 10.0，1.8 Hz，H-10α)，4.71(1H，d，J= 7.9 Hz，H-l′)，4.47(1H，m，H-7β)，4.40(1H，dd，J= 11.9，2.6 Hz，H-7α)，3.88(1H，d，J= 12.0 Hz，H-6′β)，3.68(1H，dd，J= 12.0，6.0 Hz，H-6′α)，3.40～3.29(3H，m，H-3′，4′，5′)，3.21(1H，dd，J= 9.0，7.9 Hz，H-2′)，3.16(1H，m，H-5)，2.72(1H，ddd，J= 9.6，5.5，1.8 Hz，H-9)，1.77～1.70(2H，m，H-6)；13C NMR(125 MHz，CD3OD)δ：98.0(d，C-1)，154.0(d，C-3)，106.0(s，C-4)，28.4(d，C-5)，25.9(t，C-6)，69.7(t，C-7)，133.3(d，C-8)，43.8(d，C-9)，120.8(t，C-10)，168.5(s，C-11)，99.7(d，C-l′)，74.7(d，C-2′)，77.9(d，C-3′)，71.5(d，C-4′)，78.4(d，C-5′)，62.7(t，C-6′)。以上数据与文献[15,16]报道基本一致，故鉴定化合物5为獐牙菜苷。

化合物6白色粉末(甲醇)；ESI-MS：m/z571 [M + Na]+，分子式为C25H40O13。1H NMR(500 MHz，CD3OD)δ：5.88(1H，d，J= 1.5 Hz，H-4)，5.86(1H，s，H-7)，5.73(1H，dd，J= 15.5，6.5 Hz，H-8)，4.42(1H，dq，J= 6.5，2.5 Hz，H-9)，4.35(1H，d，J= 8.0 Hz，H-1″)，4.28(1H，d，J= 7.7 Hz，H-1′)，3.85(2H，d，J= 11.7 Hz，H-6″α，6″β)，3.64(2H，m，H-6′α，6′β)，3.37～3.14(8H，m，H-2′，2″，3′，3″，4′，4″，5′，5″)，2.16(2H，d，J= 4.0 Hz，H-2)，1.91(3H，d，J= 1.5 Hz，H-13)，1.28(3H，d，J= 6.5 Hz，H-10)，1.03(6H，s，H-11，12)；13C NMR(125 MHz，CD3OD)δ：42.5(s，C-1)，50.6(t，C-2)，201.3(s，C-3)，127.1(d，C-4)，167.3(s，C-5)，80.0(s，C-6)，131.5(d，C-7)，135.2(d，C-8)，77.3(d，C-9)，21.2(q，C-10)，23.5(q，C-11)，24.7(q，C-12)，19.6(q，C-13)，101.2(d，C-1′)，75.2(d，C-2′)，77.9(d，C-3′)，71.6(d，C-4′)，78.1(d，C-5′)，62.7(t，C-6′)，102.6(d，C-1″)，77.3(d，C-2″)，78.0(d，C-3″)，74.9(d，C-4″)，78.3(d，C-5″)，62.7(t，C-6″)。以上数据与文献[17]报道基本一致，故鉴定化合物6为phoenixoside A。

化合物7白色针状结晶(甲醇)；ESI-MS：m/z389 [M + H]+，分子式为C21H24O7。1H NMR(500 MHz，CD3OD)δ：7.00(1H，d，J= 2.0 Hz，H-2)，6.86(1H，dd，J= 8.1，2.0 Hz，H-6)，6.79(1H，d，J= 8.1 Hz，H-5)，6.68(2H，s，H-2′，6′)，4.74(2H，d，J= 4.2 Hz，H-7，7′)，4.25(2H，m，H-9β，9′β)，3.87(2H，m，H-9α，9′α)，3.82(3H，s，3-OCH3)，3.79(6H，s，3′，5′-OCH3)，3.15(2H，m，H-8，8′)；13C NMR(125 MHz，CD3OD)δ：133.8(s，C-1)，110.7(d，C-2)，149.2(s，C-3)，147.8(s，C-4)，115.1(d，C-5)，120.5(d，C-6)，87.5(d，C-7)，56.9(d，C-8，8′)，72.1(t，C-9)，56.7(3-OCH3)，130.1(s，C-1′)，104.6(d，C-2′，6′)，149.5(s，C-3′，5′)，133.9(s，C-4′)，87.9(d，C-7′)，72.9(d，C-9′)，54.5(q，3′-OCH3)，56.4(q，5′-OCH3)。以上数据与文献[18]报道基本一致，故鉴定化合物7为杜仲树脂酚。

