不同方法炮制黄精后其化学成分及药理作用研究进展

常 晖 靳鹏博 马存德 刘 峰

(1 陕西国际商贸学院,咸阳,712046; 2 陕西步长制药有限公司,西安,710075)

黄精为百合科黄精属植物滇黄精PolygonatumkingianumColl.et Hemsl.、黄精PolygonatumsibiricumRed.或多花黄精PolygonatumcyrtonemaHua的干燥根茎。黄精药材商品按基原不同,分为“大黄精”“鸡头黄精”“姜形黄精”3种规格。黄精,味甘、平,归脾、肺、肾经,有补气养阴、健脾、润肺、益肾的功效,用于脾胃气虚、体倦乏力、胃阴不足、口干食少、肺虚燥咳、劳嗽咳血、精血不足、腰膝酸软、须发早白、内热消渴[1]。现代药理研究表明,黄精具有抗衰老、降血糖、增强免疫力、提高学习和记忆能力、抗动脉硬化、保护心血管系统、抗肿瘤、抗炎、抗病原微生物等作用[2]。黄精的主要化学成分有多糖、甾体皂苷、醌类、生物碱、木脂素、维生素和多种氨基酸等[3]。

黄精在全国广为分布,滇黄精主要分布在云南、广西;黄精主要分布在陕西、河北、辽宁、吉林、湖北、山东等省;多花黄精主要分布于浙江、安徽、江西、四川等省[4]。近些年,黄精作为药食同源中药备受青睐,但目前依然缺乏全国统一的黄精炮制技术标准,黄精炮制前后的化学成分差异及药理作用变化机制尚处于初步探索阶段。为了更加科学地开展黄精炮制工艺研究,指导黄精炮制品临床合理应用,现系统梳理了近30年来黄精炮制后化学成分和药理作用变化研究相关文献。

1 黄精炮制方法历史沿革

最早关于黄精炮制方法的记载见于汉末《名医别录》曰:“二月采根,阴干。”[5]此时期的黄精药材为生制品。南北朝·《雷公炮炙论》曰:“凡采得,以溪水洗净后,蒸,从巳到子,刀薄切,暴干用。”[6]现代分类称之为单蒸法。据文献记载,唐代黄精的炮制有重蒸法、九蒸九曝法[7];宋代增加了细锉阴干、捣罗为末、煮法、与蔓荆子九蒸九曝、黄精汁加酒熬等新方法[7];元·《丹溪心法》新增了“生捣汁”[7]。明、清时期又增加了与黑豆共煮、与蜂蜜熬成膏、酒浸法、复制法、酒蒸、蜜蒸等方法[8-9]。采用情报学研究方法对检索到的古代文献进行统计分析,发现文献中出现频次最高的炮制方法为九蒸九晒[10]。现代黄精的炮制方法主要有切片干燥、清蒸法、炙法、酒炖法、酒蒸法[9,11]。2020版《中华人民共和国药典》中记载了黄精和酒黄精2种炮制品。目前关于黄精炮制工艺研究已经取得很多成果[12-16],此外,还有很多学者探索了高压蒸制等黄精炮制的新方法[14,17-20]。

通过不同的炮制方法,可以缓解生黄精的不良反应、增强疗效。唐·《食疗本草》和明·《救荒本草》均记载,生食黄精会“刺人咽喉”[21-22]。清·《医林篡要·药性》更为详细论述了“生黄精,实有辛莶之味,戟人喉吻,惟蒸晒久,庶几补养滋肾耳”[23]。因此需要经过炮制使之变熟,以消除麻味、减轻对咽喉刺激。黄精经过蒸制后能增强补脾润肺、益肾的作用。又因黄精体质柔润,多服久服会妨碍消化,故需要进行酒制,酒可助药热,使其滋而不腻,增强其补中益气、养脾胃的作用[7]。

2 不同炮制方法对黄精化学成分的影响

2.1 黄精炮制前后糖类成分的变化

黄精中的主要成分是糖类成分,且黄精多糖是2020版《中华人民共和国药典》规定的唯一含量测定指标。近些年很多学者对不同方法炮制前后黄精糖类成分的变化做了大量的研究工作,3种黄精(滇黄精、黄精、多花黄精)经不同方法炮制后,黄精糖类成分的含量、组分和比例均发生了变化。

2.1.1 酒制前后黄精中糖类的变化 滇黄精[24-25]、黄精[26-31]、多花黄精[32-33]经酒制后,多糖含量均显著降低。SUN等[34]研究表明,黄精多糖和酒黄精多糖的平均分子量分别为4.01 kDa和14.2 kDa。黄精中多糖主要由半乳糖、甘露糖、葡萄糖和半乳糖醛酸组成,摩尔比为29.63∶36.10∶15.09∶10.20,而酒黄精多糖主要由半乳糖、甘露糖和半乳糖醛酸组成,摩尔比为78.77∶5.50∶13.84。徐如静等[35]发现生多花黄精多糖的分子量为5.34 kDa,经酒制后多糖分子量增大,主要集中在76.4 kDa。多花黄精酒制前后多糖均由半乳糖、半乳糖醛酸、葡萄糖、甘露糖、鼠李糖组成,酒多花黄精多糖新增加的单糖组分为阿拉伯糖。酒多花黄精多糖的半乳糖醛酸含量比生多花黄精降低11.10%,而鼠李糖含量增加了5.31%。与生多花黄精比较,酒制后多花黄精多糖有19.64%羧基发生了酯化。

张艳雪等[36]发现黄精经酒制后,单糖和寡糖类成分含量发生明显变化。其中,D-蔗糖、棉子糖、蜜二糖含量均有不同程度降低,D-果糖、D-葡萄糖、D-木糖含量明显增加。寡糖类成分D-蔗糖、棉子糖、蜜二糖在炮制过程中均产生质变,水解为其对应的单糖和(或)双糖。杨云等[37]发现生品黄精中还原糖含量较低,随着炮制时间的延长还原糖含量逐渐增高,酒炖样品中还原糖含量在25 h达到最大值,随后呈下降趋势。曾林燕等[38]测定了滇黄精、黄精和多花黄精炮制前后小分子糖组成及含量变化,发现3种黄精生品中,小分子糖都为蔗糖和果糖。经酒制后,黄精、多花黄精和滇黄精分别在酒蒸8 h或16 h的炮制品中检测到了葡萄糖。蔗糖、果糖和葡萄糖的含量随炮制时间的延长而增加,然后在不同时间点又呈降低趋势。2种还原糖葡萄糖和果糖之和,以及小分子糖总量都在炮制16 h达到最高,为生品的4～27倍。SUN等[34]通过单糖成分分析发现,生黄精主要由半乳糖(29.63%),甘露糖(36.10%),葡萄糖(15.09%)和半乳糖醛酸(10.20%)组成,而酒黄精中半乳糖的比例最高,达到78.77%,并且含有甘露糖(5.50%)和半乳糖醛酸(13.84%)。

