高效液相色谱法测定牛奶及奶粉中免疫球蛋白含量

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上海市营养食品质量监督检验站/上海源本食品质量检验有限公司（上海 200090）

随着时代的发展和生活水平的提高，人们越来越注重食物本身的营养价值和作用，同时随着新冠疫情的常态化，增强免疫、提高免疫力成为大家共有的目标。牛奶中除了含有丰富的营养物质之外，还含有众多免疫活性物质，有益人体健康，因此越来越多的人将牛奶列为每日必需品。此外，市面上还有一些宣称具有增强免疫功能的奶粉，添加免疫球蛋白、乳铁蛋白等免疫活性物质，以此吸引消费者购买。免疫球蛋白（immunoglobulin，Ig）就是上述免疫活性物质之一，它是一种具有抗体活性或化学结构与抗体分子相似的球蛋白，为Y字型结构，根据电泳迁移率和免疫功能不同，可分为IgG、IgA、IgD、IgE、IgM。其中，IgG又可分为IgG1、IgG2、IgG3和IgG44个亚类，IgA可分为IgA1和IgA22个亚类，IgM可分为IgM1和IgM22个亚类。IgG是牛初乳中主要的免疫活性物质，具有抗菌、抗病毒、抗毒素等多种免疫活性[1-3]。

我国现行实施的测定免疫球蛋白的标准有针对保健品和饲料的高效亲和色谱法、牛初乳及其制品的分光光度法和酶联免疫法，其中高效亲和色谱法和酶联免疫法比较常用。酶联免疫法反应灵敏，操作过程中稍有差池就会影响结果[4]，而高效亲和色谱法除了基质针对的是保健品和饲料外，所使用的色谱柱不耐压、易漏液[3]，并且乳及乳制品中含有脂肪和蛋白质，去除不干净会污染检测器且干扰较大，影响定量。试验参考高效亲和色谱法，通过HiTrapTMProtein G HP亲和柱结合免疫球蛋白，采用C18色谱柱进行分离，对牛奶及奶粉中免疫球蛋白的测定进行研究。……