化合物8白色粉末(甲醇)；ESI-MS：m/z313 [M + H]+，分子式为C15H20O7。1H NMR(500 MHz，CD3OD)δ：8.00(1H，d，J= 16.0 Hz，H-4)，6.25(1H，d，J= 16.0 Hz，H-5)，5.82(1H，s，H-2)，3.54(1H，m，H-3′)，3.44(1H，m，H-4′)，2.31(1H，dd，J= 14.5，7.3 Hz，H-2′β)，2.06(3H，s，3-CH3)，1.83(1H，dd，J= 14.5，10.1 Hz，H-2′α)，1.34(3H，s，1′-CH3)，1.18(3H，s，5′-CH3)；13C NMR(125 MHz，CD3OD)δ：170.6(s，C-1)，121.5(d，C-2)，149.0(s，C-3)，133.6(d，C-4)，131.7(d，C-5)，21.0(q，3-CH3)，89.3(s，C-1′)，40.7(t，C-2′)，72.4(d，C-3′)，76.8(d，C-4′)，59.0(s，C-5′)，179.0(s，C-6′)，82.9(s，C-8′)，18.5(q，1′-CH3)，10.4(q，5′-CH3)。以上数据与文献[19,20]报道基本一致，故鉴定化合物8为rel-5-(1R,5S-dimethyl-3R,4R,8S-trihydroxy-7-oxa-6-oxobicyclo-[3,2,1]oct-8-yl)-3-methyl-2Z,4E-pentadienoic acid。

化合物9白色结晶(甲醇)；ESI-MS：m/z209 [M + H]+，分子式C11H12O4。1H NMR(500 MHz，CD3OD)δ：7.72(1H，d，J= 15.0 Hz，H-7)，7.16(1H，d，J= 8.0 Hz，H-6)，7.04(1H，s，H-2)，6.82(1H，s，J= 8.0 Hz，H-5)，6.30(1H，d，J= 15.0 Hz，H-8)，3.85(3H，s，4-OCH3)，3.83(3H，s，3-OCH3)；13C NMR(125 MHz，CD3OD)δ：125.5(s，C-1)，108.4(d，C-2)，148.9(s，C-3)，152.7(s，C-4)，113.1(d，C-5)，123.3(d，C-6)，148.8(d，C-7)，116.0(d，C-8)，170.5(s，C-9)，56.9(q，3-OCH3)，56.6(q，4-OCH3)。以上数据与文献[21]报道基本一致，故鉴定化合物9为3,4-二甲氧基-肉桂酸。

化合物10白色针状结晶(甲醇)；ESI-MS：m/z149 [M + H]+，分子式C9H8O2。1H NMR(500 MHz，CD3OD)δ：7.67(1H，d，J= 16.0 Hz，H-7)，7.60(2H，m，H-2，6)，7.40(2H，m，H-3，5)，7.38(1H，m，H-4)，6.46(1 H，d，J= 16.0 Hz，H-8)；13C NMR(150 MHz，CD3OD)δ：135.9(s，C-1)，130.0(d，C-2，6)，129.2(d，C-3，5)，131.4(d，C-4)，146.3(d，C-7)，119.4(d，C-8)，170.4(s，C-9)。以上数据与文献[22]报道基本一致，故鉴定化合物10为反式肉桂酸。

化合物11白色粉末(甲醇)；ESI-MS：m/z339 [M + Na]+，分子式为C14H20O8。1H NMR(500 MHz，CD3OD)δ：6.85(1H，d，J= 8.0 Hz，H-6)，6.82(1H，d，J= 2.7 Hz，H-2)，6.67(1H，dd，J= 8.0，2.7 Hz，H-5)，4.78(1H，d，J= 7.1 Hz，H-1′)，3.90(1H，dd，J= 12.0，2.0 Hz，H-6′α)，3.81(3H，s，4-OCH3)，3.78(3H，s，3-OCH3)，3.69(1H，dd，J= 12.0，6.0 Hz，H-6′β)，3.47～3.33(4H，m，H-2′，H-3′，H-4′，H-5′)；13C NMR(125 MHz，CD3OD)δ：153.9(s，C-1)，104.0(d，C-2)，151.1(s，C-3)，146.0(s，C-4)，113.9(d，C-5)，109.3(d，C-6)，57.1(q，3-OCH3)，56.4(q，4-OCH3)，103.5(d，C-1′)，75.0(d，C-2′)，78.5(d，C-3′)，71.5(d，C-4′)，78.0(d，C-5′)，62.6(t，C-6′)。以上数据与文献[15]报道基本一致，故鉴定化合物11为3,4-二甲氧基苯基-β-D-吡喃葡萄糖苷。