2.1.2 九蒸九制前后黄精中糖类成分的变化 滇黄精[25,39]、黄精[40-42]、多花黄精[14,31-32,35,40,43-48]经九蒸九制后,多糖含量均显著下降。总体变化趋势为:第1～3次蒸制后,多糖含量急剧下降,第4～9次蒸制后,多糖含量下降较为平缓。徐如静等[35]研究发现,生多花黄精多糖只有一个分子量片段,相对分子量为5.34 kDa,九蒸九晒多花黄精的分子量主要集中在1个片段,相对分子量分别为75.8 kDa、5.53 kDa。多花黄精九蒸九制前后多糖均由半乳糖、半乳糖醛酸、葡萄糖、甘露糖、鼠李糖组成,但九蒸九制多花黄精多糖中鼠李糖、甘露糖、半乳糖的占比增加,半乳糖醛酸和葡萄糖的占比减少。与生黄精比较,九蒸九晒多花黄精多糖有15.72%羧基发生了酯化。吴丰鹏等[42]研究结果表明,未蒸制黄精多糖的单糖组成为甘露糖(Man)、葡萄糖(Glc)、半乳糖(Gal)、阿拉伯糖(Ara),4种单糖的百分含量为52.47%、36.84%、7.32%、3.37%;九蒸九制后黄精多糖的单糖组成有所变化,随着蒸制次数的增加,Man的含量不断降低,从最初的52.4%减少至第9次蒸制时的18.86%;Glc的含量在前2次蒸制中降低,但随着蒸制次数的增加其含量又不断增加,最高为第9次蒸制时的52.2%;Gal和Ara随着蒸制次数的增加,其含量相对增加,其中Gal含量增加的量相对比较大。

郑晓倩等[46]研究了多花黄精九蒸九晒炮制过程中糖类成分动态变化,发现双糖、单糖的含量在炮制过程中整体呈先增加后递减的趋势。多花黄精生品中蔗糖含量为3.48%,果糖和葡萄糖含量在多花黄精生品中最低分别为4.42%、1.27%,随着炮制次数的增加,蔗糖含量先增加后减少,经过6次蒸晒后便无法检出,果糖和葡萄糖含量先增加后趋于稳定。推测是由于炮制初期,多糖分解为单糖和低聚糖,而低聚糖会进一步分解为单糖,但炮制后期部分单糖与氨基酸发生美拉德反应,故单糖含量也有所降低。马慕秾[45]发现九蒸九制多花黄精中还原糖含量是生多花黄精的2.85倍,随着蒸制次数的增加还原糖含量先上升后下降。

2.1.3 不同炮制方法对黄精糖类成分的影响 吴英详[28]发现黄精经不同蒸制、煮制、酒炖(黄酒)工艺炮制后,多糖含量均有所降低,炮制时间与多糖含量成反比。在炮制时间相同的情况下,炮制后黄精中多糖含量减少值由高至低:煮制黄精>蒸制黄精>酒制黄精。戴万生等[24]对比了清蒸、酒蒸、黑豆蒸、熟地黄蒸、蜂蜜蒸、蔓荆蒸6种炮制方法对滇黄精糖类成分影响,发现与滇黄精生品比较,各滇黄精炮制品中多糖含量均显著下降,不同辅料蒸制品之间差别不明显。炮制后的滇黄精中还原糖和小分子总糖含量显著增加,非还原性低聚糖含量显著下降,不同辅料蒸制品之间差别明显,还原性糖含量由高至低依次为:蜂蜜蒸>清蒸>酒蒸>熟地黄蒸>蔓荆蒸>黑豆蒸>生品,小分子总糖含量由高至低依次为:蜂蜜蒸>熟地黄蒸>蔓荆蒸>清蒸>酒蒸>黑豆蒸>生品,非还原性低聚糖含量由高至低依次为:生品>黑豆蒸>熟地黄蒸>蔓荆蒸>蜂蜜蒸>酒蒸>清蒸。刘玲[33]研究发现多花黄精经不同方法炮制后,多糖含量由高至低依次为:生多花黄精>蒸制多花黄精>酒制多花黄精。孙婷婷等[29]发现陕西产黄精的不同炮制品中多糖含量存在显著差异,以黄精生饮片中多糖含量最高,酒蒸品次之,清蒸品最低。宋艺君等[30]发现不同产地黄精经鲜切、干切、清蒸、酒蒸炮制后,多糖含量分别为10.8%～13.4%、8.9%～10.8%、5.5%～6.9%,5.6%～6.5%,与未炮制样品(鲜切)比较,黄精经干切、清蒸、酒蒸后多糖含量依次减少。冯婧等[32]发现多花黄精经不同方法炮制后多糖含量均显著降低,炮制后多糖含量由大到小依次为:生多花黄精>清蒸多花黄精>酒蒸多花黄精>九蒸九晒多花黄精。张洪坤等[31]比较了九蒸九制炮制过程中清蒸和酒蒸多花黄精中多糖含量的变化规律,发现各蒸次下酒蒸黄精多糖含量均略低于清蒸黄精。徐如静等[35]研究发现,酒制多花黄精中多糖含量高于九蒸九晒多花黄精。生多花黄精多糖的分子量仅为5.34 kDa,酒制后多糖分子量为76.4 kDa,而九蒸九晒多花黄精的分子量主要集中在2个片段,分别为75.8 kDa、5.53 kDa。与生多花黄精比较,酒制和九蒸九晒后分别有19.64%和15.72%羧基发生了酯化。单糖组成分析结果表明,生多花黄精、酒制多花黄精、九蒸九晒多花黄精中的多糖均含有一定量的半乳糖、鼠李糖、甘露糖、葡萄糖、半乳糖醛酸。与其他2种多糖比较,酒多花黄精中含有少量阿拉伯糖。

