苏禽6号蛋鸡早期血脂代谢规律研究

张晶鑫，杨平，葛宇峰，王星果，窦套存，郭军，胡玉萍，王强，王克华，曲亮*

(1. 江苏省家禽科学研究所/江苏省家禽遗传育种重点实验室，江苏 扬州 225125；2. 中国畜牧业协会，北京 100044)

我国鸡蛋消费偏好粉壳蛋，其市场份额正逐年上升。粉壳蛋主要由我国地方特色蛋鸡生产，其蛋重较小、蛋形较长、蛋黄比率大，淘汰母鸡体重适中，符合城乡居民传统消费习惯[1-2]，但是地方特色蛋鸡产蛋性能偏低，限制了产业发展速度[3-4]。蛋鸡饲料以粮食为主要原料，在饲料原料价格不断上涨的情况下，蛋鸡饲养成本逐年增加，节约饲料、提高生产效率显得尤为重要。目前市场上的节粮型蛋鸡品种，高产与优质不兼容[5-7]，因此需培育产蛋数多、蛋品质优、耗料少的高产节粮地方特色蛋鸡新品种。江苏省家禽科学研究所借助蛋鸡育种平台，经过多年培育，育成高产节粮蛋鸡配套系苏禽6号蛋鸡(含有dw矮小基因[8])，其性能优秀，市场前景十分广阔。

脂质代谢在一定程度上反映鸡摄入的营养水平和健康状况，同时还与其生长发育和繁殖相关。鸡日粮中能量水平升高则增加腹脂，而蛋白质水平升高则减少腹脂；血浆中极低密度脂蛋白(VLDL)含量随着日粮能量水平升高而降低，而总脂和胆固醇含量则随着日粮能量、蛋白质水平的升高而降低[9]。对肉种鸡限饲能提高鸡胚血清中甘油三酯(TG)和总胆固醇(TC)含量，降低低密度脂蛋白(LDL)含量[10]。鸡长期的脂肪代谢障碍会引发脂肪肝[11]，患有脂肪肝综合征的鸡与正常鸡相比，体重明显增大，腹脂率升高，血清TG、TC和LDL含量升高，而高密度脂蛋白(HDL)含量降低[12]。通过饲料中添加稀土壳聚糖，四川山地乌骨鸡早期腹脂率、肝脂率以及血清TG、TC和VLDL含量都明显降低，而日增重则明显提高[13]。清远麻鸡早期腹脂重与体重、屠体重和胫长显著正相关[14]。肉鸡的脂肪沉积与体重呈显著正相关，适当的脂肪沉积有利于肉鸡开产和产蛋，但脂肪沉积过度则降低产蛋数和蛋重[15]。因此对鸡的脂质代谢特别是早期脂质代谢进行研究对生产具有指导意义。苏禽6号蛋鸡培育过程中并未对脂质代谢进行检测分析，而血液中TC、LDL等脂代谢指标含量高低能反应出脂质代谢状况[16]，因此有必要进行相关研究。本研究采集苏禽6号蛋鸡早期血清，对脂质、脂蛋白、卵黄前体蛋白等脂代谢指标进行检测和分析，为维持该配套系的早期生长发育和机体健康提供理论指导。

1 材料与方法

1.1 试验材料

以苏禽6号蛋鸡为试验组，江苏省家禽科学研究所选育的海兰褐蛋鸡为对照组。采用密闭鸡舍两段式笼养，饲养条件相同，标准饲粮进行饲喂。饲料采用江苏盐城源耀饲料有限公司生产的806、816、828料，饲料营养水平见表1。自由饮水、采食，常规光照、免疫。试验鸡为10～18周龄，每周各品种随机选取健康母鸡12只，空腹12 h后采血用于后续测定。

