甘肃产1~2年生红芪和黄芪皂苷、多糖、黄酮类成分含量差异研究

2023-07-21 06:57王瑞海吴东苑刘丽梅
中草药 2023年14期
关键词:芒柄红芪武都

叶 迎,王瑞海,苗 青,许 京,吴东苑,刘丽梅*

甘肃产1~2年生红芪和黄芪皂苷、多糖、黄酮类成分含量差异研究

叶 迎1,王瑞海1,苗 青1,许 京1,吴东苑2,刘丽梅1*

1. 中国中医科学院中医基础理论研究所 中药分析室,北京 100700 2. 中央民族大学理学院,北京 100081

对甘肃产1~2年生红芪(多序岩黄芪)和黄芪(蒙古黄芪var.或膜荚黄芪)总皂苷、总多糖、黄酮类成分含量进行统计分析,综合多指标探讨红芪和黄芪的差异。运用R3.3.2软件,选取总皂苷、总黄酮、总多糖、毛蕊异黄酮苷、毛蕊异黄酮、芒柄花苷、芒柄花素、4种异黄酮含量总和8个含量指标,产地、品种、采收时间、纬度、经度、海拔高度6个影响质量的因素做变量,采用相关分析、聚类分析、主成分分析方法,对甘肃产1~2年生红芪和黄芪质量差异进行综合评价。聚类结果表明红芪、黄芪聚成2大类,2种药材品质相差较大;主成分分析结果表明,黄芪质量优于红芪,总体上2年生红芪、黄芪药材质量优于1年生药材,宕昌产黄芪质量较优,武都产红芪质量较优。甘肃产红芪和黄芪药材质量有明显差异,从质量角度分析,二者不适合替代使用。

红芪;黄芪;毛蕊异黄酮苷;毛蕊异黄酮;芒柄花苷;芒柄花素;聚类分析

《中国药典》2020年版一部规定,黄芪为豆科植物蒙古黄芪(Fisch.) Bge. var.(Bge.) Hsiao或膜荚黄芪(Fisch.) Bge.的干燥根,红芪为豆科植物多序岩黄芪Hand.-Mazz的干燥根,二者均具有补气升阳、固表止汗、利水消肿、生津养血、行滞通痹、托毒排脓、敛疮生肌的功效[1]。在传统中医用药中黄芪和红芪本不分,二者自古就通用。而至今,在我国西北、西南、港澳台地区及东南亚一些地区仍有以红芪用作黄芪替代品的习惯[2,3],同时在中成药中也有用红芪代替黄芪入药的现象存在[4]。仅从功效相同的角度来看,红芪似乎可以代替黄芪使用,但药典中并未指出2药材在功效相同的基础上,是否有药效强弱之分、或对某种功效有所侧重。现代药理研究表明,中药发挥药效是因其含有多种能对机体产生药理作用的活性成分。红芪和黄芪中主要的活性成分种类有黄酮、皂苷、多糖[5-7],每一种成分对药效都有不同的影响[8-14]。对于红芪和黄芪黄酮、皂苷、多糖类成分含量综合对比研究尚未见文献报道。甘肃是红芪、黄芪道地产区,基于此,本课题选择甘肃不同产地同一生态环境下种植的红芪和黄芪,统一加工方法和研究方法,对红芪和黄芪2个品种药效物质基础进行对比分析。为了能够全面、综合评价二者的质量,使得出的结论更加可靠,本实验将测定的所有红芪和黄芪中黄酮[15-16]、皂苷[17-18]、多糖[19]以及异黄酮[20]的含量结果作为研究数据,进行统计学分析。通过对红芪和黄芪药材中主要有效成分含量的综合对比,说明二者在药效物质基础方面的异同,进而阐明红芪是否可以代替黄芪使用,为指导黄芪临床用药提供科学依据。

1 材料与仪器

1.1 材料

对照品毛蕊异黄酮(批号PS13081501)、芒柄花素苷(批号PS13081501)购自成都普思生物科技股份有限公司;对照品毛蕊异黄酮- 7--β-葡萄糖苷(批号20141109)购自北京坛墨质检科技有限公司;对照品芒柄花素(111703-200603)购自中国食品药品检定研究院,对照品毛蕊异黄酮葡萄糖苷(批号111920-201304)购自中国食品药品检定研究院,对照品黄芪甲苷(批号20141119)购自北京坛墨质检科技有限公司;上述对照品质量分数均≥98%;乙腈为色谱纯(Fisher公司);其他试剂为分析纯,水为纯净水。

红芪、黄芪药材分别采自甘肃宕昌、武都、陇西、渭源、岷县、礼县,并经中国中医科学院中药研究所胡世林教授鉴定为《中国药典》2020年版收载的正品黄芪和红芪,黄芪1~4、9~18、22~28号原植物为蒙古黄芪(Fisch.)Bge. var.(Bge.) Hsiao,5~8、19~21号原植物为膜荚黄芪(Fisch.) Bge.;红芪1~28号原植物为多序岩黄芪Hand. -Mazz.的根,结果见表1。

表1 甘肃产不同产地红芪和黄芪采样信息

Table1 Sampling information of Hedysari Radix and Astragali Radixfrom different geographical origins of Gansu

药材编号药材生长年限/年地区品种采收时间纬度 (N)/°经度(E) /°海拔高度/m R1-1红芪1礼县多序岩黄芪2014-1034.17105.31611 R1-2红芪1礼县多序岩黄芪2014-1034.16105.21667 R1-3红芪1岷县多序岩黄芪2014-1034.53104.12447 R1-4红芪1渭源县多序岩黄芪2014-1035.07104.32027 R1-5红芪1陇西县多序岩黄芪2014-1035.09104.51831 R1-6红芪1陇西县多序岩黄芪2014-1035.09104.51827 R1-7红芪1陇西县多序岩黄芪2014-1035.13104.41866 R1-8红芪1陇西县多序岩黄芪2014-1035.19104.41959 R1-9红芪1宕昌县多序岩黄芪2014-1134.05104.22010 R1-10红芪1宕昌县多序岩黄芪2014-1134.08104.22141 R1-11红芪1宕昌县多序岩黄芪2014-1134.18104.22343 R1-12红芪1宕昌县多序岩黄芪2014-1134.18104.22300 R1-13红芪1宕昌县多序岩黄芪2014-1134.18104.22392 R1-14红芪1宕昌县多序岩黄芪2014-1134.10104.31808 R1-15红芪1宕昌县多序岩黄芪2014-1133.10104.31820 R1-16红芪1宕昌县多序岩黄芪2014-1134.01104.11762 R1-17红芪1宕昌县多序岩黄芪2014-1133.71104.91784 R1-18红芪1宕昌县多序岩黄芪2014-1134.61104.82086 R1-19红芪1武都多序岩黄芪2014-1233.29150.51673 R1-20红芪1武都多序岩黄芪2014-1233.32105.12133 R1-21红芪1武都多序岩黄芪2014-1133.80105.31746 R1-22红芪1武都多序岩黄芪2014-1233.29105.61961 R1-23红芪1武都多序岩黄芪2014-1233.28105.92116 R1-24红芪1武都多序岩黄芪2014-1233.28105.82103 R1-25红芪1武都多序岩黄芪2014-1233.35104.51863 R1-26红芪1武都多序岩黄芪2014-1233.15105.41799 R1-27红芪1武都多序岩黄芪2014-1233.23105.21751