杨云等[37]发现黄精生品中还原糖含量较低,经不同时间的清蒸和酒炖炮制后,黄精还原糖含量先增加,随后又呈下降趋势。清蒸黄精和酒炖黄精中还原糖的含量分别在炮制20 h和25 h时达到最大值。总体而言,酒炖黄精样品的还原糖含量高于清蒸黄精,切片后进行蒸制和酒炖的样品中还原糖含量明显高于黄精蒸制和酒炖样品。常亮等[49]测定了3种黄精(多花黄精、黄精、滇黄精)在2种方法(蒸法、炆法)炮制过程中果糖、葡萄糖、蔗糖、水苏糖的含量变化,发现蒸法炮制过程中,随炮制时间增加,3种黄精中果糖和葡萄糖的含量逐渐增加,在炮制8～12 h达到峰值,随后出现含量下降。炆法炮制过程中,果糖和葡萄糖均表现为随炮制时间增加含量也相应增加。2种方法炮制后黄精中单糖成分变化存在明显差异,表明蒸法和炆法炮制过程中发生的化学反应有明显差异。3种黄精经2种方法炮制后,蔗糖含量变化均不大,可能是未参与反应。而作为四糖的水苏糖含量均呈下降趋势,表明黄精炮制过程中多糖在高温环境发生了水解反应。张艳雪等[36]发现多花黄精经酒蒸和炆制后,寡糖类成分D-蔗糖、棉子糖、蜜二糖的含量均显著降低,单糖类成分D-果糖、D-葡萄糖、D-木糖含量明显增加。酒蒸多花黄精中D-果糖、D-木糖的含量均高于炆制多花黄精,而D-葡萄糖、D-蔗糖、棉子糖的含量均低于炆制多花黄精。

2.2 黄精炮制前后皂苷类成分的变化

3种黄精(滇黄精、黄精、多花黄精)经不同方法炮制后,总皂苷含量均相应增加,但随着炮制次数的增加,总皂苷含量呈现上下波动性变化。黄精经炮制后,人参皂苷Rb1、羟基积雪草苷、新西伯利亚蓼苷、薯蓣皂苷等多种皂苷类成分的含量均发生了变化。黄精炮制后有旧的皂苷类成分消失,也有新的皂苷类成分产生。黄精和多花黄精经炮制后,薯蓣皂苷元含量均显著降低。

2.2.1 酒制前后黄精中皂苷类成分的变化 酒制后,滇黄精[24]和多花黄精[33]中总皂苷含量增加,而黄精[28]中的总皂苷含量减少。多花黄精[50]和黄精[51]经酒制后,薯蓣皂苷元含量降低。廖念[14]发现多花黄精酒制后,薯蓣皂苷元和新西伯利亚蓼苷含量增加,羟基积雪草苷含量降低。林雨[25]发现滇黄精经酒制后,人参皂苷Rb1和薯蓣皂苷的含量均有所降低。任洪民等[52]采用主成分分析及正交偏最小二乘法-判别分析筛选了多花黄精酒制前后差异成分,结果表明,甾体皂苷类成分:26-(β-glucopyranosyl)-22-methylfurost-5-ene-3β,14α,26-triol 3-O-β-lycotetraoside或其同分异构体、cyrtonemoside A或其同分异构体、kingianoside Z,是多花黄精酒制前后的主要差异成分之一。多花黄精酒制后,增加的甾体皂苷类成分有:原纤细薯蓣皂苷、(3β,25R)-furost-5-en-12-one,3-[(6-deoxy-4-O-β-D-glucopyranosyl-β-D-galactopyranosyl)oxy]-26-(β-D-glucopyranosyloxy)-22-methoxy、纤细薯蓣皂苷、cyrtonemoside A或其同分异构体、kingianoside Z;减少的甾体皂苷类成分有:kingianoside E或其同分异构体、huangjinoside D、kingianoside F或其同分异构体、kingianoside A或其同分异构体、(25S)-aspidistrin、26-(β-glucopyranosyl)-22-methylfurost-5-ene-3β,14α,26-triol 3-O-β-lycotetraoside或其同分异构体。

2.2.2 九蒸九制前后黄精中皂苷类成分的变化 滇黄精[39]、黄精[41]、多花黄精[31]经九蒸九制后,总皂苷含量均增加,九蒸九制过程中总皂苷含量动态变化研究结果显示,滇黄精、黄精和多花黄精在第1次蒸制后总皂苷含量明显增加,随后呈上下波动性变化。但廖念[14]和李瑞[13]的研究报道中称,多花黄精总皂苷含量从生品到一蒸一烘表现为增加,而从一蒸一烘到九蒸九烘则呈现下降的趋势,且九蒸九烘后多花黄精中总皂苷含量低于生品。廖念[14]发现多花黄精九蒸九制后,薯蓣皂苷元和羟基积雪草苷含量增加,新西伯利亚蓼苷含量减少。张海潮等[48]发现多花黄精经九蒸九制后,薯蓣皂苷含量显著下降。林雨[25]发现与生滇黄精比较,九蒸九制滇黄精中薯蓣皂苷含量下降,而人参皂苷Rb1在第4次蒸制后便降为0。王倩等[53]研究表明,黄精中的薯蓣皂苷在炮制后转化成延龄草苷和薯蓣皂苷元。

2.2.3 不同炮制方法对黄精皂苷成分的影响 张洪坤等[31]发现多花黄精经清蒸和酒蒸后,其皂苷含量均显著升高。低于4次的蒸制炮制中,清蒸多花黄精中皂苷含量高于酒蒸多花黄精。戴万生等[24]对比了不同辅料蒸制对滇黄精皂苷含量的影响,结果表明滇黄精蒸制后总皂苷含量是生品的5～7倍,含量由高至低依次为:酒蒸>清蒸>熟地黄蒸=蜂蜜蒸>黑豆蒸>蔓荆蒸>生品。吴英详[28]发现黄精经不同蒸制、煮制、酒炖(黄酒)工艺炮制后,总皂苷含量均低于生品,炮制时间与总皂苷含量成反比。在炮制时间相同的情况下,煮制黄精的皂苷减少量高于蒸制黄精,蒸制黄精的皂苷减少量高于酒制黄精。孙婷婷等[51]发现不同黄精炮制品中薯蓣皂苷元含量差异有统计学意义(P<0.05),生品含量最高,清蒸品次之,酒蒸品最低。林雨[25]发现滇黄精经不同方法炮制后,人参皂苷Rb1含量均呈下降趋势,在炮制次数相同的情况下,酒制品中人参皂苷Rb1含量高于蒸制品。滇黄精中薯蓣皂苷含量较低,蒸制和酒制前后薯蓣皂苷含量无明显变化,2种炮制品中薯蓣皂苷含量也无明显差异。廖念[14]发现生多花黄精和4种(烫制、清蒸、酒蒸、九蒸)多花黄精炮制品中3种皂苷类成分含量存在差异。其中,薯蓣皂苷元含量依次为:九蒸多花黄精>烫多花黄精>酒蒸多花黄精>生多花黄精>清蒸多花黄精;羟基积雪草苷含量依次为:烫多花黄精>九蒸多花黄精>生多花黄精>酒蒸多花黄精>清蒸多花黄精;新西伯利亚蓼苷含量依次为:清蒸多花黄精>酒蒸多花黄精>生多花黄精>烫多花黄精>九蒸多花黄精。

