降钙素原检测方法以及其临床意义研究的进展

唐柳琳

恭城瑶族自治县人民医院 广西 桂林 542500

降钙素原(PCT)水平可在感染(infection)性疾病患者中出现特异性上升趋势，临床多将PCT指标用于鉴别细菌性与非细菌性、败血症、bacterial infection、脓毒症、其他感染性疾病，同时PCT水平可作为临床制定抗生素治疗方案、预测疾病预后的重要指标[1-2]。相较于其他实验室指标而言，PCT水平在诊断bacterial infection性疾病特异性较高，临床诊断价值高，是诊断infection状态重要的微生物学指标[3]。PCT水平可辅助诊断多种infection性疾病、监测病程、指导用药，临床发展PCT检测方法迅速，可进行快速定性[4]。

一、PCT实验室检测方法

1.免疫化学发光法

利用胶体金免疫层析技术，在标准品上结合有胶体金的绵羊克隆抗降钙素抗体、小鼠单克隆抗降钙素抗体，加入待检标本中，标本中的PCT结合胶体金元素[5]，由此标记的抗原抗体复合物即可结合到固定的抗降钙素抗体上，最后形成复合物，呈现“三明治式”，再通过发光比色评价PCT浓度，方法特异性高，且不会产生交叉反应，检测的最低限度为10ng/L，具有10-60ng/L的标准曲线线性范围，临床均应用全自动化仪器进行免疫荧光法、免疫化学发光法，检测结果准确性高、特异性高，尤其适用于监测重度infection患者的PCT水平[6]。

2.放射免疫学分析法

利用人工合成PCT多抗特异的连接并识别合成氨基酸PCT，该方法可将检测的血清PCT浓度精确到4pg/ml，但检测结果是游离、结合型PCT、CT基因相关肽前体的混合物，导致无法有效区分该三种物质，虽然放射免疫学分析法检测具有高灵敏度，但需要花费较长的检测用时，一般在10h左右，同时检测中存在放射性元素污染，因此在临床应用限制较大[7]。

3.免疫荧光法

该方法是一种定量的免疫学检测法，通过将PCT和下钙素结合2种鼠单克隆抗体，将抗体经荧光标记在管壁上固定，PCT分子与血浆分别结合2种抗体，形成“双抗体夹心复合物”[8-9]。

4.透射免疫浊度法

该方法的原理是通过试剂的PCT单抗与样本中的PCT产生抗原-抗体反应，增加体系浊度，而标本中的PCT浓度与浊度在一定的浓度范围内呈现线性正比[10-11]。临床应用全自动生化分析仪适用于透射免疫浊度法，应用优势包括可快速获得结果、操作步骤简单、可同时大批量检测[12]。

5.胶体金技术金标法

在检测孔内加入样本后，金标单抗结核样本中的PCT，获得带金标记的抗原抗体复合物，复合物可在渗透作用下在反应膜条上移动，金标记复合物与膜上固定的抗体结合后形成抗原抗体复合物。当样本PCT含量＞0.5ng/ml时呈现红色反应，而PCT浓度与颜色深浅度呈现正比，与标准比色板颜色进行比对可获得样本PCT的浓度范围[13-14]。检测结果可分为四级，正常:＜0.5ng/ml；轻度上升:＞0.5ng/ml；明显上升:＞2.0ng/ml；显著上升:＞10.0ng/ml。金标胶体方法可判断颜色，方便观察，无需检测仪器，操作简单，快速，且结果与免疫荧光法结果一致性高，适合床边检测[15]。

6.凝胶层析法及高效液相色谱分析法

高效液相色谱分析法与凝胶层析法已经被临床研究开发，该2种方法均具有精确的检测结果，但检测耗时，且检测费用高昂、不易自动化，因此限制了该方法在临床的应用[16]。

二、PCT检测的临床意义

1.临床鉴别细菌性与非细菌性炎症反应的应用

细菌会引起全身炎症反应，提高血清PCT浓度，而血清中PCT浓度在有无病毒infection、有无器官排斥、有无自身免疫性疾病等变态炎性反应中处于较低水平，患者血清中PCT水平高低可帮助鉴别临床非细菌与细菌性炎症[17]。

2.败血症中的应用

infection死亡率高，可引起全身infection综合征，是ICU收治的危重症患者死亡的主要原因，在infection时，常规检测实验室指标与临床症状诊断误诊风险高，相较于传统检测方法，PCT水平不受外界干扰，会影响检测效果，相比较而言，infection初期即可出现PCT水平上升，诊断时准确率较高，若PCT水平上升或持续维持高水平则可提示疾病预后效果较为不良，如果PCT水平迅速下降到正常水平则提示疾病预后效果良好。

3.在脓毒症、全身严重bacterial infection中的应用

ICU常见的严重疾病为脓毒症，脓毒症患者机体PCT水平明显高于非infection脓毒症患者的PCT水平，结果可帮助鉴别bacterial infection，全身infection后大部分炎症因子会出现间歇性上升趋势，经统计分析可发现严重infection辅助诊断中PCT指标可作为最佳的检测指标，临床将PCT水平作为脓毒症的早期标志物，尤其可辅助诊断新生儿脓毒症，PCT的敏感性、特异性均较高。

4.其他疾病中的应用

下呼吸道infection中可将PCT水平作为抗生素治疗方案的参考依据，辅助降低使用抗生素的频率，尤其是慢阻肺急性发作、急性支气管疾病中较为显著，PCT检测指标是临床预测急性infection心内膜炎的唯一指标，infection坏死胰腺时PCT水平较无菌坏死胰腺炎明显升高，相比较之下，PCT指标与临床有无infection坏死性胰腺炎指标接近，infection性休克疾病经敏感抗生素治疗后PCT水平也随之迅速下降，说明血清PCT水平对早期诊断bacterial infection性休克、评估疾病发展速度意义重大。

小结

PCT是无激素活性的蛋白质，与传统炎症指标比较而言，PCT优势包括敏感性、特异性高、反应简单快速，健康人体内PCT含量＜0.1μg/L，含量极低。当机体出现真菌、细菌、寄生虫等infection情况下即可出现明显上升趋势，病毒或局部infection后PCT值仅出现轻微上升，对鉴别真菌、细菌、病毒性infection、评估infection严重程度、判断疾病预后意义重大。体内外的PCT水平具有良好的稳定性，可作为新型的炎性标志物，随着临床不断发展检测技术，PCT也在临床应用范围越来越广。