续表1

药材编号药材生长年限/年地区品种采收时间纬度 (N)/°经度(E) /°海拔高度/m R1-28红芪1武都多序岩黄芪2014-1233.28105.51497 Y1-1黄芪1岷县蒙古黄芪2014-1134.32104.02308 Y1-2黄芪1岷县蒙古黄芪2014-1134.32104.02243 Y1-3黄芪1岷县蒙古黄芪2014-1034.53104.12296 Y1-4黄芪1渭源县蒙古黄芪2014-1035.07104.32024 Y1-5黄芪1陇西县膜荚黄芪2014-1035.09104.51831 Y1-6黄芪1陇西县膜荚黄芪2014-1035.09104.51822 Y1-7黄芪1陇西县膜荚黄芪2014-1035.13104.41969 Y1-8黄芪1陇西县膜荚黄芪2014-1035.19104.41959 Y1-9黄芪1宕昌县蒙古黄芪2014-1134.03104.22050 Y1-10黄芪1宕昌县蒙古黄芪2014-1134.06104.12100 Y1-11黄芪1宕昌县蒙古黄芪2014-1134.15104.12300 Y1-12黄芪1宕昌县蒙古黄芪2014-1134.15104.22250 Y1-13黄芪1宕昌县蒙古黄芪2014-1134.16104.22350 Y1-14黄芪1宕昌县蒙古黄芪2014-1134.07104.21758 Y1-15黄芪1宕昌县蒙古黄芪2014-1133.57104.31850 Y1-16黄芪1宕昌县蒙古黄芪2014-1134.05104.21800 Y1-17黄芪1宕昌县蒙古黄芪2014-1033.56104.41750 Y1-18黄芪1宕昌县蒙古黄芪2014-1034.04104.31950 Y1-19黄芪1武都膜荚黄芪2014-1233.29150.51673 Y1-20黄芪1武都膜荚黄芪2014-1233.30105.11673 Y1-21黄芪1武都膜荚黄芪2014-1233.80105.31746 Y1-22黄芪1武都蒙古黄芪2014-1233.29105.61961 Y1-23黄芪1武都蒙古黄芪2014-1233.28105.92116 Y1-24黄芪1武都蒙古黄芪2014-1233.28105.82103 Y1-25黄芪1武都蒙古黄芪2014-1233.35104.51863 Y1-26黄芪1武都蒙古黄芪2014-1233.15105.41799 Y1-27黄芪1武都蒙古黄芪2014-1233.23105.21751 Y1-28黄芪1武都蒙古黄芪2014-1233.15105.41799 R2-1红芪2礼县多序岩黄芪2015-1034.17105.31611 R2-2红芪2礼县多序岩黄芪2015-1034.16105.21667 R2-3红芪2岷县多序岩黄芪2015-1034.53104.12447 R2-4红芪2渭源县多序岩黄芪2015-1035.07104.32027 R2-5红芪2陇西县多序岩黄芪2015-1035.09104.51831 R2-6红芪2陇西县多序岩黄芪2015-1035.09104.51827 R2-7红芪2陇西县多序岩黄芪2015-1035.13104.41866 R2-8红芪2陇西县多序岩黄芪2015-1035.19104.41959 R2-9红芪2宕昌县多序岩黄芪2015-1134.05104.22010 R2-10红芪2宕昌县多序岩黄芪2015-1034.08104.22141 R2-11红芪2宕昌县多序岩黄芪2015-1034.18104.22343 R2-12红芪2宕昌县多序岩黄芪2015-1034.18104.22300 R2-13红芪2宕昌县多序岩黄芪2015-1134.18104.22392 R2-14红芪2宕昌县多序岩黄芪2015-1134.10104.31808 R2-15红芪2宕昌县多序岩黄芪2015-1133.10104.31820 R2-16红芪2宕昌县多序岩黄芪2015-1134.01104.11762 R2-17红芪2宕昌县多序岩黄芪2015-1133.71104.91784 R2-18红芪2宕昌县多序岩黄芪2015-1134.61104.82086 R2-19红芪2武都多序岩黄芪2015-1233.29150.51673 R2-20红芪2武都多序岩黄芪2015-1233.32105.12133 R2-21红芪2武都多序岩黄芪2015-1233.80105.31746 R2-22红芪2武都多序岩黄芪2015-1233.29105.61961 R2-23红芪2武都多序岩黄芪2015-1233.28105.92116 R2-24红芪2武都多序岩黄芪2015-1233.28105.82103 R2-25红芪2武都多序岩黄芪2015-1133.35104.51863 R2-26红芪2武都多序岩黄芪2015-1133.15105.41799 R2-27红芪2武都多序岩黄芪2015-1133.23105.21751 R2-28红芪2武都多序岩黄芪2015-1133.28105.51497 R2-1黄芪2岷县蒙古黄芪2015-1034.32104.02308 R2-2黄芪2岷县蒙古黄芪2015-1034.32104.02243 R2-3黄芪2定西市蒙古黄芪2015-1035.43102.62019 R2-4黄芪2渭源县蒙古黄芪2015-1035.07104.32024 R2-5黄芪2陇西县膜荚黄芪2015-1035.09104.51831 R2-6黄芪2陇西县膜荚黄芪2015-1035.09104.51822 R2-7黄芪2陇西县膜荚黄芪2015-1035.13104.41969 R2-8黄芪2陇西县膜荚黄芪2015-1035.19104.41959

续表1

1.2 仪器

Agilent 1100高效液相色谱仪、Agilent Ecslipe-XDB C18色谱柱(250 mm×4.6 mm,5 μm)、8453型紫外-可见分光光度仪(美国安捷伦公司);CX-250型超声波清洗机(天海双龙医疗设备有限公司);CP2202S型电子分析天平(瑞士梅特勒-托利多公司);SPS202F型电子分析天平(奥豪斯公司);DZKW-4型电子恒温水浴锅(北京中兴伟业仪器有限公司);RE-52A型旋转蒸发器(上海振捷实验设备有限公司);KQ-250型超声波清洗器(昆山市超声仪器有限公司)。

2 方法

2.1 指标成分的测定

总皂苷、总黄酮、总多糖及毛蕊异黄酮苷、毛蕊异黄酮、芒柄花素苷、芒柄花素和4种异黄酮含量总和,以及6个影响质量的因素:产地、种类、采收时间、纬度、经度、海拔高度做变量,对甘肃1~2年生红芪和黄芪质量差异做综合评价。红芪和黄芪黄酮类成分、总皂苷、总多糖含量经过本课题组实验测得。