2.3 黄精炮制前后挥发性成分的变化

美拉德反应是羰基化合物(还原糖类)和氨基化合物(氨基酸和蛋白质)间的反应,经过复杂的历程最终生成棕色甚至是黑色的大分子物质类黑精或称拟黑素,故又称羰氨反应。黄精在炮制过程中也发生了美拉德反应,黄精炮制品的颜色也由浅黄色变为棕色至乌黑色,并产生了一系列的美拉德反应产物。5-羟甲基糠醛(5-hydroxymethylfurfural,5-HMF)是美拉德反应的标志性产物之一,还有呋喃类成分、醛类、烷烃类等挥发性成分均在黄精炮制前后均发生了显著变化。据文献[13-14,54-61]报告统计,炮制后黄精中有17种挥发性成分消失,新生产52种挥发性成分。

2.3.1 酒制前后黄精中挥发性成分的变化 滇黄精[54]、黄精[30]、多花黄精[55-56]经酒制后,5-HMF含量增加。曾林燕等[54]发现3种黄精(滇黄精、黄精、多花黄精)酒制后均产生5-羟甲基麦芽酚(2,3-dihydro-3,5-dihydroxy-6-methyl-4(H)-pyran-4-one,DDMP)和5-HMF 2种新成分,其含量在种间存在一定差异。多花黄精中DDMP含量先随炮制时间的延长逐渐升高,至24 h达到最高,随后降低,而5-HMF的含量随炮制时间的延长一直呈递增趋势。王淳等[56]研究表明,3种黄精(黄精、多花黄精、滇黄精)经酒制16 h后,A280(280 nm吸光度)均增加,滇黄精、黄精和多花黄精酒制品的A280分别是生品的1.6、15.7、2.7倍。3种黄精炮制16 h后的酒制品中二氯甲烷组分pH值与生品比较均呈现酸性变化趋势,但3种黄精的pH值变化程度不同,多花黄精变化幅度最大。以上结果也表明3种黄精之间存在成分差异。随着炮制时间的延长,酒制多花黄精二氯甲烷组分的A280逐渐增加,pH值呈降低趋势。5个不同炮制时间的酒多花黄精共新产生了15个化合物,其中4、8、16、24、32 h酒多花黄精分别有5、6、6、13、10个。其中,正己酸、3-羟基二氢-2(3H)-呋喃酮、4-羟基二氢-2(3H)-呋喃酮和5-羟甲基糠醛4种化合物的含量随炮制时间延长呈增加趋势;3,5-二羟基-6-甲基-2,3-二氢-4H-吡喃-4-酮、4-甲基-2,6-二叔丁基苯酚和2-乙基己基草酸己酯3种化合物含量随炮制时间延长先升高后下降;乙基邻苯二甲酸酯、乙基亚油酸酯和2-乙基己基草酸己酯3种化合物含量随炮制时间延长呈起伏波动变化。李瑞[13]从未炮制的多花黄精药材中检测出42个挥发性物质,酒制多花黄精中检测出了50个挥发性物质。酒制后新产生的物质有18个,主要为呋喃类、醛类、醇及烷烃类。酒制后未检测到物质有11个,主要为烷烃和脂肪酸类物质。

2.3.2 九蒸九制前后黄精中挥发性成分的变化 李瑞等[44]在多花黄精生品中未检测到5-HMF,炮制后5-HMF含量变化明显,一蒸一烘后5-HMF含量为1.15%,从一蒸到九蒸略微呈现下降的趋势。韩笑等[57]发现未经炮制的多花黄精、一蒸一晒、二蒸二晒的多花黄精中均未检测到5-HMF,从三蒸三晒至六蒸六晒5-HMF含量逐渐增加,从六蒸六晒至九蒸九晒5-HMF含量又逐渐降低。林雨[25]对比了滇黄精生品和九蒸九制过程中5-HMF含量的变化,发现生滇黄精中不含5-HMF。随着蒸制次数的增加,滇黄精中5-HMF含量逐渐升高,第7次蒸制后5-HMF含量达到最高为0.735%,随后略呈下降趋势。

2.3.3 不同炮制方法对黄精挥发性成分的影响 常亮等[58]测定了3种黄精(多花黄精、黄精和滇黄精)经2种方法炮制过程中5-HMF含量变化,发现未经炮制的3种黄精中5-HMF含量差异有统计学意义,由高至低依次为:滇黄精>多花黄精>黄精,其中,未炮制的黄精中5-HMF含量为0。经炆法和蒸法炮制后,3种黄精中5-HMF含量都有相应的增加,炆制品>蒸制品。随着炮制时间的延长,3种黄精中5-HMF含量均在炮制16 h左右出现峰值,随后急剧下降。宋艺君等[30]发现不同产地黄精经鲜切和干切后,均未检测到5-HMF,而经清蒸和酒蒸炮制后黄精中均可检测到5-HMF,酒蒸黄精中5-HMF含量高于清蒸黄精。林雨[25]发现在相同炮制次数下,酒制滇黄精中5-HMF含量显著低于蒸制滇黄精。

