鸭星状病毒3型TaqMan探针荧光定量PCR检测方法的建立与应用

傅秋玲，傅光华*，程龙飞，施少华，陈红梅，万春和，刘荣昌，黄 瑜*

(1.福建省农业科学院 畜牧兽医研究所，福建 福州 350013；2.福建省禽病防治重点实验室，福建 福州 350013)

鸭星状病毒(duck astrovirus，DAstV)是引起鸭病毒性肝炎的重要病原之一，为星状病毒科(Astroviridae)禽星状病毒属(Avastrovirus)的成员，该病毒具备星状病毒的典型特征，即为无囊膜、表面呈特征性六角或五角“星”样状结构的单股正链小RNA病毒。病毒粒子直径为28～30 nm，其基因组全长约7.4 kb，包含3个主要的开放阅读框(ORFs)(ORF1a、ORF1b和ORF2)，编码非结构蛋白nsp1a、非结构蛋白nsp1b、RNA依赖的RNA聚合酶(RDRP)及衣壳蛋白等；病毒基因组5′端非编码区长为19 bp，含有CCGAA基序，3′端非编码区为219 bp，含有星状病毒共有序列s2m基序且其末端带有poly(A)尾[1-3]。目前已报道的鸭星状病毒分为鸭星状病毒1型(DAstV-1)、鸭星状病毒2型(DAstV-2)、鸭星状病毒3型(DAstV-3)和鸭星状病毒4型(DAstV-4)。DAstV-1最早于1985年在英国的鸭肝炎病例中被发现，当时被命名为血清2型鸭肝炎病毒，随后于2005年被更名为DAstV-1[1,4]。2009年，TODD等[5]报道传统的血清3型鸭肝炎病毒归为星状病毒属的成员，有学者鉴于其与DAstV-1 M52株的序列同源性仅为64%～69%，建议将其命名为DAstV-2。DAstV-3和DAstV-4是近年来在鸭群中发现的新型星状病毒，其确切的分类地位尚不明确，因其基因序列与DAstV-1及DAstV-2同源性均较低，学者建议另外设立为DAstV-3和DAstV-4[6-7]。4种DAstV间的抗原性和基因组序列同源性差异较明显。

DAstV感染可引起鸭发生病毒性肝炎，病雏鸭常呈现角弓反张、肝脏出血充血、肾脏肿大，鸭群病死率可达50%以上[8]。近年来，尽管养鸭产业不断升级，集约化、规模化程度越来越高，鸭病毒性肝炎依然是严重威胁养鸭业健康发展的重要传染病之一。……