GP 1200 干式荧光免疫定量分析仪检测PCT、SAA 及IL-6 项目性能评价

刘爱玲，刘爱胜，凌秀婷，钟伟传

目前，急诊危重患者越来越多，病情复杂且变化快，临床诊断对检验结果的依赖性不断增强，造成检验工作量大大增加，并对检验质量和效率提出更高要求，给检验工作带来很大压力。 为了更好地满足临床需要及为患者提供更高、更有效率的服务，深圳市龙华区人民医院急诊检验科购买了一台高效检测的基蛋生物干式荧光免疫定量分析仪 （Getein 1200，GP 1200）。 根据国际标准化组织（International Organization for Standardization，ISO）15189 CNAS-CL02：2012《医学实验室质基和能力认可准则》[1]， 对新购置的仪器实验室必须对其方法学分析性能予以验证，并对厂家提供的主要性能评价数据予以确认。 因此，笔者研究参照美国临床和实验室标准化协会文件（Clinical and Laboratory Standards Institute，CLSI）、ISO 15189《医学实验室质量和能力的专用要求》 及ISO 17025相关文件[2～4]，并以参与室间质评的DXI 800 全自动化学发光免疫分析系统为参照，对GP 1200 检测血清降钙素原（procalcitonin，PCT）、淀粉样蛋白A（serum amyloid A protein，SAA）及白细胞介素6（interleukin-6，IL-6）项目的精密度、正确度、携带污染率、灵敏度、线性及相关性等性能进行了评价。

1 材料与方法

1.1 实验材料

1.1.1 评价标本

采用GP 1200 分析仪（基蛋生物，中国）配套使用的精密度参考品、准确度参考品及不同浓度线性参考品。同时随机收集80 份临床标本，分离血清用于对比分析。

1.1.2 主要仪器与试剂

GP 1200、校准品及质控品（基蛋生物科技股份有限公司， 中国）；DXI 800 分析仪、 校准品及质控品（Bankman 公司，美国）；PCT、SAA 及IL-6 试剂盒（基蛋生物，中国）。

1.2 方法

1.2.1 质控准备

分析前做好仪器维护及校准，分析期间做好室内质控，所有操作均严格按照仪器和试剂说明书及科室标准操作规程 （Standard Operating Procelure，SOP）操作规程进行。以DXI 800 全自动化学发光免疫分析系统为参照，对GP 1200 分析仪检测项目进行评价。

1.2.2 检测项目

1.2.2.1 精密度 取GP 1200 配套用的精密度参考品反复测定8 次，计算平均值（average value，AV）、标准差（standard deviation，SD）及批内变异系数（coefficient of variation，CV）。

1.2.2.2 正确度 取低、高GP 1200 配套的正确度参考品各1 份，每份测定2 次，分别计算AV 及相对偏倚（Bias）。 计算公式：Bias（%）=（测定值AV-靶值）/靶值×100%。

1.2.2.3 线性 取4 种不同浓度线性参考品各1 份，每份检测2 次，计算AV 及其与理论值进行相关系数（R2）及回归方程分析。

1.2.2.4 携带污染率 取1 份高浓度标本连续测定3次（H1、H2、H3），再取1 份低浓度标本连续测定3 次（L1、L2、L3）。 计算公式：携带污染率（%）=（L1-L3）/（H3-L3）×100%。

1.2.2.5 灵敏度 分别取PCT、SAA 及IL-6 试剂盒中的空白液连续测定10 次， 计算AV 和SD， 并以2SD 作为相应检测项目的灵敏度。

1.2.2.6 相关性 分别采用GP 1200 和DXI 800 对80 份临床标本进行PCT、SAA 及IL-6 项目对比检测，计算两者结果的一致性。

1.2.3 判断标准

精密度判断标准：CV ≤10%为验证通过； 正确度判断标准：Bias ＜±20%为可接受；线性判断标准：R2≥0.975 为验证通过。

1.3 统计学方法

采用SPSS 21.0 统计软件对检测结果进行统计分析。 计数资料采用均数±标准差表示；相关性采用Pearman 分析。P＜0.05 为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 精密度评价结果

GP 1200 检测PCT、SAA 及IL-6 水平分别为（2.62±0.14）ng/mL、（54.56 ±4.13）ng/mL、（882.93 ±44.06）pg/mL，其CV 分别为5.29%、7.57%、5.00%。

2.2 正确度评价结果

GP 1200 检测PCT、SAA 及IL-6 项目Bias （低值、 高值） 分别为-0.71%、-4.25%，4.43%、6.29%，10.39%及1.84%。 见表1。

