盐酸文拉法辛缓释胶囊的制备及释放度研究

苗国力,郭洪涛,刘文玲,崔芹芹

(1.鲁南贝特制药有限公司,山东 临沂 276006;2.国家手性制药工程技术研究中心,山东 临沂 276000;3.山东省手性制药技术创新中心,山东 临沂 276000;4.药物新制剂研发山东省工程研究中心,山东 临沂 276006)

盐酸文拉法辛(Venlafaxine Hydrochloride)是第三代抗抑郁药,被用于治疗各种类型强迫症、抑郁症、社交恐惧症、精神分裂症、创后应激障碍等疾病,疗效快、耐受剂量大、ADR少,尤其对重性抑郁症患者有更好的治疗优势。

盐酸文拉法辛缓释胶囊最早由Wyeth Pharmaceuticals LLC研发,1997年10月获批准上市,商品名为“怡诺思”(Efexor XL),是第一个上市的5-羟色胺-去甲肾上腺素再摄取抑制剂,给药剂量1次/d,能更快地改善症状,得到广泛临床认可。怡诺思是通过包封在外部胶囊内的球状微珠实现其缓释特性。微珠由施加有活性药物的糖球以及作为速率控制聚合物的乙基纤维素和作为增塑剂的邻苯二甲酸二乙酯组成。2010年6月,美国FDA 批准盐酸文拉法辛缓释胶囊(Efexor XR)的首个仿制药用于严重抑郁症治疗[1-4]。

由于盐酸文拉法辛在生物体内半衰期较短,普通口服制剂需3次/d服用,用药频繁,影响了患者用药的顺应性,而其缓释胶囊仅需1次/d服药,能够显著提高患者用药的顺应性。由于原研参比制剂的工艺复杂、专利保护等原因,价格昂贵,因此仿制开发盐酸文拉法辛缓释胶囊将具有很好的经济效益和市场前景。本研究以国家局公布的第六十批参比制剂目录中的盐酸文拉法辛缓释胶囊作为参比制剂进行仿制研究开发[5]。

1 材料

1.1 仪器

Agilent1260型高效液相色谱系统、7890B/7890A型气相色谱仪、7697A型顶空(美国安捷伦科技公司);RC806 型溶出仪(天津天大天发科技有限公司);Mini-CG型湿法混合快速制粒机(创志科技(江苏)股份有限公司);LTAES50-380C型多功能制丸包衣机(深圳市信宜特科技有限公司);LBL-3实验型流化床制粒包衣机(重庆科旭制药机械设备制造有限公司)。

1.2 药品与试剂

盐酸文拉法辛原料药(常州四药制药有限公司);盐酸文拉法辛对照品(中国食品药品检定研究院);盐酸文拉法辛缓释胶囊(商品名:怡诺思,Pfizer Healthcare Ireland);乳糖(一水合物,Friesland Campina DMV B.V);低取代羟丙纤维素(型号:LH-21,信越化学工业株式会社);微晶纤维素(型号:101,JRS常州有限公司);玉米淀粉(曲阜市天利药用辅料有限公司);羟丙甲基纤维素(型号:E5,湖州展望药业有限公司);乙基纤维素(型号:10CP,Nutrition &Biosciences USA 1,LLC);枸橼酸三乙酯(蚌埠丰源涂山制药有限公司);二氧化硅(湖州展望药业有限公司);乙醇(安徽安特食品股份有限公司);明胶空心胶囊(青岛益青生物科技股份有限公司);甲醇、二甲基亚砜[赛默飞世尔科技(中国)有限公司];乙腈、四氢呋喃、乙酸铵、25%氨水、乙酸乙酯、甲苯均由国药集团化学试剂有限公司提供;水为纯化水,其余试剂均为分析纯。

2 方法与结果

2.1 盐酸文拉法辛含量的测定

2.1.1 色谱条件

用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂(Waters XTerra RP18,4.6 mm×150 mm,5 μm或效能相当的色谱柱);以甲醇-乙酸铵溶液(乙酸铵2.0 g,加350 mL水使溶解,加甲醇650 mL,用25%氨水调节pH值至8.9)为流动相;流速为1.0 mL/min;柱温30 ℃;检测波长226 nm;进样体积10 μL。该色谱条件下,空白辅料不干扰盐酸文拉法辛的测定,分离良好。空白辅料溶液、对照品溶液和供试品溶液的色谱图见图1。

2.1.2 方法学考察

对照品溶液中文拉法辛峰拖尾因子1.08,理论塔板数按文拉法辛峰计算为7 067。在70%～130%浓度范围内,至少配制5份浓度不同的供试液,以测得的响应信号(峰面积)对被分析物的浓度函数作图,最小二乘法进行线性回归,要求线性回归系数r的数值不得小于0.998。以浓度C为横坐标,以峰面积为纵坐标,线性回归方程为A=74.444C-539.39,回归系数r=0.999 3。盐酸文拉法辛在142.0～263.7 μg/mL(相当于供试品溶液浓度的71.0%～131.9%)范围内线性关系良好。方法重复性RSD=0.22%(n=6);中间精密度RSD=0.22%(n=12);准确度回收率为99.9%(RSD=0.37%,n=9)。