2.1.1 红芪、黄芪总黄酮含量测定方法[15-16]取红芪、黄芪约0.8 g,精密称定,分别置平底烧瓶中,精密加入70%乙醇25 mL,称定质量,加热回流3 h,取出,放冷,再称定质量,用70%乙醇补足减失的质量,摇匀,滤过,精密吸取续滤液12.5 mL,减压回收溶剂至干,用水溶解残渣,并转移至5 mL量瓶中,稀释至刻度,摇匀,加水饱和正丁醇溶液萃取(4次×5 mL),合并正丁醇溶液,减压回收溶剂至干,用甲醇溶解残渣,并转移至5 mL量瓶中,稀释至刻度,摇匀,即得红芪、黄芪供试品溶液。以毛蕊异黄酮葡萄糖苷为对照品,以甲醇为空白,在260 nm波长下测定吸光度()值。

2.1.2 红芪、黄芪总皂苷含量测定方法[17-18]取红芪、黄芪粉末(过50目筛)约0.8 g,精密称定,分别置平底烧瓶中,精密加入70%乙醇25 mL,称定质量,加热回流3 h,取出,放冷,再称定质量,用70%乙醇补足减失的质量,摇匀,滤过,精密吸取续滤液12.5 mL,减压回收溶剂至干,用水溶解残渣,并转移至5 mL量瓶中,稀释至刻度,摇匀,加水饱和正丁醇溶液萃取(4次×5 mL),合并正丁醇溶液,减压回收溶剂至干,用甲醇溶解残渣,并转移至5 mL量瓶中,稀释至刻度,摇匀,精密吸取3 mL定容至25 mL量瓶中,摇匀即得红芪、黄芪供试品溶液(含生药质量浓度为0.02 g/L)。精密吸取黄芪和红芪供试品及黄芪甲苷对照品溶液(纯水作为空白溶液)各0.15 mL,置具塞刻度试管中,90 ℃水浴挥干溶剂,放冷,分别加入5%香草醛-冰醋酸溶液0.4 mL和高氯酸1.6 mL,摇匀,分别置100 ℃水浴加热20 min,取出,立即置冰浴中冷却5 min,加入冰醋酸8 mL,摇匀,在540 nm波长处测定值。

2.1.3 红芪、黄芪总多糖含量测定方法[19]取红芪、黄芪粉末(50目)各约1.25 g,精密称定,置圆底烧瓶中,精密加入水25 mL水,称定质量,100 ℃回流提取1.5 h,放置室温,再称定质量,用蒸馏水补足减失的质量,离心,精密量取上清液0.5 mL,置离心管中,加无水乙醇2.7 mL(醇沉浓度至80 %),摇匀,冷藏过夜,离心,取沉淀加无水乙醇5 mL洗涤1次,离心,取沉淀加水溶解,置25 mL量瓶中,并稀释至刻度,摇匀,即得供试品。以葡萄糖为对照品,精密量取供试品溶液0.5~2.0 mL置10 mL量瓶中,加水补至2 mL,加4%苯酚溶液1 mL及浓硫酸5 mL,混匀,室温放置20 min使冷却,于490 nm处测定值。

2.1.4 红芪、黄芪异黄酮类成分含量测定方法[21]

(1)供试品溶液的制备:取红芪、黄芪粉末(过50目筛)约0.8 g,精密称定,分别置平底烧瓶中,精密加入70%乙醇25 mL,称定质量,加热回流3 h,取出,放冷,再称定质量,用70%乙醇补足减失的质量,摇匀,滤过,精密吸取续滤液12.5 mL,减压回收溶剂至干,用水溶解残渣,并转移至5 mL量瓶中,稀释至刻度,摇匀,加水饱和正丁醇溶液萃取(4次×5 mL),合并正丁醇溶液,减压回收溶剂至干,用甲醇溶解残渣,并转移至5 mL量瓶中,稀释至刻度,摇匀,即得红芪、黄芪供试品溶液。

(2)对照品溶液的制备:精密称取毛蕊异黄酮苷、芒柄花苷、毛蕊异黄酮、芒柄花素对照品适量,溶于80%甲醇配制成混合对照品溶液。

(3)色谱条件:采用Agilent Eclipse-C18色谱柱(250 mm×4.6 mm,5 µm),在254 nm处检测,以乙腈(A)-0.1%磷酸水(B)为流动相进行梯度洗脱,流动相梯度为0~13 min,16%~20% A;13~33 min,20%~33% A;33~46 min,33%~35% A。精密吸取混合对照品溶液和供试品溶液各10 μL,进样分析黄芪和红芪4种异黄酮类成分,色谱图见图1。

(4)毛蕊异黄酮苷标准曲线:精密量取毛蕊异黄酮苷对照品溶液225 μg/mL稀释相应倍数,配制成质量浓度分别为112.5、45、22.5、2.25、0.562 5 μg/mL的对照品溶液。取原对照品溶液及稀释后对照品溶液,进样量为10 μL,记录峰面积分别为6812.4、3578.9、1379.5、703.7、81.6、19.7。以峰面积为纵坐标(),毛蕊异黄酮苷质量为横坐标(),绘制标准曲线,其回归方程为=3 041.4+28.755,=0.999 7,结果表明毛蕊异黄酮苷在0.005 625~2.25 μg与峰面积呈良好的线性关系。

(5)芒柄花苷标准曲线:精密量取芒柄花苷对照品溶液222 μg/mL稀释相应倍数,配制成质量浓度分别为111.0、74.0、44.4、22.2、11.1 μg/mL的对照品溶液。取原对照品溶液及稀释后对照品溶液,进样量为10 μL,记录峰面积分别为5 800.0、3 067.8、2 110.6、1 229.7、671.5、323.5。以峰面积为纵坐标(),芒柄花苷质量为横坐标(),绘制标准曲线,其回归方程为=2591.8+106.81,=0.999 4。结果表明芒柄花苷在0.111~2.22 μg内与峰面积呈良好的线性关系。

1-毛蕊异黄酮苷 2-芒柄花素苷 3-毛蕊异黄酮 4-芒柄花素

(6)毛蕊异黄酮标准曲线:精密量取毛蕊异黄酮对照品溶液11.2 μg/mL稀释相应倍数,配制成质量浓度分别为5.6、1.12、0.56、0.224、0.112 μg/mL的对照品溶液。取原对照品溶液及稀释后对照品溶液,进样量为10 μL,记录峰面积分别为549.8、282.8、54.5、27.7、11.3、6.3。以峰面积为纵坐标(),毛蕊异黄酮质量为横坐标(),绘制标准曲线,=4 925.6+0.933,=0.999 9。结果表明毛蕊异黄酮在0.001 12~0.112 μg内与峰面积呈良好的线性关系。

