氧化苦参碱对棕榈酸诱导的人脐静脉内皮细胞胰岛素抵抗的作用及机制

王 莉，曾文靖，王超文，罗臻硕，黄起壬

• 药理与临床 •

氧化苦参碱对棕榈酸诱导的人脐静脉内皮细胞胰岛素抵抗的作用及机制

王 莉，曾文靖，王超文，罗臻硕，黄起壬*

南昌大学药学院，江西 南昌 330006

探讨氧化苦参碱（oxymatrine，OMT）对棕榈酸（palmitic acid，PA）诱导的人脐静脉内皮细胞（human umbilical vein endothelial cells，HUVECs）胰岛素抵抗（insulin resistance，IR）作用及机制。通过PA（0.25 mmol/L）诱导HUVECs建立IR模型后，进行OMT的量效关系和时效关系研究，筛选出OMT的最佳作用浓度和最佳作用时间。CCK-8法检测HUVECs活力；苏木素-伊红（HE）染色观察细胞形态；Western blotting检测细胞磷酸化磷脂酰肌醇3-激酶（phosphorylated phosphatidylinositol 3-kinase，p-PI3K）/蛋白激酶B（protein kinase B，Akt）/内皮型一氧化氮合酶（endothelial nitric oxide synthase，eNOS）通路、激活信号传导及转录激活因子（signal transducer and activator of transcription，STAT）蛋白抑制因子1（protein inhibitor of activated STAT 1，PIAS1）蛋白表达；试剂盒检测一氧化氮（nitric oxide，NO）水平。根据筛选出的OMT最佳浓度（4 μmol/L）和作用时间（48 h），敲低PIAS1进行机制探讨，Western blotting检测PIAS1、核因子-κB p65（nuclear factor-κB p65，NF-κB p65）蛋白表达；荧光探针2′,7′-二氯二氢荧光素二乙酸酯（2′,7′-dichlorodihydrofluorescein diacetate，DCFH-DA）检测活性氧（reactive oxygen species，ROS）水平；ELISA法检测白细胞介素-6（interleukin-6，IL-6）水平；免疫荧光法观察NF-κB p65核转位情况。随着OMT作用浓度和时间的增加，PI3K/Akt/eNOS通路和PIAS1蛋白表达量及NO水平均增加（＜0.05、0.01、0.001）。转染Ad-PIAS1-RNAi后，NF-κB p65蛋白表达量、ROS和IL-6水平均显著增加（＜0.01、0.001），NF-κB p65入核程度显著增强（＜0.05、0.01），而OMT可以部分逆转上述作用（＜0.05、0.01、0.001）。OMT能改善PA体外诱导的血管内皮IR，其机制主要是通过上调PIAS1通路减轻高脂诱导的炎症反应和氧化应激。

氧化苦参碱；人脐静脉内皮细胞；棕榈酸；胰岛素抵抗；PIAS1；炎症反应；氧化应激

随着全球肥胖率的增加，胰岛素抵抗（insulin resistance，IR）以及相关心血管疾病的患病率也在增加[1]。IR是肥胖和2型糖尿病的共同病理特征[2]。IR涉及多种分子和病理生理机制，是代谢紊乱、脂毒性、糖毒性和炎症等相互作用的结果[3]。……