2.2 盐酸文拉法辛缓释胶囊的制备

2.2.1 含药微丸的制备

将盐酸文拉法辛、乳糖、微晶纤维素、低取代羟丙纤维素加入Mini-CG型湿法混合快速制粒机中,混合均匀,混合参数:搅拌速度200 r/min,剪切速度500 r/min,时间15 min。再加入适量的纯化水制作软材,制作软材的参数:搅拌速度400 r/min,剪切速度1 200 r/min,时间3 min。将制得的软材用LTAES50-380C型多功能制丸包衣机挤出滚圆,挤出参数:筛板孔径0.8 mm,挤出转速40～50 r/min,实时水温25～30 ℃,挤出速度:约80 g/min;滚圆参数:转速800 r/min,时间5 min,滚圆开始后流加处方量的玉米淀粉。出料,将制得含药微丸转移至LBL-3流化床制粒包衣机中干燥,干燥参数:进风温度60 ℃,风机频率20～30 Hz,待物料温度达55 ℃以上时出料[6-8]。

2.2.2 隔离层包衣

用纯化水制备含5%羟丙甲纤维素、3%乳糖的包衣溶液,将含药微丸进行底喷包衣,包衣参数:风机频率18～20 Hz,雾化压力0.3 MPa,供液频率15～25 Hz,物料温度控制在37～43 ℃,包衣增重4%～6%。包衣结束后进行干燥。

2.2.3 缓释层包衣

制备5%乙基纤维素、0.5%枸橼酸三乙酯的90%乙醇水溶液作为包衣溶液,将隔离层微丸进行底喷包衣,包衣参数:风机频率18～22 Hz,雾化压力0.25 MPa,供液频率15～20 Hz,物料温度控制在27～33 ℃,包衣增重8%～10%。包衣结束后进行干燥。对同一个批次的包衣微丸,进行不同包衣增重摸索,结果显示溶出结果无明显差异。

2.2.4 微丸筛分情况

将制备的微丸进行筛分,筛分情况见表1。

表1 微丸筛分情况

由表1可以看出,制备出的微丸粒度分布主要集中在0.425～0.850 mm(20～40目),粒径越大的微丸含量会越高,但均符合要求。

2.2.5 胶囊充填

将制得的盐酸文拉法辛缓释微丸过1.700 mm(12目)、0.850 mm(20目)筛进行筛分,取0.850～1.700 mm(12～20目)的微丸加入适量二氧化硅,混合后进行胶囊充填。微丸筛分情况见表2。

表2 微丸筛分情况

由表2可知,制备的胶囊微丸粒数、堆密度、粒径均与参比制剂基本一致,在各项目上无明显差异。

2.3 释放度测定方法

参照美国FDA溶出度数据库公布的盐酸文拉法辛缓释胶囊释放度测定方法进行体外释放试验。采用篮法,释放的标准介质为水,转速为100 r/min,体积为900 mL,温度为(37±0.5) ℃。分别在2,4,6,8,12,16,24 h取样5 mL(取样的同时补加等温的释放介质5 mL),过0.45 μm微孔滤膜过滤,采用HPLC(高效液相色谱法)测定盐酸文拉法辛的含量,计算累积释放度。溶出的限度标准为:2 h溶出度≤30%,4 h溶出度在30%～55%范围内,8 h溶出度在55%～80%范围内,12 h溶出度在65%～90%范围内,24 h溶出度≥80%。

2.4 剂量倾泻下溶出曲线

配制含有不同浓度乙醇的标准介质,检测自制制剂和参比制剂的剂量倾泻,并进行比较,详情见表3[9-10]。

表3 自制制剂与原研制剂在不同乙醇浓度标准介质中的剂量倾泻比较

由表3可见,在纯化水(含5%乙醇)、纯化水(含40%乙醇)中,自制盐酸文拉法辛缓释胶囊与参比制剂的溶出行为基本一致,在纯化水(含20%乙醇)中,自制制剂溶出较参比制剂慢。整体来看,自制制剂对乙醇的耐受性比参比制剂略好。

2.5 与参比制剂的体外释放度比较

参照《普通口服固体制剂溶出度试验技术指导原则》[11]规定,需对盐酸文拉法辛缓释胶囊进行多介质释放度对比研究,以评价自制的盐酸文拉法辛缓释胶囊与参比制剂的差异。采用“2.3”项下的体外释放度测定方法,分别考察4种释放介质(0.1 mol/L盐酸溶液、pH值4.5醋酸盐缓冲液、pH值6.8磷酸盐缓冲液、水)中自制盐酸文拉法辛缓释胶囊与参比制剂(怡诺思)的溶出曲线,采用f2相似因子法[12-13]比较相似性。自制制剂与参比制剂在不同介质中的溶出曲线相似性比较见表4。

表4 自制制剂与原研制剂在不同介质中的溶出曲线相似性比较

由表4可知,在4种溶出介质中,自制盐酸文拉法辛缓释胶囊与参比制剂的f2因子均大于50,说明自制制剂与参比制剂在4种溶出介质中药物释放行为相似,见图2。

2.6 残留溶剂检测方法

用顶空气相色谱法对盐酸文拉法辛缓释胶囊里面的残留溶剂进行方法学验证,验证详情见表5[14-15]。

表5 残留溶剂检测方法学验证

3 讨论

用挤出滚圆法制备盐酸文拉法辛的含药微丸,微丸具有外观表面光滑平整、圆整度好、大小均匀、不易破碎、挤出孔板决定微丸的大小等优点。通过对产品有关物质和残留溶剂进行方法学验证,保证了检测本品质量标准的可行性;又通过对本品与参比制剂的释放度和乙醇剂量倾泻的对比研究,结果表明制备的盐酸文拉法辛缓释胶囊与参比制剂体外释放行为一致,可应用于商业化生产。