(7)芒柄花素标准曲线:精密量取芒柄花素对照品溶液168 μg/mL稀释相应倍数,配制成质量浓度分别为84.0、16.8、1.68、0.336、0.168 μg/mL的对照品溶液。取原对照品溶液及稀释后对照品溶液,进样量为10 μL,记录峰面积分别为7 712.1、3 994.9、747.4、80.7、17.8、10.7。以峰面积为纵坐标(),芒柄花素质量为横坐标(),绘制标准曲线,其回归方程为=4 614.8+9.683 5,=0.999 8。结果表明芒柄花素在0.001 68~1.68 μg与峰面积呈良好的线性关系。

(8)精密度考察:精密量取对照品混标溶液,进样量10 μL,连续测定6次。方法学考察结果表明毛蕊异黄酮苷、芒柄花苷、毛蕊异黄酮、芒柄花素RSD分别为1.6%、0.69%、1.2%、1.4%,说明本方法精密度良好。

(9)稳定性考察:精密黄芪和红芪23号药材粉末(过50目筛)各1份,制备供试品溶液,分别于0、2、4、6、12、24 h进样检测,进样量为10 μL,记录峰面积,进行含量计算,结果红芪中毛蕊异黄酮苷、芒柄花苷、毛蕊异黄酮、芒柄花素在24 h内RSD分别为1.6%、1.2%、2.2%、0.91%;黄芪中毛蕊异黄酮苷、芒柄花苷、毛蕊异黄酮、芒柄花素在24 h内RSD分别为0.88%、0.77%、0.82%、1.9%;表明红芪和黄芪供试品在24 h内稳定。

(10)重复性考察:取同一批次的黄芪和红芪样品粉末各6份,精密称定,按已建立的方法,进样量为10 μL,记录峰面积,进行含量计算,结果红芪中毛蕊异黄酮苷、芒柄花苷、毛蕊异黄酮、芒柄花素含量RSD分别为2.7%、2.3%、2.1%、2.0%;黄芪中毛蕊异黄酮苷、芒柄花苷、毛蕊异黄酮、芒柄花素含量RSD分别为2.5%、2.5%、2.2%、2.7%;表明二者的重复性符合规定。

(11)加样回收率试验:黄芪对照品混合对照品溶液中毛蕊异黄酮苷、芒柄花苷、毛蕊异黄酮、芒柄花素质量浓度分别为91.2、46.0、2.4、3.0 μg/mL;红芪对照品混合对照品溶液中毛蕊异黄酮苷、芒柄花苷、毛蕊异黄酮、芒柄花素质量浓度分别为4.6、61.0、1.2、22.4 μg/mL。分别精密吸取黄芪对照品混标溶液和红芪对照品混标溶液各5 mL,置于平底烧瓶中,每种混合对照品各6份,水浴蒸干溶剂,精密称取同一黄芪、红芪供试品粉末各6份,分别置于上述对应的平底烧瓶中,制备供试品溶液,记录峰面积,计算加样回收率。结果红芪和黄芪毛蕊异黄酮苷加样平均回收率分别为99.88%、97.65%,其RSD分别为2.6%、2.1%;芒柄花苷加样平均回收率分别为102.39%、100.40%,其RSD分别为2.7%、2.6%;毛蕊异黄酮加样平均回收率分别为102.25%、102.38%,其RSD分别为1.9%、2.7%;芒柄花素加样平均回收率分别为96.39%、100.33%,其RSD分别为1.1%、2.4%;表明二者的回收率符合规定。

2.2 统计方法

3 结果与分析

3.1 8个含量指标间相互影响程度分析

对1~2年生红芪和黄芪中8个含量指标做相关分析,计算相关系数(表2~4)。结果见图2,由图2可知,所有数据当中,4种异黄酮含量总和与毛蕊异黄酮苷的含量相关系数为0.95,即二者呈强正相关性,说明毛蕊异黄酮苷含量高低决定着4种异黄酮含量总和高低;总黄酮含量和芒柄花素含量的相关系数为−0.08,即二者呈弱负相关性,说明芒柄花素含量高低对总黄酮含量高低影响很微小。

3.2 红芪与黄芪2品种8个考核指标的差异比较

对1~2年红芪和黄芪中8个含量指标数据做组间差异比较,结果见表5。

由表5可知,不分年份的红芪和黄芪在8个含量指标中均有显著性差异,说明红芪和黄芪在总黄酮、总皂苷、总多糖含量及4种异黄酮含量总和上2药材存在显著性差异;同时在毛蕊异黄酮苷、芒柄花素苷、毛蕊异黄酮、芒柄花素4种异黄酮成分含量上2药材也存在明显不同。由此含量可见,红芪不适合替代黄芪使用。

3.3 红芪和黄芪2个品种鉴别指标的差异可视化分析

对红芪和黄芪中的8个考核指标做差异可视化分析,可视化图见图3。从直观上来看,变量V4、V6、V7、V8两两交互时,具有较好的区分度,说明毛蕊异黄酮-7--β-葡萄糖苷、毛蕊异黄酮、芒柄花素含量及4种异黄酮总量在红芪和黄芪中存在明显区别,对其进行检测,能较好的区分红芪和黄芪。而芒柄花素苷在红芪和黄芪中差异不明显,说明在指纹图谱中选其做参照物具有合理性。其余变量两两交互时虽然有一定的区分度,但不能把二者区分开。

表2 甘肃1~2年生红芪和黄芪总黄酮、总皂苷、总多糖含量

Table2 Total flavonoids, total saponins, and total polysaccharides content of 1—2 years old Hedysari Radix and Astragali Radix in Gansu

药材编号总黄酮/%总皂苷/%总多糖/% 1年生红芪1年生黄芪2年生红芪2年生黄芪1年生红芪1年生黄芪2年生红芪2年生黄芪1年生红芪1年生黄芪2年生红芪2年生黄芪 10.260.290.790.393.154.618.024.2013.274.766.94 9.95 20.370.280.410.333.604.003.394.5210.657.497.40 8.98 30.460.250.230.463.643.853.484.0813.967.299.40 5.90 40.220.270.250.342.654.242.975.038.635.2310.27 6.23 50.120.300.440.302.774.053.764.8612.768.215.64 7.61 60.180.290.500.282.793.822.315.0411.517.584.29 6.01 70.120.300.530.423.124.813.024.208.588.403.66 6.00 80.100.290.460.492.724.262.495.078.437.565.91 6.30 90.110.380.370.572.665.123.426.279.854.086.50 7.88 100.140.360.390.522.725.483.745.0310.934.086.70 8.20 110.430.540.370.542.805.973.235.7311.504.206.33 7.88 120.300.320.350.523.925.814.414.3714.092.835.78 7.64 130.340.400.370.486.115.414.484.4910.256.085.63 7.63 140.230.430.410.513.684.574.934.5810.143.296.03 9.68 150.380.460.370.613.404.704.125.8114.023.426.70 7.43 160.380.350.350.553.394.523.724.8212.802.666.28 8.35 170.290.330.350.562.574.273.285.1710.862.426.25 7.45 180.270.390.370.562.855.173.564.8610.083.856.57 6.95 190.320.420.490.554.193.924.663.396.211.876.6313.08 200.270.350.380.643.655.524.045.965.881.896.40 9.53 210.320.370.420.384.414.313.734.726.162.304.89 8.14 220.310.360.310.384.094.564.264.478.402.946.15 7.36 230.350.350.310. 503.934.563.514.305.392.475.19 5.39 240.270.330.300.363.673.834.635.676.171.786.48 7.50 250.280.350.380.284.304.094.355.695.341.867.18 8.13 260.280.390.520.454.594.554.784.565.121.275.25 9.50 270.340.360.440.334.144.564.034.975.491.035.41 5.48 280.340.300.420.384.494.234.404.255.401.894.63 6.23 陇西(1~8)平均值0.230.280.450.373.064.213.684.6310.977.066.69 7.12 宕昌(9~18)平均值0.290.400.370.543.415.103.895.1111.453.696.28 7.91 武都(19~28)平均值0.310.360.390.424.154.414.244.805.961.935.82 8.03 全省(1~28)平均值0.280.350.400.453.574.603.954.869.354.026.23 7.73