表1 饲料营养水平

1.2 测定项目及方法

1.2.1 血清脂代谢指标测定

采血5 mL，静置20 min后3 000 r/min离心5 min，吸取上清液，使用Angle Gene生产的试剂盒进行各脂代谢指标测定。TG、TC测定：2.5 μL血清加入250 μL工作液，混匀，37 ℃孵育10 min，使用酶标仪测定波长510 nm的OD值。设置空白(蒸馏水)和校准品，含量=(血清OD值-空白OD值)/(校准OD值-空白OD值)×校准品浓度。游离脂肪酸(FFA)测定：4 μL血清加入200 μL试剂1，混匀，37 ℃孵育5 min，使用酶标仪测定波长546 nm的OD值(OD1)，再加入50 μL试剂2，混匀，37 ℃孵育5 min，测定波长546 nm的OD值(OD2)，计算ΔOD=OD2-OD1。FFA、HDL和LDL测定：2.5 μL血清加入180 μL R1，混匀，37 ℃孵育5 min，使用酶标仪测定波长546 nm的OD值(OD1)，再加入60 μL R2，混匀，37 ℃孵育5 min，测定波长546 nm的OD值(OD2)，计算ΔOD=OD2-OD1。设置空白(蒸馏水)和校准品，含量=(血清ΔOD-空白ΔOD)/(校准ΔOD-空白ΔOD)×校准品浓度。极低密度脂蛋白y(VLDLy)、卵黄蛋白原(VTG)测定：10 μL血清加入40 μL稀释液中，然后加入50 μL酶标试剂，37 ℃孵育30 min，弃去并甩干液体，加入洗涤液后静置30 s，弃去并甩干，重复5次，先后加入显色液A和B各50 μL，震荡混匀，37 ℃避光显色10 min，加50 μL终止液终止反应，使用酶标仪测定波长450 nm的OD值。设置空白(蒸馏水)和标准品，绘制标准曲线后算出各血清样品VLDLy、VTG含量。

1.2.2 生产性能测定

根据NY/T 823—2020《家禽生产性能名词术语和度量计算方法》对相关指标进行测定和记录[17]，包括屠宰前体重，屠宰后腹脂重、肝重和全净膛重，并计算腹脂率、肝脏指数。腹脂率=腹脂重÷(全净膛重+腹脂重)×1 000‰。肝脏指数=肝脏重÷体重×1 000‰。

1.3 数据统计与分析

使用SPSS 26软件中的独立样本t检验和单因素方差分析，并进行相关性分析。数据用“平均值±标准差”表示。

2 结果与分析

2.1 血清脂质指标

不同周龄TG、TC、FFA含量和腹脂率、肝脏指数趋势见表2、表3。随着周龄增加，苏禽6号蛋鸡血清FFA含量整体降低，12周龄开始显著降低(P<0.05)；TC含量在一定范围内波动变化，其中11、12、14、15、17周龄显著降低(P<0.05)，13、16周龄又显著升高(P<0.05)；腹脂率前期基本保持不变，17周龄后显著升高(P<0.05)；肝脏指数在12周龄显著降低(P<0.05)，之后基本保持不变。

表2 苏禽6号蛋鸡和海兰褐蛋鸡血清脂质指标比较 mmol/L

表3 苏禽6号蛋鸡和海兰褐蛋鸡腹脂率和肝脏指数比较 ‰

由表2可见，苏禽6号蛋鸡血清TG含量在10、12、13、16周龄极显著(P<0.01)而15周龄显著(P<0.05)高于海兰褐蛋鸡，其他周龄差异不显著(P>0.05)；TC含量与海兰褐蛋鸡波动类似且无明显规律；FFA含量与海兰褐蛋鸡变化基本一致。

10周龄与18周龄比较，仅FFA在苏禽6号蛋鸡和海兰褐蛋鸡中均差异显著，且均是18周龄比10周龄显著降低(P<0.05)。

由表3可见，苏禽6号蛋鸡腹脂率极显著高于海兰褐蛋鸡(P<0.01)；肝脏指数除10、13周龄极显著高于海兰褐蛋鸡(P<0.01)，其余周龄与海兰褐蛋鸡基本一致。

表3中10周龄与18周龄腹脂率、肝脏指数比较结果显示，仅在苏禽6号蛋鸡中存在显著差异，其中腹脂率18周龄显著升高(P<0.05)，肝脏指数18周龄显著降低(P<0.05)。