王进等[59]发现蒸制后多花黄精的挥发性成分在含量和组成上均明显降低。多花黄精生品中挥发性成分相对含量大于2.0%的主要成分有10种,分别为:正己醛、1,7,7-三甲基三环[2.2.1.0(2,6)]庚烷、蒎烯、莰烯、2-正戊基呋喃、10S,11S-雪松3(12),4-二烯、棕榈酸、亚油酸、油酸酰胺、芥酸酰胺,占主要成分总和的61.66%。而蒸制后相对含量大于2.0%的主要成分仅有5种,分别是十五烷酸、棕榈酸、亚油酸、油酸酰胺、芥酸酰胺,且这5种物质在生品中均有检出,占主要成分总和的66.89%。对比发现多花黄精经炮制后,部分挥发油主要成分的含量明显降低,如正己醛、1,7,7-三甲基三环[2.2.1.0(2,6)]庚烷、莰烯、2-正戊基呋喃、10 s,11 s-雪松-3(12),4-二烯等化合物。生黄精具有“久闻其生味,有刺目之感”,而炮制后的黄精无此气味,推测炮制后黄精中含量明显降低的挥发性成分可能是引起生黄精的刺激性和不良反应的主要成分。郭磊等[60]对3种黄精不同方法炮制前后的11种呋喃类成分进行气相色谱-质谱半定量测定,发现3种黄精中呋喃类成分含量差异有统计学意义,多花黄精>滇黄精>黄精。炮制后3种黄精中呋喃类成分都有相应的增加,蒸制品>炆制品。吴毅等[61]发现3种黄精(滇黄精、多花黄精、黄精)经2种方法炮制后,11种呋喃类化合物的含量变化明显。3种黄精中成分含量最高的是糠醛,经过2种方法(蒸制、炆制)炮制后,糠醛类成分含量为:蒸制品>炆制品。3种黄精炮制后除部分情况1-(2-呋喃基)-乙酮及2-戊基呋喃含量减少,其余9种呋喃类成分含量大多有所增加,蒸制品>炆制品。廖念[14]对4种(烫制、清蒸、酒蒸、九蒸)多花黄精炮制品的化学成分进行了分析,发现2-正戊基呋喃、愈创木烯、邻苯二甲酸二异辛酯、Balanophonin B、桉叶油醇、松柏醛、反式-2,4-癸二烯醛共7种挥发性成分的含量在生多花黄精和不同多花黄精炮制品之间均存在不同程度的差异。李瑞[13]从多花黄精药材与3种炮制品(生多花黄精:烫制-切制-干燥、酒多花黄精、蒸多花黄精)共鉴定出71种化合物。其中黄精药材中检测出化合物42个、生黄精44个、酒黄精50个、蒸黄精41个。多花黄精药材与炮制品中检测到24种相同成分,相对含量超过2%的仅有邻苯二甲酸二丁酯与乙酸丁酯2种。多花黄精蒸制后新产生的成分有25个,主要为呋喃类、醛类、醇及烷烃类化合物。蒸制后未检测到的化合物有9个,主要为烷烃和脂肪酸类物质。炮制后新产生了具有美拉德反应标志特征的化合物有2,2-二甲基四氢呋喃、2,3-二氢-3,5二羟基-6-甲基-4(H)-吡喃-4-酮等。

2.4 黄精炮制前后黄酮类成分的变化

2.4.1 酒制前后黄精中黄酮类成分的变化 吴英详[28]发现与黄精生品比较,酒制后黄精中总黄酮含量均有所下降,黄酮含量与酒制时间成反比。廖念[14]发现多花黄精经酒制后,Disporopsin、Odoratumone B、新甘草苷、杨梅素共4种黄酮类成分的含量均增加。任洪民等[52]采用主成分分析及正交偏最小二乘法-判别分析对多花黄精酒制前后化学成分进行了分析,发现黄酮类成分是多花黄精酒制前后的主要差异成分之一。3种差异性黄酮类成分分别为:甲基麦冬黄烷酮B、5,7-dihydroxy-3-(4′-hydroxybenzyl)-chroman-4-one、disporopsin,其中甲基麦冬黄烷酮B仅存在于生品中。

2.4.2 九蒸九制前后黄精中黄酮类成分的变化 张海潮等[48]发现多花黄精在九蒸九制不同炮制阶段总黄酮的含量变化显著,随着炮制时间的增加,总黄酮含量显著升高,在七蒸时达到最高峰,总黄酮为4 582 μg/g,约为多花黄精生品453 μg/g的10倍,之后总黄酮含量随炮制时间的增加而逐渐下降。高兴[62]对黄精九蒸九晒炮制前后差异性成分的分离与纯化,发现炮制前后主要的差异性化学成分的化学成分为4′,5,7-三羟基-6,8-二甲基高异黄烷酮,化学式为C18H18O5,同时此物质也是黄精九蒸九晒炮制后含量损失最大的化学物质。廖念[14]发现多花黄精经九蒸九制后,Disporopsin、Odoratumone B、杨梅素的含量均增加,新甘草苷含量减少。

2.4.3 不同炮制方法对黄精中黄酮类成分的影响 吴英详[28]发现不同蒸制工艺、煮制工艺、酒制工艺的黄精炮制品中黄酮含量与生品比较均有所降低,且随着炮制时间的延长,黄酮的含量明显下降。相同炮制时间,不同方法炮制后黄精中总黄酮的含量由高至低依次为:酒制黄精>蒸制黄精>煮制黄精。廖念[14]对比不同方法炮制前后多花黄精中黄酮类成分的变化,不同炮制品中Disporopsin和Odoratumone B的含量均依次为:清蒸多花黄精>酒蒸多花黄精>九蒸九制多花黄精>烫多花黄精>生黄精;新甘草苷含量依次为:清蒸多花黄精>酒蒸多花黄精>生多花黄精>烫多花黄精>九蒸九制多花黄精;杨梅素含量依次为:清蒸多花黄精>烫多花黄精>九蒸多花黄精>酒蒸多花黄精>生多花黄精。

2.5 不同炮制方法对黄精中氨基酸类成分的影响 氨基酸是人体必需营养物质,黄精作为滋补类中药也含有较多的氨基酸成分,炮制后黄精中氨基酸总量和成分均有相应的增加,这可能是黄精炮制后补益作用增强的物质基础之一。吴毅等[63]发现3种黄精(滇黄精、黄精、多花黄精)生品中氨基酸的含量差异有统计学意义,16种水解氨基酸总含量,由高到低依次为:黄精>多花黄精>滇黄精。不同方法炮制后,3种黄精中总氨基酸都有相应的增加,黄精和滇黄精的不同炮制品中总氨基酸含量依次为:蒸制品>炆制品>生品,多花黄精的不同炮制品中总氨基酸含量依次为:炆制品>蒸制品>生品。黄精经炮制后共新产生了8种氨基酸成分。见表1。任洪民等[52]发现氨基酸类成分L-焦谷氨酸C5H7NO3仅存在于生品多花黄精中,酒制多花黄精中未检测到。

表1 黄精药材炮制后新产生氨基酸成分变化

2.6 不同炮制方法对黄精中其他类成分的影响 3种黄精(滇黄精、黄精、多花黄精)经不同方法炮制后,蒽醌、蛋白质、糖醛酸、多酚、生物碱、有机酸等成分均产生了差异性变化。田先娇等[39]发现滇黄精九蒸九制过程中,蒽醌含量总体呈下降趋势。SUN等[34]研究发现,与黄精粗多糖比较,酒黄精粗多糖的总碳水化合物含量为减少了41.43%,蛋白质含量增加了26.17%,糖醛酸含量增加了10.71%,多酚含量增加了2.76%。廖念[14]对比了生多花黄精和4种(烫制、清蒸、酒蒸、九蒸)多花黄精炮制品的化学成分差异,发现β-谷甾醇(甾体)、月桂酸(饱和脂肪酸)、鹅掌楸碱(生物碱)3种成分的含量在生多花黄精和各炮制品之间均存在不同程度的差异。任洪民等[52]研究表明,生物碱类成分是多花黄精酒制前后的主要差异成分之一。酒制后新产生3种生物碱类成分:2,3,4,6-tetrahydro-lH-β-carboline-3-carboxylic acid、polygonatine B、4-(9H-β-carbolin-1-yl)-4-oxo-but-2-enoic acid methyl ester。亚油酸和天师酸2个有机酸在炮制前后也发生了变化,炮制后天师酸的响应强度减少,亚油酸的响应强度增加。其他类成分如:8-hydroxychromogen、环(L-亮-L-异亮)二肽、(6R,9R)-长寿花糖苷、3-(9,12)-十八碳二烯酰基甘油,则仅存在于生品多花黄精中。张海潮等[48]发现九蒸九制过程中,随着炮制时间的增加,总酚含量显著升高。