表3 甘肃1年生红芪和黄芪4种异黄酮类成分含量

Table3 Four kinds of isoflavones content of one year oldHedysari Radix and Astragali Radix in Gansu

药材编号毛蕊异黄酮苷/(μg·g−1)芒柄花素苷/(μg·g−1)毛蕊异黄酮/(μg·g−1)芒柄花素/(μg·g−1)4种异黄酮总量/% 红芪黄芪红芪黄芪红芪黄芪红芪黄芪红芪黄芪 121.89486.06262.59269.136.8953.30111.2937.30402.65845.80 217.13472.96338.81265.795.3942.79115.3128.07476.64809.61 333.19552.34609.31299.6510.4439.26126.4225.31779.35916.56 419.79465.34334.28270.576.2337.6377.9225.48438.22799.02 511.74638.75175.54339.813.7043.1480.2125.45271.201 047.14 610.43520.70300.68290.123.2851.7394.3935.43408.79897.98 711.26460.11175.25292.493.5436.0180.0632.10270.11820.72 810.83371.71125.01215.563.4129.6373.0319.00212.28635.91 910.29672.24133.14346.463.2456.9847.2637.19193.931 112.86 1016.71722.74223.10324.575.2679.8791.9939.15337.061 166.33 1124.001 000.18269.04450.667.55101.34145.0648.17445.661 600.34 1215.17558.67207.04356.834.7856.8085.9742.13312.951 014.43 1321.05865.76172.51398.146.6348.4561.6729.49261.861 341.84 1410.54862.81124.83366.523.3259.7942.6928.65181.371 317.76 1520.901 539.17259.15421.406.5857.78102.7618.24389.392 036.58 1617.65814.93258.03312.115.5569.3280.7926.66362.021 223.02 1714.70508.91209.14301.364.6270.5950.9450.70279.40931.56 1810.29862.22169.61444.923.2426.2950.3811.67233.511 345.09 1924.13537.27242.90219.297.6017.64107.528.63382.15782.84 2015.69591.83229.84268.614.9313.9271.587.00322.05881.36 2120.58541.93314.63219.336.4719.23104.0412.38445.73792.87 2219.65561.78222.78239.826.1814.5097.628.44346.23824.55 2319.99569.84460.00239.136.2912.44174.003.77660.28825.18 2414.70386.80239.19172.454.629.3491.849.15350.35577.74 2517.16510.12271.74234.815.4012.7376.574.79370.86762.45 2610.29584.41213.16257.573.2414.5066.1510.52292.83867.01 2729.71548.10311.54243.579.3515.78104.469.15455.05816.61 2827.46548.63306.77252.628.6415.44105.576.78448.44823.46 陇西等(1~8)平均值17.03496.00290.18280.395.3641.6994.8328.52407.41846.59 宕昌(9~18)平均值16.13840.76202.56372.305.0862.7275.9533.21299.711 308.98 武都(19~28)平均值19.93538.07281.26234.726.2714.5599.938.06407.40795.41 全省(1~28)平均值17.75634.15255.70296.905.5839.5189.9122.89368.94993.45

表4 甘肃2年生红芪和黄芪4种异黄酮类成分含量

Table4 Four kinds of isoflavones content of two years old Hedysari Radix and Astragali Radix in Gansu

药材编号毛蕊异黄酮苷/(μg·g−1)芒柄花素苷/(μg·g−1)毛蕊异黄酮/(μg·g−1)芒柄花素/(μg·g−1)4种异黄酮总量/% 红芪黄芪红芪黄芪红芪黄芪红芪黄芪红芪黄芪 115.38 430.44 547.02 257.01 21.33 16.70 140.88 8.72 724.62 712.86 29.22 422.66 205.46 270.42 12.79 13.66 128.17 4.11 355.64 710.85 38.07 512.45 128.22 367.57 11.19 17.62 27.93 4.44 175.41 902.08 48.08 631.61 120.18 416.97 11.21 14.48 27.11 4.18 166.57 1067.23 56.69 405.14 252.61 230.60 9.56 25.40 25.90 3.23 294.76 664.37 65.35 444.41 317.29 349.99 5.90 4.75 48.52 32.40 377.06 831.55 75.05 508.41 211.20 254.36 7.00 8.31 87.91 2.09 311.16 773.17 84.41 665.66 310.76 365.62 5.66 5.74 43.96 1.93 364.80 1 038.96 94.42 494.76 138.49 275.53 5.68 76.33 176.83 19.69 325.42 866.31 106.06 502.36 139.44 281.81 8.40 72.21 186.09 17.46 339.99 873.84 115.29 407.84 136.95 235.96 7.34 62.13 191.02 14.85 340.60 720.78 124.97 513.14 147.01 279.90 6.89 82.45 186.18 14.98 345.04 890.46 136.79 446.77 173.92 271.32 9.42 50.08 215.09 13.90 405.22 782.07 144.57 499.12 141.80 293.34 5.43 60.59 192.30 18.02 344.10 871.07 154.60 488.22 140.25 298.28 5.62 6.48 192.32 1.52 342.79 794.50 164.45 400.10 154.43 261.32 6.17 5.22 178.54 1.78 343.59 668.43 174.12 446.71 129.46 254.01 5.72 61.45 177.71 2.76 317.01 764.93 183.97 438.19 144.11 251.66 5.51 66.55 199.72 14.95 353.31 771.35 1917.06 416.46 363.75 232.26 23.65 80.80 117.30 20.32 521.75 749.84 206.87 479.88 247.46 251.83 9.52 88.10 78.25 28.80 342.09 848.61 212.38 336.46 304.03 316.51 3.52 35.91 84.55 14.00 394.48 702.88 228.56 433.45 250.62 254.21 11.87 20.89 69.64 2.79 340.69 711.35 233.82 533.70 143.49 291.94 5.30 25.95 53.31 5.69 205.93 857.28 243.14 529.91 211.55 437.03 4.35 10.82 46.08 1.45 265.13 979.21 258.44 500.09 236.79 472.50 11.69 10.50 98.63 1.66 355.56 984.74 2611.61 364.86 256.31 219.65 16.09 5.45 114.11 1.54 398.12 591.49 2716.42 230.36 326.02 250.15 22.77 7.78 161.93 3.30 527.14 491.59 2810.43 486.25 392.10 352.22 14.47 6.85 85.06 1.10 502.06 846.41 陇西等(1~8)平均值7.78 502.60 261.59 314.07 10.58 13.33 66.30 7.64 346.25 837.63 宕昌(9~18)平均值4.93 463.72 144.59 270.31 6.62 54.35 189.58 11.99 345.71 800.37 武都(19~28)平均值8.87 431.14 273.21 307.83 12.32 29.31 90.89 8.06 385.29 776.34 全省(1~28)平均值7.15 463.19 223.95 296.21 9.79 33.69 119.11 9.34 360.00 802.44

