口蹄疫、小反刍兽疫、羊痘三种疫苗不同免疫方案的免疫效果分析研究

李吉鹏,周兴玉,李宇光

(1.金昌市金川区畜牧兽医服务中心,甘肃 金昌 737100;2.金川区双湾镇畜牧兽医站,3.金昌卓荦农牧有限公司)

口蹄疫(FMD)和小反刍兽疫(PPR)是一类动物疫病,羊痘是二类动物疫病,这三种疫病都是发病率高、传播迅速、流行广泛、死亡率高的烈性传染病,严重威胁养殖业安全,一旦发病将造成重大经济损失,甚至威胁人类健康。目前,最有效的预防措施就是注射疫苗,通过人工主动免疫获得抗体保护,提高畜群免疫力,达到疫病防控的目的。三种疫苗按照常规免疫程序,需分时段分别注射,这样就给每年春秋两季的集中免疫工作带来许多困难。一是防疫员工作强度成倍增加;二是集中免疫时间托的过长;三是给免疫羊群带来多次应激反应;四是养殖户配合免疫费时费力,程序繁琐萌生抵触情绪。在保证免疫效果的前提下,为了减小免疫劳动强度,避免对羊只造成反复的应激反应,能否采取同时分点注射口蹄疫、小反刍兽疫、羊痘,将多种疫苗免疫程序精简化值得研究,以验证多种疫苗免疫同时进行的可行性,以减轻基层动物防疫人员的工作量,提高免疫密度和抗体合格率。

1 三种疫苗不同免疫方案

1.1 时间与地点

试验于2022年4月～2022年8月在金昌市金川区双湾镇某羊场(北纬38°63′,东经102°34′)进行。

1.2 试验动物和材料

1.2.1 试验动物及分组 在羊场选择饲养条件相当,健康状况良好,未经过口蹄疫、小反刍兽疫、羊痘疫苗免疫的试验羊100只,每组20只,分成A、B、C、D、E,5个组。A组为对照组,其余四组为试验组。

1.2.2 疫苗选择及接种剂量 口蹄疫O型-A型二价灭活苗,天康生物制药有限公司生产,批号2022003,规格100 mL/瓶,颈部肌肉注射,1 mL/只。山羊痘活疫苗,天康生物制药有限公司生产,批号2021005-1,规格100头份/瓶,每瓶使用50 mL生理盐水稀释,尾部皮内注射,0.5 mL/只。小反刍兽疫活疫苗,天康生物制药有限公司生产,批号2022004-1,规格100头份/瓶,每瓶使用100 mL生理盐水稀释,颈部皮下注射,1 mL/只。

1.3 三种疫苗不同免疫方案试验方法

1.3.1 免疫方案 A组采用“三苗三针三免”,即先颈部肌肉注射羊口蹄疫疫苗,然后依次间隔14 d后分别颈部皮下注射小反刍兽疫和尾部皮内注射羊痘疫苗;B组采用“三苗三针两免a”,即先同时颈部肌肉注射羊口蹄疫疫苗和颈部皮下注射小反刍兽疫疫苗,然后14 d后尾部皮内注射羊痘疫苗;C组采用“三苗三针两免b”,即先同时颈部肌内注射羊口蹄疫疫苗和尾部皮内注射羊痘疫苗,然后14 d后颈部皮下注射小反刍兽疫疫苗;D组采用“三苗三针一免”,即同时经颈部肌肉注射羊口蹄疫,颈部皮下注射小反刍兽疫疫苗,尾部皮内注射羊痘疫苗; E组采用“三苗两针一免”,即将小反刍兽疫和羊痘疫苗分别等量稀释后混合为1针,羊口蹄疫疫苗另作1针,同时经双侧颈部肌肉注射。详见表1。

表1 试验免疫方案

1.3.2 免疫副反应观察 各组试验羊佩戴分组免疫耳标,完成疫苗注射后填写免疫档案。48 h内仔细逐只观察精神状态、食欲、呼吸、体温、可视黏膜、流涎、震颤、呕吐、流产、休克死亡等应激反应情况。

1.3.3 采样方案 每次免疫结束后30 d采集全血样品。用5 mL真空采血管,颈静脉采血3 mL以上,标记羊耳标号,填写采样单。离心析出的血清样品置于无菌试管,按各试验组封装标记,保存在—8°C环境待检。