3 不同炮制方法对黄精药理作用的影响

3.1 酒制前后黄精药理作用变化

3.1.1 增强免疫作用 3种黄精(滇黄精、黄精、多花黄精)酒制前后均可通过增加胸腺指数、脾脏指数、细胞活力、吞噬能力、调节细胞因子分泌等方式增强机体免疫功能,其物质基础主要为黄精中的多糖类成分,酒制后黄精提高免疫活性的能力显著增强。

栾妮娜[20]发现与生品组小鼠比较,常压酒蒸和加压酒蒸炮制后滇黄精可使温热药致阴虚模型小鼠胸腺指数显著升高(P<0.05)。SUN等[34]发现黄精粗多糖和酒黄精粗多糖均可增强细胞活力、吞噬能力、酸性磷酸酶活性和RAW 264.7细胞的一氧化氮产生,以增强RAW 264.7细胞的体外免疫调节活性,且酒黄精粗多糖的作用大于黄精粗多糖。黄精粗多糖和酒黄精粗多糖还可通过改善胸腺和脾脏指数,恢复外周血白细胞、淋巴细胞和红细胞数量,使血清中白细胞介素-2,白细胞介素-6,肿瘤坏死因子-α和γ干扰素的分泌恢复到正常范围,降低脾脏和胸腺的负形态变化等途径增强脾虚小鼠免疫抑制模型的免疫功能。与黄精粗多糖比较,酒黄精粗多糖显示出更强的免疫活性。张莹等[64]发现酒制多花黄精能显著提高小鼠平均吞噬指数和平均校正廓清指数,且与生品多花黄精组比较,差异有统计学意义(P<0.05),表明酒制多花黄精增加小鼠非特异性免疫功能的作用优于生品。钟凌云等[55]发现与生品多花黄精比较,酒制多花黄精的二氯甲烷部位能显著提高小鼠碳粒廓清指数(P<0.05)和吞噬系数(P<0.05),提示酒制多花黄精能显著提高小鼠非特异性免疫功能。万晓莹等[65]对多花黄精炮制前后多糖的免疫活性比较,对于正常小鼠腹腔巨噬细胞,酒多花黄精粗多糖能显著促进细胞分泌肿瘤坏死因子-α(P<0.01),但多花黄精粗多糖无明显作用。对于脂多糖诱导巨噬细胞模型,酒多花黄精粗多糖和多花黄精粗多糖均能显著抑制细胞分泌肿瘤坏死因子-α和白细胞介素-1β(P<0.01),且酒多花黄精粗多糖作用更强。酒多花黄精粗多糖和多花黄精粗多糖增强免疫调节作用主要是通过抑制炎症反应,且多花黄精在酒制后其多糖成分抑制炎症反应的作用增强。

3.1.2 健脾作用 栾妮娜[20]发现与生品组小鼠比较,常压酒蒸和加压酒蒸炮制后的滇黄精可使温热药致阴虚模型小鼠体质量增长率、脾脏指数显著升高(P<0.05)。SUN等[34]发现与脾虚组小鼠比较,黄精粗多糖和酒黄精粗多糖处理后的脾虚组小鼠体质量以剂量依赖性方式增加。酒黄精粗多糖在恢复小鼠体质量方面比黄精粗多糖具有更高的活性。

3.1.3 抗氧化作用 王淳等[56]对比了相同生药质量浓度(40 mg/mL)的3种酒黄精(滇黄精、黄精、多花黄精)炮制品(炮制16 h)的二苯基苦基苯肼(2,2-diphenyl-1-picrylhydrazyl,DPPH)自由基清除率变化。发现酒制后,滇黄精DPPH自由基清除率从18.89%增加至49.20%(P<0.05),黄精从36.89%增加至68.58%(P<0.05),多花黄精从33.21%增加至66.16%(P<0.05),与生品黄精比较,3种黄精酒制品的二氯甲烷组分DPPH自由基清除率均明显增加。冯婧等[32]发现多花黄精酒制后,可以提高其DPPH自由基、ABTS自由基的清除能力,酒制后多花黄精水提物与醇提物的总还原力均高于生品。

3.1.4 抗疲劳作用 栾妮娜[20]研究发现,与生品组小鼠比较,常压酒蒸和加压酒蒸滇黄精后,小鼠游泳时间明显延长(P<0.05),小鼠耐缺氧存活时间明显延长(P<0.05)。

3.1.5 降低毒性和刺激性 清·《医林篡要·药性》记载“生黄精,实有辛莶之味,戟人喉吻”,现代研究表明黄精炮制后可降低其毒性和刺激性,减少不良反应的产生。栾妮娜[20]发现滇黄精生品的刺激性比较明显,生品滇黄精处理后,兔眼黏膜可见血管充血,虹膜角膜都有炎症水肿现象,各酒制品无明显刺激性。急性毒性实验结果显示,滇黄精生品大剂量40.0 g/(kg·d)(药材/(小鼠体质量·d)可使小鼠活动减少,随着时间的延长,药物作用减弱,可逐渐恢复正常。滇黄精酒制品以及滇黄精生品的中低剂量对小鼠活动、饮水、摄食均无明显影响,也无其他不良反应。说明滇黄精生品虽具有一定的不良反应,但不良反应较小,可以耐受。酒制后可明显降低其不良反应,保证用药安全。

3.1.6 滋阴作用 景军强等[66]发现阴虚模型组小鼠在给予生黄精和酒蒸黄精后各项指标均有所改善,其治疗效果依次为:酒黄精2#(先切后蒸)>酒黄精1#(先蒸后切)>生黄精,表明酒蒸后黄精滋阴作用有所增强。