V1-总黄酮 V2-总皂苷 V3-总多糖 V4-毛蕊异黄酮苷 V5-芒柄花素苷 V6-毛蕊异黄酮 V7-芒柄花素 V8-4种异黄酮总量,下图同

表5 不区分年份的红芪与黄芪差异比较

Table5 Differences comparison between different years of Hedysari Radix and Astragali Radix

成分总样本(n = 112)红芪(n = 56)黄芪(n = 56)P值 总黄酮/%0.37±0.110.34±0.120.40±0.100.004 总皂苷/%4.25±0.943.76±0.944.73±0.64<0.001 总多糖/%6.83±2.927.79±2.805.88±2.73<0.001 毛蕊异黄酮苷/(μg·g−1)131.60 [10.47, 508.25]10.45 [5.88, 17.12]508.50 [446.25, 564.00]<0.001 芒柄花素苷/(μg·g−1)257.50 [218.25, 312.00]226.50 [152.25, 301.75]273.50 [252.00, 341.50]<0.001 毛蕊异黄酮/(μg·g−1)10.65 [5.73, 27.12]6.21 [5.18, 9.37]27.95 [13.85, 58.30]<0.001 芒柄花素/(μg·g−1)40.65 [13.53, 92.60]93.20 [71.10, 131.25]13.15 [4.16, 25.80]<0.001 4种异黄酮总量/%613.50 [345.75, 835.50]345.50 [307.00, 403.50]839.00 [769.50, 943.75]<0.001

取置信水平为0.01,则表中值小于0.01可以认为有显著差异

The confidence level is 0.01,< 0.01 can be considered as a significant difference in the table

图4 红芪和黄芪8个指标可视化分析

3.4 聚类及主成分分析[21-22]

3.4.1 聚类分析 采用最常用的系统聚类法,最终将其聚成2类。用离差平方和法(Ward法)定义类与类之间的距离,并用欧式距离进行计算。以总黄酮、总皂苷、总多糖、毛蕊异黄酮苷、芒柄花素苷、毛蕊异黄酮、芒柄花素、4种异黄酮总量、产地、种类、采收时间、维度、经度、海拔高度作为统计变量,对1~2生红芪和黄芪做聚类分析,结果见图4。1年生红芪和1年生黄芪、2年生红芪和2年生黄芪、不区分年限的红芪和黄芪在聚类分析时均聚为2类,说明红芪和黄芪具有不同的特征,二者品质不同。

3.4.2 主成分分析 主成分分析是一种降维方法,将个变量进行主成分分析,最终提取(<)个主成分,每个变量对每个主成分都有贡献度。

以总黄酮、总皂苷、总多糖及4种异黄酮总量作为统计变量,不区分年份对红芪和黄芪进行主成分分析。取前4个主成分,对方差的累积贡献率达到90.12%。各变量对主成分的贡献大小见表6,主成分得分(PC)及排名见表7、8。

编号R1-1~R1-28为1年生红芪、Y1-1~Y1-28为1年生黄芪;R2-1~R2-28为2年生红芪、Y2-1~Y2-28为2年生黄芪

表6 各主成分载荷及对方差的累积贡献率

Table6 Cumulative loading and variance contribution rate of main components

主要成分主成分1主成分2主成分3主成分4 总黄酮−0.471−0.572−0.5580.374 总皂苷−0.577−0.1890.160−0.778 总多糖0.381−0.7840.489 4种异黄酮总量−0.5480.1450.6510.505 累积贡献率/%0.5370.7620.9011.000

从表7、8对比分析红芪和黄芪2种药材在品种、年限、地区优势,得出以下结论:品种优势:1~2生黄芪排名在红芪之前(1个样品例外),说明黄芪质量优于红芪。年限优势:2年生红芪和黄芪相对于1年生红芪和黄芪,排名均靠前,说明2年生红芪和黄芪分别优于1年生红芪和黄芪,即2年生药材更佳。地区优势:1~2生红芪均为武都排名在前,1~2生黄芪均为宕昌排名在前,说明在甘肃省内武都产红芪质量优良,宕昌县黄芪质量优良。

4 讨论

本研究的特色之处在于,所选用的红芪和黄芪药材均为道地产区甘肃生产,具有代表性。在甘肃不同产地同一生态条件下,同时种植红芪和黄芪,能最大程度降低生态地域因素对2种药材主要活性成分含量影响的差异,具有可比性。

本课题组前期对甘肃1~2生红芪和黄芪中总黄酮、总皂苷、总多糖、毛蕊异黄酮、毛蕊异黄酮苷、芒柄花素、芒柄花素苷进行含量测定。研究结果表明,总黄酮、总皂苷量上,红芪以武都产2年生药材含量为最高,黄芪以宕昌产2年生药材含量为最高。且同一生长年限相比,红芪药材总黄酮总皂苷含量均低于黄芪[15-18]。二者相比,黄芪在总黄酮总皂苷含量上更具有优势。总多糖含量上,红芪以宕昌产1年生药材含量最高,黄芪以武都产2年生药材含量最高[19]。且红芪1年生药材总多糖含量高于黄芪2年生药材。二者相比,红芪1年生药材比黄芪1~2生药材更有优势。4种异黄酮含量上,从4种异黄酮总量来看,红芪1年生药材和2年生药材相差不大,且以武都产药材总多糖含量为最高[20]。黄芪以宕昌产1年生药材含量最高。同一年限相比,红芪中毛蕊异黄酮苷的含量低于黄芪,芒柄花素的含量高于黄芪。红芪与黄芪在不同种类异黄酮含量对比中,各有优势,有显著差异。