1.3.4 抗体检测方法 试验检测过程和结果判定严格按照ELISA检测试剂说明操作。详见表2。

表2 疫苗免疫抗体检测试剂盒及判定标准

1.3.5 数据统计与处理 免疫副反应和抗体检测结果按不同试验组及免疫疫苗分类统计,分析5种免疫方案的免疫副反应和抗体检测结果差异。利用Excel软件整理原始数据,对试验数据进行分析。详见表3、表4。

表3 免疫副反应统计表

表4 免疫抗体检测结果统计表 只,%

2 三种疫苗不同免疫方案试验结果与分析

2.1 免疫副反应

由表3可知,5个试验组中,A组无免疫应激反应发生,免疫应激率和免疫应激死亡率均为0;B组、C组、D组发生免疫应激的羊均为1只,都没有发生免疫应激死亡,B组和C组的免疫应激率和免疫应激死亡率相同,分别为2.5%和0;E组发生免疫应激的羊为3只,免疫应激死亡1只,免疫应激率和免疫应激死亡率为5个组中最高的,分别达到15%和5%。由此可知,口蹄疫、小反刍兽疫、羊痘三种疫苗依次间隔14 d后注射几乎不会产生应激反应;口蹄疫和小反刍兽疫疫苗同时分点注射14 d后再注射羊痘疫苗和三种疫苗同时分点注射发生应激反应的概率较低,但不会发生应激反应死亡;小反刍兽疫和羊痘疫苗混合为1针,口蹄疫疫苗另作1针同时注射发生应激反应的概率较高,会导致应激反应死亡。

2.2 免疫抗体合格率

由表4可知,5个试验组中,口蹄疫抗体合格率A组最高达到85%,其次为B组和C组均为80%,其次为B组的75%,E组最低为60%;小反刍兽疫抗体合格率A组最高达到95%,其次为C组达到85%,其次为B组和D组均为80%,E组最低为30%;羊痘抗体合格率A组和B组最高均达到90%,其次为C组和D组均达到85%,E组最低为20%。由此可知,口蹄疫、小反刍兽疫、羊痘三种疫苗依次间隔14 d后注射抗体合格率均为最高;口蹄疫和小反刍兽疫疫苗同时分点注射,14 d后再注射羊痘疫苗和三种疫苗同时分点注射抗体合格率均在国家规定的70%以上;但是小反刍兽疫和羊痘疫苗混合为1针,口蹄疫疫苗另作1针同时注射抗体合格率均在60%以下。

3 三种疫苗不同免疫方案的选择

3.1 三种疫苗组合免疫方案安全性有差异

采用“三苗三针两免a”、“三苗三针两免b”、“三苗三针一免”,较对照“三苗三针三免”方案均有免疫副反应发生,但均无羊只因发生免疫副反应而导致死亡的情况发生。“三苗两针一免”,对照“三苗三针三免”方案免疫副反应发生率和免疫应激死亡率均较高。说明口蹄疫、小反刍兽疫、羊痘疫苗三种疫苗作“三苗三针两免”和“三苗三针一免”免疫方案是安全可行的。但作“三苗两针一免”安全性无保障。

3.2 三种疫苗组合免疫方案免疫效果不同

对照“三苗三针三免”免疫方案,“三苗三针两免”和“三苗三针一免”免疫方案的免疫抗体合格率均在75%以上,均达到了70%以上的国家标准,免疫效果很好,免疫干扰几乎没有;“三苗三针一免”免疫方案的免疫抗体合格率均在60%以下,未能达到70%以上的国家标准,免疫效果不佳,应该是小反刍兽疫疫苗和羊痘疫苗混合之后,疫苗的免疫原性遭到破坏或产生免疫干扰造成的。

3.3 三种疫苗组合的最佳免疫方案

结合免疫安全性和免疫效果两方面的因素,无疑“三苗三针三免”免疫方案无免疫副反应发生,免疫抗体合格率最高,是最佳免疫方案。但是,考虑到增加一次免疫,组织、人力等经济成本就会成倍增加,在保证安全性和抗体合格率达标的前提下,“三苗三针一免”是最经济省力的免疫方案;“三苗三针二免”是安全性、免疫效果、经济性结合最佳的免疫方案;“三苗两针一免”在安全性和免疫效果方面均无保障。在基层春秋两季集中免疫期间,各地要结合当地实际,谨慎选择适合的免疫方案,在大面积免疫注射前,须进行小范围免疫试验,确认安全可靠后,方可全面开展免疫接种,以较低的经济成本达到较好的免疫效果。