橙汁饮料中山梨酸稳定性与均匀性研究

◎ 刘李婷，陈姗姗，常 薇，李 超，吴 坤

（陕西省产品质量监督检验研究院农副食品所，陕西 西安 710048）

山梨酸结构式为2,4-己二烯酸，具有共轭双键体系，能够与许多亲核试剂反应[1]。山梨酸是目前国际上使用较为广泛的防腐剂[2]，可以抑制微生物的生长，从而延缓食品腐败[3-4]。能力验证是一种通过实验室间的比对，按照相关准则评估参与者能力的活动[5-6]。而组织能力验证需制作盲样，本文制作4 个浓度水平样品，并通过均匀性及稳定性试验得出数据，为各机构组织能力验证设计盲样提供指导依据。

1 材料与方法

1.1 材料与设备

样品：橙汁饮料（市售康师傅橙汁）；试剂：超纯水；乙酸铵（分析纯）。仪器：高效液相色谱仪（岛津SPD-20A）；超声清洗振荡机（昆山市超声仪器KQ-500E）。

1.2 仪器条件

色谱柱：C18ODS-3（150 mm×4.6 mm，5 μm）；流动相：0.02 mol·L-1乙酸铵∶甲醇=95∶5；流速：1.0 mL；检测波长：230 nm。

1.3 试验方法

1.3.1 样品前处理

在50 mL 离心管中称取约2 g 样品，加水约25 mL涡旋混匀，50 ℃水浴超声20 min，再次加水并定容后涡旋混匀超声振荡5 min，取适量上清液过0.22 μm 水系滤膜，滤液待上机检测[7]。

1.3.2 试验设计方案

分别称取适量山梨酸加入橙汁饮料中，使浓度分别为A（0.022 g·kg-1）、B（0.045 g·kg-1）、C（0.046 g·kg-1）、D（0.075 g·kg-1），依照《能力验证样品均匀性和稳定性评价指南》（CNAS—GL003：2018）[8]中的规定来设计样品的均匀性及稳定性试验，并通过多组数据进行分析。

2 结果与分析

2.1 均匀性试验

依照《能力验证样品均匀性和稳定性评价指南》（CNAS-GL003：2018）[8]中的规定，根据单因子方差分析法进行样品均匀性试验。均匀性检验是指从A、B、C、D 4 个不同浓度水平样品中随机抽取10 份，其中每个样品重复测定2 次，在短时间内由同一试验人员根据上述的测试方法，在相同试验条件下对样品进行项目的检测[9]。样品均匀性试验采用单因子方差统计分析进行评定，当样品中检测含量的F值小于F临界值[F0.05(9，10)=3.02]时，表明样品制备均匀，可用于实验室使用。样品均匀性结果见表1 和表2。由表2可知，A、B、C、D 4 个不同浓度水平样品的F值小于临界值，表明在0.05 显著性水平时，样品间和样品内均无显著性差异，样品均匀。

表1 样品中山梨酸测定结果表

表2 方差分析结果表

2.2 稳定性试验

选取在试验期间的不同时间间隔内抽取10 个样品，其中每个样品重复测定2 次，试验条件（试验方法、试验人员、仪器、实验室条件）均与均匀性检验相同。此次稳定性试验的持续时间为18 d。测定时间间隔根据先密后疏的原则进行设计，共设计为3 个时间间隔。样品分别于制样后第1 天（4 月27 日）、第9 天（5 月5 日）、第18 天（5 月14 日）进行检测。根据上述均匀性试验所测结果作为参比数据，用t检验法进行稳定性试验。若结果t值小于tα(n1+n2-2)时则表明两个平均值间无显著性差异，即表示所制备样品稳定。稳定性试验的结果如表3 所示。由表3 可知，t值均＜t临界值（t0.05(18)=2.101），表明在0.05 显著性水平时无显著性差异，样品稳定。

表3 稳定性试验结果表

3 结论

本文介绍的橙汁饮料中的山梨酸制备方式所制得的4 个浓度水平样品均匀性良好，在18 d 内样品性质稳定，可用于能力验证使用，并可指导各机构进行盲样制作，从而为各机构在组织能力验证中的盲样制作考核提供指导，具有一定的参考价值。