化合物12白色粉末(甲醇)；ESI-MS：m/z369 [M + Na]+，分子式为C15H22O9。1H NMR(500 MHz，DMSO-d6)δ：6.38(2H，s，H-2，H-6)，4.77(1H，d，J= 7.6 Hz，H-1′)，3.72(6H，s，3，5-OCH3)，3.69(1H，m，H-6′α)，3.57(3H，s，4-OCH3)，3.40(1H，m，H-6′β)，3.34(1H，t，J= 8.8 Hz，H-5′)，3.30(1H，m，H-3′)，3.19(1H，t，J= 7.6 Hz，H-2′)，3.08(1H，t，J= 9.2 Hz，H-4′)；13C NMR(125 MHz，DMSO-d6)δ：154.0(s，C-1)，94.3(d，C-2，6)，153.1(s，C-3，5)，132.4(s，C-4)，55.7(q，3-OCH3)，60.1(q，4-OCH3)，55.7(q，5-OCH3)，101.0(d，C-1′)，73.3(d，C-2′)，76.8(d，C-3′)，70.1(d，C-4′)，77.3(d，C-5′)，60.9(t，C-6′)。以上数据与文献[15,23]报道基本一致，故鉴定化合物12为3,4,5-三甲氧基苯酚-β-D-吡喃葡萄糖苷。

化合物13白色粉末(甲醇)；ESI-MS：m/z123 [M + H]+，分子式为C7H6O2。1H NMR(500 MHz，CD3OD)δ：8.03(1H，m，H-2)，7.99(1H，m，H-6)，7.58(1H，d，J= 7.4 Hz，H-4)，7.46(2H，d，J= 7.4 Hz，H-3，H-5)；13C NMR(125 MHz，CD3OD)δ：130.5(s，C-1)，129.3(d，C-2，6)，128.1(d，C-3，5)，132.6(d，C-4)，168.5(s，C-7)。以上数据与文献[24]报道基本一致，故鉴定化合物13为苯甲酸。

化合物14白色针状结晶(甲醇)；ESI-MS：m/z155 [M + H]+，分子式为C7H6O4。1H NMR(500 MHz，CD3OD)δ：7.43(1H，m，H-2)，7.40(1H，m，H-6)，6.80(1H，d，J= 8.0 Hz，H-5)；13C NMR(125 MHz，CD3OD)δ：123.2(s，C-1)，115.8(d，C-2)，146.1(s，C-3)，151.5(s，C-4)，117.7(d，C-5)，123.9(d，C-6)，170.3(s，C-7)。以上数据与文献[25]报道基本一致，故鉴定化合物14为原儿茶酸。

化合物15白色结晶(甲醇)；ESI-MS：m/z191 [M + Na]+，C9H12O3。1H NMR(500 MHz，CD3OD)δ：7.33(3H，s，H-2，4，6)，3.88(9H，s，1，3，5-OCH3)；13C NMR(125 MHz，CD3OD)δ：148.9(s，C-1，3，5)，108.4(d，C-2，4，6)，56.4(q，1，3，5-OCH3)。以上数据与文献[25]报道基本一致，故鉴定化合物15为1,3,5-三甲氧基苯。

2.2 活性测试结果

2.2.1 α-葡萄糖苷酶抑制活性筛选结果

本实验以阿卡波糖(acarbose,100 μmol/L)为阳性对照，对胆木中分离所得的15个化合物进行了α-葡萄糖苷酶抑制活性筛选。结果如表2所示，当浓度为0.05 mg/mL时，化合物3、7、8、13和14显示出α-葡萄糖苷酶抑制活性。

表2 化合物3、7、8、13和14的α-葡萄糖苷酶抑制活性

2.2.2 细胞毒活性结果

通过化合物1～15对人肺癌细胞株A549、宫颈癌细胞株HeLa和慢性髓原白血病细胞株K562的细胞毒活性实验，发现在浓度为20 μmol/L，对3种细胞株均未表现出细胞毒活性。

3 结果与讨论

胆木药用部位为木质部，在制药工艺上主要采用水提取制备胆木浸膏[26]作为药用部位，前期研究表明，胆木中的主要成分为生物碱[27]，但对其他类型化合物研究相对较少，因此大极性非生物碱类成分也值得深入研究。本次研究中，通过胆木木质部粉碎分离得到15个化合物，其中化合物1～4、9～14为酚酸类化合物，化合物5、6为环烯醚萜类化合物，化合物7为木质素类化合物，化合物8为倍半萜类化合物，化合物15为苯丙素类化合物。化合物1为新化合物，化合物1～4、6～8均为首次从该属植物中分离得到。体外活性筛选结果表明，化合物3、7、8、13和14显示出弱的α-葡萄糖苷酶抑制活性，且所有化合物均无细胞毒活性。本研究结果首次开展了胆木中大极性非生物碱部分化学成分的α-葡萄糖苷酶抑制与细胞毒活性研究，丰富了胆木中化学成分的多样性，发现其显示出弱的α-葡萄糖苷酶抑制活性，为该海南特色黎药胆木开发利用，以及拓宽胆木的新应用提供参考。