3.1.7 其他作用 栾妮娜[20]研究发现,与生品组滇黄精小鼠比较,常压酒蒸品和加压酒蒸滇黄精对温热药致阴虚模型小鼠的痛阈均显著升高(P<0.05)。

3.2 九蒸九制前后黄精药理作用变化

3.2.1 增强免疫作用 林雨[25]发现九蒸九制滇黄精可以显著提高环磷酰胺损伤小鼠的外周血白细胞计数、红细胞计数、血红蛋白、血小板含量,而生滇黄精组没有显著改善作用。九蒸九制滇黄精还可以提高血虚模型小鼠的免疫器官指数。蒸制3～9次的熟滇黄精对小鼠脾指数有明显改善,而生滇黄精没有明显作用。

3.2.2 健脾作用 马慕秾[45]发现与市售多花黄精组比较,九制多花黄精组模型大鼠体质量显著升高(P<0.05),增长率为83.44%;市售多花黄精组对体质量无明显影响。表明九制后多花黄精在提高气阴两虚模型大鼠的体质量方面具有更强的活性。

3.2.3 抗氧化作用 冯婧等[32]发现与生多花黄精比较,传统九蒸九晒多花黄精的水提液在清除自由基能力和总还原能力上有明显优势。陈杨杨等[67]发现九制多花黄精炮制品在5、10、15 g/kg 3个剂量均对游泳力竭小鼠具有明显抗氧化作用,且九制品的作用效果优于生药多花黄精。九制品在延长游泳力竭时间、增加糖原含量以抗疲劳、降低脾丙二醛含量且提高脾超氧化物歧化酶活力等方面的抗氧化作用效果比生多花黄精强。吴丰鹏等[42]研究了九蒸九制后的黄精抗氧活性的变化,发现蒸制后的黄精多糖对自由基的清除能力明显高于未蒸制黄精(P<0.05),但蒸制次数对黄精多糖抗氧化活性影响不大。蒸制后的黄精多糖对自由基平均清除能力的半抑制浓度均低于未蒸制黄精多糖,说明蒸制后的黄精多糖抗氧化性更强。

3.2.4 抗疲劳作用 陈靓雯等[68]发现同等剂量下,古法炮制(九制)多花黄精提取液与市售多花黄精提取液比较,具有更显著的延长负重游泳时间、降低血清尿素氮水平、提高肝糖原含量、降低血乳酸水平的作用。表明古法炮制多花黄精在延缓疲劳的产生、提高运动耐力及消除运动代谢废物方面具有更显著的效果。陈杨杨等[67]发现与多花黄精生药比较,九制后多花黄精可显著延长小鼠游泳力竭时间。与正常对照组比较,生药黄精和九制品处理后小鼠肝糖原含量明显升高,九制品对雌小鼠的效果要强于多花黄精生药;九制品对雄小鼠促进作用效果总体来说不如生药黄精明显。

3.2.5 降低毒性和刺激性 林雨[25]研究发现,在相同浓度下,“九蒸九制”熟黄精甲醇提取物对RAW 264.7细胞受到脂多糖刺激后产生一氧化氮的抑制作用显著强于生黄精组(P<0.01)。表明滇黄精经过炮制后,熟滇黄精的体外抗炎活性增强,可以有效降低生黄精的刺激性。滇黄精炮制前后的溶血活性分析结果表明,滇黄精经第二次蒸制后,不同炮制品的甲醇提取物及水提物均可显著降低其溶血率,其中“八蒸八制”和“九蒸九制”熟滇黄精降低其刺激性活性最显著(P<0.001)。

3.2.6 滋阴作用 马慕秾等[69]以市售黄精、九制黄精的水提物处理气阴两虚模型大鼠,发现九制黄精组大鼠面温均低于市售黄精组,且存在显著差异(P<0.05)。但市售黄精组在降低气阴两虚模型大鼠的热成像温度方面优于九制黄精。

3.2.7 改善血虚症状 林雨[25]发现九蒸九制滇黄精可以显著改善血虚证小鼠外周血白细胞计数、红细胞计数、血红蛋白、血小板含量降低的情况,而生滇黄精组没有显著改善作用。表明炮制可增强滇黄精对小鼠血虚症状的改善作用。

3.3 不同炮制方法对黄精药理作用变化

3.3.1 健脾作用 马慕秾[45]分别用市售多花黄精、四制多花黄精、九制多花黄精的水提物对气阴两虚模型大鼠进行灌胃(用量10 g/kg),给药6周后,四制多花黄精组、九制多花黄精组模型大鼠体质量显著升高(P<0.05),增长率分别为84.04%、83.44%;市售多花黄精组对体质量无明显影响。表明炮制后多花黄精在提高气阴两虚模型大鼠的体质量方面具有更强的活性。给药6周,与市售多花黄精组比较,四制多花黄精组大鼠的尾径显著增大(P<0.01)。周巧等[70]研究表明,生多花黄精和炆多花黄精均可提高脾虚小鼠的胃肠运动功能,改善脾虚小鼠胃肠激素水平,从而起到健脾作用,但以炆多花黄精效果最佳。

3.3.2 抗氧化作用 冯婧等[32]对生多花黄精和不同多花黄精炮制品(清蒸黄精、酒黄精、九蒸九晒黄精)水提液和醇提液进行体外抗氧化试验,结果表明不同方法炮制后均能提高多花黄精水提液与醇提液对DPPH自由基和ABTS自由基的清除能力。生品与各炮制品醇提物的清除自由基和总还原作用均远低于各品种水提物。其中,传统九蒸九晒黄精的水提液在清除自由基作用和总还原作用上有明显优势。

3.3.3 抗疲劳作用 杜小琴等[71]对多花黄精炮制品与生品中多糖类成分、皂苷类成分、黄酮类成分的抗运动疲劳作用进行比较研究,结果表明多花黄精炮制品中多糖类成分为抗运动疲劳活性物质,多花黄精生品中多糖类成分、皂苷类成分为抗运动疲劳活性物质。多糖类成分为多花黄精主要的抗运动疲劳活性物质,生品中多糖类成分抗运动疲劳活性强于炮制品。

3.3.4 降低毒性和刺激性 冯敬群等[72]将生黄精及清蒸品、酒蒸品的水提醇沉液按450 g/(kg·24 h)(相当于原生药)的剂量给小鼠灌服后,生品组小鼠全部死亡,而炮制组小鼠均无死亡且活动正常。表明黄精生品具有一定的毒性,黄精经炮制后毒性明显降低。