表7 不区分年份的红芪和黄芪主成分排名

Table7 Rank between diferent years of Hedysari Radix and Astragali Radix

编号PC排名地区品种编号PC排名地区品种 R2-1−3.4031礼县红芪Y1-70.03857陇西县黄芪 Y1-11−2.0842宕昌县黄芪Y1-10.04058岷县黄芪 Y2-20−1.9133武都黄芪R2-210.05659武都红芪 Y2-9−1.7844宕昌县黄芪R2-250.09060武都红芪 Y2-15−1.7695宕昌县黄芪R1-280.10761武都红芪 Y1-15−1.5116宕昌县黄芪Y2-50.11062陇西县黄芪 Y2-11−1.3547宕昌县黄芪Y2-20.11863岷县黄芪 Y2-17−1.2578宕昌县黄芪R1-230.16564武都红芪 Y2-18−1.1849宕昌县黄芪R2-120.17565宕昌县红芪 Y2-8−1.12710陇西县黄芪Y1-240.18266武都黄芪 Y2-10−1.04711宕昌县黄芪R2-200.18667武都红芪 Y1-13−1.03012宕昌县黄芪Y1-50.19568陇西县黄芪 Y2-16−1.01413宕昌县黄芪R2-150.21169宕昌县红芪 Y1-18−0.97514宕昌县黄芪R2-60.23570陇西县红芪 Y1-14−0.91615宕昌县黄芪R1-270.23971武都红芪 Y2-12−0.84116宕昌县黄芪R1-210.24972武都红芪 Y1-10−0.82317宕昌县黄芪R2-100.28073宕昌县红芪 Y2-14−0.81018宕昌县黄芪Y1-40.30674渭源县黄芪 R2-26−0.79119武都红芪R2-20.31675礼县红芪 Y1-9−0.76520宕昌县黄芪R2-240.35076武都红芪 Y2-23−0.76421武都黄芪R1-190.37377武都红芪 Y1-12−0.73122宕昌县黄芪R1-260.39078武都红芪 Y1-20−0.71623武都黄芪Y1-80.39179陇西县黄芪 Y2-24−0.66624武都黄芪Y1-60.39280陇西县黄芪 R2-19−0.66525武都红芪R2-80.42081陇西县红芪 Y2-13−0.64626宕昌县黄芪R2-180.42482宕昌县红芪 Y1-26−0.53627武都黄芪R2-220.43083武都红芪 Y1-16−0.51828宕昌县黄芪Y1-20.43284岷县黄芪 Y2-3−0.51829定西市黄芪R2-160.43785宕昌县红芪 Y2-4−0.41730渭源县黄芪R2-90.47086宕昌县红芪 Y1-27−0.39431武都黄芪R1-20.47987礼县红芪 Y1-19−0.37332武都黄芪R1-250.48188武都红芪 Y2-26−0.36633武都黄芪R2-110.54789宕昌县红芪 Y1-22−0.33834武都黄芪R1-220.57290武都红芪 Y2-7−0.32135陇西县黄芪Y1-30.57691岷县黄芪 Y2-25−0.32036武都黄芪R1-110.59392宕昌县红芪 Y2-19−0.31837武都黄芪R2-170.61593宕昌县红芪 Y1-23−0.31038武都黄芪R1-160.67494宕昌县红芪 R2-14−0.29939宕昌县红芪R1-150.68195宕昌县红芪 R1-13−0.27540宕昌县红芪R2-230.72996武都红芪 R2-28−0.27341武都红芪R1-240.81997武都红芪 Y1-21−0.27242武都黄芪R1-200.82398武都红芪 R2-27−0.22643武都红芪R1-120.87999宕昌县红芪 Y2-21−0.21744武都黄芪R1-141.224100宕昌县红芪 Y2-28−0.19345武都黄芪R1-11.285101礼县红芪 R2-7−0.17446陇西县红芪R2-31.301102岷县红芪 Y1-17−0.15147宕昌县黄芪R1-181.336103宕昌县红芪 Y2-22−0.14848武都黄芪R1-171.354104宕昌县红芪 Y1-25−0.10349武都黄芪R2-41.456105渭源县红芪 Y2-27−0.05850武都黄芪R1-41.503106渭源县红芪 Y2-6−0.02551陇西县黄芪R1-61.751107陇西县红芪 R2-13−0.01852宕昌县红芪R1-71.864108陇西县红芪 R1-3−0.00353岷县红芪R1-101.947109宕昌县红芪 Y2-10.00754岷县黄芪R1-82.107110陇西县红芪 R2-50.02455陇西县红芪R1-52.144111陇西县红芪 Y1-280.02556武都黄芪R1-92.147112宕昌县红芪

R1-1~R1-28-红芪1年生1~28号样品 R2-1~R2-28-红芪2年生1~28号样品 Y1-1~Y1-28-黄芪1年生1~28号样品 Y2-1~Y2-18-黄芪2年生1~28号样品

R1-1—R1-28: 1—28 samples of one-year-old; R2-1—R2-28: 1—28 samples of two-year-old; Y1-1—Y1-28: 1—28 samples of one-year-old; Y2-1—Y2-18: 1—28 samples of two-year-old

表8 1~2年红芪、黄芪主成分排序对比结果

Table8 Principal component analysis sort of 1—2 years old Hedysari Radix and Astragali Radix

红芪1年生样品排序地区黄芪1年生样品排序地区红芪2年生样品排序号地区黄芪2年生样品排序地区 40宕昌2宕昌1*礼县3*武都 53岷县6宕昌19武都4宕昌 61武都12宕昌25武都5宕昌 64武都14宕昌39宕昌7宕昌 71武都15宕昌41武都8宕昌 72武都17宕昌43武都9宕昌 77武都20宕昌46陇西10陇西 78武都22宕昌52宕昌11宕昌 87礼县23武都55陇西13宕昌 88武都27武都59武都16宕昌 90武都28宕昌60武都18宕昌 92宕昌31武都65宕昌21武都 94宕昌32武都67武都24武都 95宕昌34武都69宕昌26宕昌 97武都38武都70陇西29定西 98武都42武都73宕昌30渭源 99宕昌47宕昌75礼县33武都 100宕昌49武都76武都35陇西 101礼县56武都81陇西36武都 103宕昌57陇西82宕昌37武都 104宕昌58岷县83武都44武都 106渭源66武都85宕昌45武都 107陇西68陇西86宕昌48武都 108陇西74渭源89宕昌50武都 109宕昌79陇西93宕昌51陇西 110陇西80陇西96武都54岷县 111陇西84岷县102岷县62陇西 112宕昌91岷县105渭源63岷县

*表示红芪排序号在黄芪之前的样品

*indicates the sample ofin front of

综合含量数据差异结果可知,红芪和黄芪具有明显差别,除了总多糖含量提示红芪比黄芪更具有优势,且红芪以宕昌产最优,黄芪以武都产最优,芒柄花素含量提示红芪比黄芪更具有优势外,其余含量数据均提示,黄芪比红芪更有优势,且红芪以武都产最优,黄芪以宕昌产最优。因此,从药材主要活性成分含量数据直观分析,区分红芪和黄芪孰优孰劣尚存在差异。该差异结果在综合统计分析中达到统一:从统计结果可知,红芪和黄芪在总黄酮、总皂苷、总多糖、毛蕊异黄酮苷、芒柄花素苷、毛蕊异黄酮、芒柄花素含量及4种异黄酮含量总和分别对比时,均存在显著性差异,8个变量可视化分析提示,通过对比红芪和黄芪毛蕊异黄酮苷、毛蕊异黄酮、芒柄花素含量及4种异黄酮含量总和,可以区分红芪和黄芪。

聚类分析、主成分分析将红芪和黄芪以含量指标及影响质量的因素(包括品种、产地、生长年限、海拔高度、经纬度等)考虑在内进行的综合分析,其结果体现红芪和黄芪综合品质情况。聚类结果表明同一生长年限、不同生长年限以及不区分生长年限的红芪和黄芪均可以聚成2大类,二者完全分开,说明红芪、黄芪2种药材品质不同。主成分分析表明,黄芪质量优于红芪,且总体上红芪、黄芪均体现2年生优于1年生样品。并且,宕昌产黄芪质量较优,武都产红芪质量较优。

综合含量数据统计分析结果可知,黄芪比红芪更具有优势,且红芪以武都产为最优,黄芪以宕昌产为最优。

[1] 中国药典[S]. 一部. 2020: 159, 315.