表1 GP 1200 检测PCT、SAA 及IL-6 项目正确度评价结果Tab. 1 Comparison of accuracy evaluation results of PCT， SAA and IL-6 detected by GP 1200

2.3 线性评价结果

GP 1200 检测PCT、SAA 及IL-6 项目R2分别为0.999、0.996 及0.999。 见表2、图1。

图1 PCT、SAA 及IL-6 线性评价检测平均值与理论值相关性Fig.1 Correlation between mean value and theoretical value of linear evaluation and detection of PCT，SAA and IL-6

表2 GP 1200 检测PCT、SAA 及IL-6 项目线性评价结果Tab.2 Comparison of linear evaluation results of PCT，SAA and IL-6 detected by GP 1200

2.4 携带污染率

GP 1200 检测PCT、SAA 及IL-6 项目携带污染率分别为0.089 4%、0.165 8%及0.018 4%。 表明仪器检测PCT、SAA 及IL-6 的污染率很低。 见表3。

表3 GP 1200 检测PCT、SAA 及IL-6 项目携带污染率Tab.3 Comparison of contamination rate of PCT，SAA and IL-6 detected by GP 1200

2.5 灵敏度

GP 1200 检测PCT、SAA 及IL-6 项目灵敏度分别为0.102 ng/mL、0.146 mg/L 及0.315 pg/mL。 说明仪器检测PCT、SAA 及IL-6 的灵敏度高。

2.6 相关性

GP 1200 检测PCT、SAA 及IL-6 的结果与DXI 800 分析仪检测的结果具有良好的相关性，相关系数（r）分别为0.941 8、0.908 6 及0.889 1，仪器间检测结果相关性很好。

3 讨论

PCT、SAA 及IL-6 检测是严重细菌感染/脓毒症早期鉴别诊断最优的观察指标，也可辅助用于临床细菌和病毒感染快速鉴别诊断及细菌感染严重程度的判断，同时对临床抗生素的使用具有指导意义[5～7]。 因此，PCT、SAA 及IL-6 水平快速检测对临床急诊危重患者的诊断、鉴别诊断、病情评估及治疗具有重要的意义。

GP 1200 是一种全自动POCT 分析设备，其采用荧光免疫法，样品中抗原与附着荧光颗粒的相应抗体结合形成荧光标记的抗原抗体免疫复合体，仪器可根据样品区和质控区带上免疫复合体发射荧光强度的不同来检测待测物的相应浓度[8～10]。因其操作简便、快速、灵敏度高及稳定性好，且检测项目多，目前常用于急诊危重疾病的诊疗工作。但不同实验室工作人员操作习惯、水质、室内温度及湿度等因素可能存在很大差异，从而影响仪器的各项性能。因此，实验室必须对新购置的仪器和检测系统性能进行验证，这不仅是检验质量的保证，也是ISO 15189《医学实验室质量和能力认可准则》的基本要求。

有研究表明，精密度、正确度、线性、携带污染、灵敏度及相关性是定量分析仪和系统检测性能评价常用的几个指标[11～14]，其中精密度是反映同一样品反复检测结果之间的吻合程度， 是评价实验随机误差大小，是所有性能评价中的基础。 正确度是反映同一样品多次检测结果的均值与理论值之间的差异性，是评价实验系统误差大小。线性是指分析仪能直接测出待测物（待测物检测前不进行浓缩或稀释预处理）浓度范围，是评价方法学性能的重要指标之一。 携带污染是评价待测物受检测前后标本对其检测结果影响严重程度的指标。灵敏度是评价仪器检测待测物最低浓度的能力。相关性是评价新仪器和系统检测结果与参照仪器结果的一致性， 确保不同仪器和系统检测结果的可比性和准确。 笔者评价结果显示，GP 1200 检测PCT、SAA 及IL-6 的CV 在5.00 % ～7.57 %，低值、 高值正确度参考品PCT、SAA 及IL-6 的Bias 值在-4.25%～10.39%，PCT、SAA 及IL-6 的AV 与理论值线性R2值在0.996 ～0.999，斜率（a）在0.960 5 ～1.100 3，携带污染率极低，在0.018 4%～0.165 8%，检测灵敏度高，且对比相关性好，这表明GP 1200 在急诊检验室的环境下其以上各项评价指标均符合临床质量要求。

综上所述，PG 1200 干式荧光免疫定量分析仪检测PCT、SAA 及IL-6 的性能经初步评价， 其精密度、正确度均在厂家允许范围内，线性好、携带污染率低、灵敏度高及相关性好，且检测速度快，操作简单，体积小，能满足急诊危重患者常规检测及科研需求。