3.3.5 滋阴作用 2020版《中华人民共和国药典》记载黄精具有“补气养阴、润肺、益肾”的功效[1],现代研究表明,黄精经炮制后可显著增强其滋阴作用,并可通过提高机体免疫力、氧化应激作用、维持机体内环境的稳态、降低器官损伤、调节基因表达等多种途径,改善机体肺、肾阴虚状况。林雨[25]研究结果表明:1)炮制滇黄精对肺阴虚小鼠有显著改善作用。a.滇黄精可以通过提高机体免疫力以及氧化应激作用、降低体内炎症介质含量、维持机体内环境的稳态等起到对肺阴虚小鼠的保护作用。改善九蒸九”黄精>一蒸一制黄精>生黄精,且“酒制”黄精的效果优于“蒸制”黄精。b.炮制黄精能够有效改善肺阴虚小鼠肺泡体积增加、空泡多、炎症细胞浸润的情况,对肺阴虚小鼠肺组织的损伤起到保护作用。改善效果九蒸九制黄精>一蒸一制黄精>生黄精。c.炮制黄精可以显著下调Wnt4基因、上调Gsk-3β基因的mRNA及蛋白的表达水平,从而使β-连环素被磷酸化而不会进入细胞核影响细胞正常的增殖和分化,起到“滋阴润肺”的效果。2)炮制黄精对肾阴虚小鼠有显著的改善作用。a.滇黄精可以提高肾阴虚小鼠的免疫力以及氧化应激作用并且起到维持阴虚小鼠体内能量代谢平衡及内环境稳态的作用。改善九蒸九制黄精>“一蒸一制”黄精>生黄精,且“酒制”黄精的效果优于“蒸制”黄精。b.滇黄精能够有效改善肾阴虚小鼠肾小球体积增加、肾小球破损及炎症细胞浸润的情况,对肾阴虚小鼠肾组织的损伤起到保护作用。改善“九蒸九制”黄精>“一蒸一制”黄精>生黄精的效果。c.给药滇黄精及其炮制品后,可以抑制Wnt4基因mRNA及蛋白表达量,上调Gsk-3β基因的mRNA及蛋白的表达量,从而抑制β-连环素基因及蛋白的表达量,β-连环素是Wnt信号通路的关键蛋白,表明滇黄精“滋阴”的效果可能与抑制Wnt信号通路的异常激活相关。马慕秾等[69]分别用市售黄精、四制黄精、九制黄精的水提物对气阴两虚模型大鼠进行灌胃(用量10 g/kg),给药6周,大鼠的面温由高至低依次为:市售黄精组>四制黄精组>九制黄精组,大鼠的热成像温度由高至低依次为:四制黄精组>九制黄精组>市售黄精组。

3.3.6 其他作用 马慕秾等[69]发现不同受试液处理气阴两虚模型大鼠6周后,四制多花黄精组和九制多花黄精组对大鼠血液中谷丙转氨酶、谷草转氨酶水平的降低效果优于市售多花黄精组,其中九制多花黄精组的效果最为显著,表明炮制后可以增强多花黄精改善肌肉损伤及肝功能的作用。

4 小结

综上所述,黄精炮制前后其化学成分和药理作用均发生了显著变化。不同辅料制、蒸制、煮制、酒制、炆制工艺炮制后,各黄精炮制品的化学成分、药理作用也存在显著差异。糖类、皂苷类、挥发性物质、黄酮类等化学成分是黄精炮制前后主要的差异物质。黄精经炮制后可降低其不良反应和刺激性,并对其增强免疫、健脾、抗氧化、抗疲劳、益气养阴等药理作用均有一定的促进效果。

在整理文献过程中也发现一些问题:1)滇黄精、黄精、多花黄精3个物种来源的黄精药材,其化学成分和药理作用均存在一定的差异,在实际应用中如何合理调配需做进一步试验研究。2)黄精的炮制方法各式各样无统一标准,导致各专家学者之间的研究结果存在矛盾,亟待制定全国统一的黄精炮制标准。3)黄精炮制品中具体化学成分和药理作用的关联性研究不足,需开展药效物质基础研究,明确黄精炮制品中的化学成分,从而制定合理的临床用药指导意见。

5 讨论

王进等[59]研究发现多花黄精经炮制后,对人的眼、鼻、咽喉具有刺激性的挥发性成分正己醛和莰烯的含量均显著降低,分别由9.13%和18.05%降为3.89%和2.35%,据此推测正己醛和莰烯可能是生黄精中引起刺激性的主要成分。中医认为“黄色入脾,白色入肺,黑色入肾”,生黄精一般为黄白色,主入脾、肺,认为生黄精补益脾肺功效较强,而炮制后黄精色黑入肾,故其滋阴补肾功效较强。现代研究表明,酒黄精的蛋白质含量是生黄精的8.67倍[34],3种黄精经炮制后总氨基酸含量和氨基酸种类均有相应的增加,而蛋白质和氨基酸均是人体必需的营养物质之一,故推测黄精炮制后补益作用的增加与蛋白质和氨基酸的增加具有一定的关系。杜小琴等[71]研究发现黄精中的多糖类成分为其抗疲劳作用的主要物质基础,故生黄精的抗疲劳活性优于炮制品,这与炮制后黄精多糖含量的降低和多糖组成成分变化存在一定联系。美拉德反应产物具有一定的抗氧化活性,而黄精在炮制过程中也发生了美拉德反应[73]。多酚具有一定的抗氧化功能[74],SUN等[34]发现酒黄精中的多酚含量为3.03%,而生黄精中仅为0.27%。故推测炮制后黄精的抗氧化作用的增加与美拉德反应产物和多酚含量的增加有一定的关联性。钟凌云等[55]研究表明,黄精炮制前后差异较大的二氯甲烷部位的主要成分之一为5-羟甲基糠醛,经炮制后其含量显著增加,而炮制后黄精的二氯甲烷部位能明显提高小鼠非特异性免疫功能,推测制黄精增强免疫功能可能与炮制后5-羟甲基糠醛含量变化相关。研究表明,5-羟甲基糠醛具有抗氧化、抗肿瘤、抗糖尿病、抗组织缺氧、抗心肌缺血、改善血液流变学、保护神经、改善学习能力等作用[75-76]。炮制后黄精各方面功效的增强或许与5-羟甲基糠醛含量的增加相关。药理研究表明,黄精总皂苷具有调节血糖、抗肿瘤、改善学习记忆、抗氧化、调节免疫、抗抑郁等作用,炮制后黄精中总皂苷含量均高于生品,故黄精炮制品种总皂苷所产生的药理药效作用应有所增强[77-78]。

总之,目前黄精炮制前后各化学成分变化与药理作用的“靶向关系”研究尚处于探索阶段,需要更多学者进行深入研究,以阐明黄精炮制过程药理作用变化机制,指导不同黄精炮制品的临床应用,为黄精中药效良好的天然产物开发奠定基础。