[2] 余黎, 曹宜, 魏筱, 等. 黄芪与红芪不同提取液免疫调节作用研究 [J]. 安徽农业科学, 2010, 38(36): 20623.

[3] 李震宇, 崔伊凡, 秦雪梅. 中药材质量评价的挑战与代谢组学应用于中药材质量评价的研究进展 [J]. 中草药, 2018, 49(10): 2221-2229.

[4] 田宝林, 孙宝惠, 耿韫. 柏子养心丸中非正品黄芪的检出 [J]. 中国药品标准, 2005. 6(1): 43.

[5] 程卫东, 李顺保. 红芪研究与开发 [M]. 甘肃: 甘肃文化出版社, 2012: 124.

[6] 冯慧敏, 李成义, 何军刚, 等. 红芪化学成分和药理作用研究进展及质量标志物(Q-Marker)的预测分析 [J]. 中草药, 2021, 52(9): 2831-2842.

[7] 王艺, 张毅, 李娟, 等. 红芪多糖、红芪黄酮和红芪皂苷抗博来霉素致大鼠肺间质纤维化的作用 [J]. 中成药, 2022, 44(2): 573-578.

[8] Zhang W D, Chen H, Zhang C,. Astragaloside IV fromcardioprotection during myocardial ischemiaand[J]., 2006, 72(1): 4-8.

[9] Zhang Y, Zhu H, Huang C,. Astragaloside IV exerts antiviral effects against coxsackievirus B3 by upregulating interferou-gamma [J]., 2006, 47(2): 190-195.

[10] Zhang Z G, Wu L, Wang J L,. Astragaloside IV prevents MPP (+)-induced SH-SY5Y cell death via the inhibition of Baxmediated pathways and ROS production [J]., 2012, 364(1/2): 209-216.

[11] 刘路, 李凯, 胡阳, 等. 黄芪有效成分抗骨质疏松症作用机制的研究进展[J]. 中草药, 2023, 54(4): 1321-1328.

[12] 蔺兴遥, 张毅, 李娟, 等. 黄芪黄酮与红芪黄酮对肺间质纤维化模型大鼠肺功能影响的对比研究 [J]. 中成药, 2013, 35(8): 1770-1773.

[13] 刘印华, 赵志强, 李树义, 等. 黄芪多糖对免疫功能影响的体内实验研究 [J]. 河北医药, 2015, 37(4): 485-487.

[14] 牛江涛, 曹瑞, 张泽国, 等. 红芪多糖的提取分离及药理作用研究进展 [J]. 中国药房, 2017, 28(1): 130-133.

[15] 叶迎, 包强, 王瑞海, 等. 甘肃黄芪和红芪总黄酮含量对比测定方法探索研究 [J]. 中国中医药信息杂志, 2016(9): 99-105.

[16] 包强, 刘丽梅, 王瑞海, 等. 甘肃不同产地黄芪和红芪药材中总黄酮含量对比研究 [J]. 中药材, 2016, (10): 2281-2284.

[17] 叶迎, 包强, 王瑞海, 等. 甘肃黄芪和红芪中总皂苷含量测定对比研究 [J]. 环球中医药, 2016(10): 1197-1203.

[18] 叶迎, 包强, 王瑞海, 等. 甘肃红芪中黄芪甲苷存在的判定以及一年生、二年生红芪、黄芪皂苷和总黄酮含量对比[J]. 中国实验方剂学杂志, 2018, 24(14): 69-75.

[19] 王瑞海, 叶迎, 许京, 等. 甘肃红芪和黄芪总多糖含量测定对比研究 [J]. 中国实验方剂学, 2017, 22(23): 77-83.

[20] 叶迎, 王瑞海, 包强, 等. 甘肃不同产地及不同生长年限的红芪和黄芪中4种异黄酮类成分的含量对比 [J]. 中国实验方剂学杂志, 2018, 24(8): 1-7.

[21] 柳小亚, 李继平, 陈心悦, 等. HPLC同时测定红芪中8个活性成分的含量及聚类分析 [J]. 药学学报, 2016, 51(5): 786-791.

[22] 张淑娟. 基于中药质量标志物的炙黄芪和炙红芪质量控制研究[D]. 兰州: 甘肃中医药大学, 2021.

Comparative study on statistical differences of saponins, polysaccharides and flavonoids contents of Gansu 1—2 years oldand

YE Ying1, WANG Rui-hai1, MIAO Qing1, XU Jing1, WU Dong-yuan2, LIU Li-mei1

1. Institute of Basic Theory Research of TCM, China Academy of Chinese Medical Sciences, Beijing 100700, China 2. College of Science, Minzu University of China, Beijing 100081, China

To analyze the contents of total saponins, total polysaccharides and flavonoids of 1—2 years old Hongqi (,) and Huangqi (,var.or) from different areas in Gansu Province, and explore the differences betweenand.Using R3.3.2 software, and eight content including total saponins, total flavonoids, total polysaccharides, calycosin-7-glucoside, calycosin, ononin, formononetin, sum of four isoflavones were selected as indicators, and six factors affecting the quality of including origin, varieties, harvest time, latitude, longitude, altitude were selected as variable. Based on the correlation analysis, cluster analysis and principal component analysis (PCA), the difference of quality between 1—2years oldandwas compared.The results of cluster analysis showed thatandwere clustered into two categories, with a big difference of the quality between them. The results of PCA showed that the quality ofwas better than that of. In general, the quality of two-year-oldandwere better than one year old. And the quality ofin Dangchang was better, and the quality ofin Wudu was superior.There is a significant difference in the quality ofandin Gansu, and it is not suitable for alternative use from the perpective of quality analysis.

;; calycosin-7-glucoside; calycosin; ononin; formononetin; cluster analysis

R286.12

A

0253 - 2670(2023)14 - 4649 - 13

10.7501/j.issn.0253-2670.2023.14.026

2022-11-03

叶迎,硕士研究生,研究方向为中药制剂分析。E-mail: 1011153962@qq.com

刘丽梅(1965—),研究员,从事中药药效物质基础研究。Tel: (010)64089006 E-mail: liulimeihrb@sina.com

[责任编辑 时圣明]

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