2.2 血清脂蛋白指标

不同周龄HDL和LDL含量趋势见表4。随着周龄增加，苏禽6号蛋鸡血清LDL含量波动变化，其中11、14、15和17周龄显著降低(P<0.05)。

表4 苏禽6号蛋鸡和海兰褐蛋鸡血清脂蛋白指标比较 mmol/L

苏禽6号蛋鸡HDL含量在10、15周龄显著(P<0.05)而11、14和17周龄极显著(P<0.01)低于海兰褐蛋鸡其他周龄差异不显著(P>0.05)。LDL含量除13周龄极显著高于海兰褐蛋鸡(P<0.01)，其余周龄与海兰褐蛋鸡基本一致。

10周龄与18周龄HDL、LDL含量比较结果显示，2个品种鸡的2个指标均无显著差异。

2.3 血清卵黄前体蛋白指标

不同周龄VLDLy和VTG含量趋势见表5。随着周龄增加，苏禽6号蛋鸡VTG含量11周龄开始显著降低(P<0.05)，之后基本保持不变。

表5 苏禽6号蛋鸡和海兰褐蛋鸡血清卵黄前体蛋白指标比较 ng/mL

苏禽6号蛋鸡VLDLy含量整体与海兰褐蛋鸡一致，VTG含量前期与海兰褐蛋鸡基本一致，15周龄后显著低于海兰褐蛋鸡(P<0.05)。

10周龄与18周龄VLDLy、VTG含量比较结果显示，2个品种鸡的2个指标均无显著差异。

2.4 相关性分析

血清各脂质代谢指标与腹脂率、肝脏指数间的相关性分析见表6。TG与VLDLy和腹脂率呈极显著正相关(P<0.01)。FFA则相反，它与VLDLy(P<0.05)和腹脂率(P<0.01)呈显著或极显著负相关，同时与TG也显著负相关(P<0.05)，但和肝脏指数显著正相关(P<0.05)。TC、HDL和LDL三者之间均呈极显著正相关(P<0.01)。VLDLy与腹脂率呈显著正相关(P<0.05)。

表6 苏禽6号蛋鸡血清脂代谢指标与腹脂率、肝脏指数相关性分析

3 讨论

3.1 血清脂代谢指标表达规律

对苏禽6号蛋鸡早期脂质代谢进行系统研究可以对其早期饲养阶段的生长发育提供间接数据支撑，指导生产。Bobek等[18]发现热应激育成鸡饲喂反式三碘甲腺原氨酸(rT3)可以增加FFA含量。热应激会减缓机体的基础代谢，而rT3能进一步减缓代谢并加速脂质裂解，这样就增加了FFA含量，说明FFA受到甲状腺激素调控。而在本研究中，随着早期苏禽6号蛋鸡生长，血清中FFA含量降低，与Bobek等[18]的研究结果相反，提示其也受甲状腺激素调控，且是反向调控。另外，早期苏禽6号蛋鸡血清FFA含量显著低于海兰褐蛋鸡，说明节粮矮小蛋鸡脂质裂解能力可能比高产褐壳蛋鸡弱[18]。农大3号矮小蛋鸡TG和TC含量与高产蛋鸡无显著差异[19]。而本研究中，苏禽6号蛋鸡血清中TG含量显著高于海兰褐蛋鸡，而HDL含量则较低，提示不同品种矮小蛋鸡血脂差异较大。因为高TG会增加脂质沉积，高HDL会促进肝外组织胆固醇向肝内流动，降低动脉粥样硬化风险[20-21]，因此苏禽6号蛋鸡早期脂质降解能力可能低于高产蛋鸡。VLDLy和VTG是形成卵黄的重要前体蛋白，两者均富含脂质，鸡卵黄中的大部分脂质均由VLDLy和VTG中获得，血清中VLDLy和VTG水平与蛋鸡繁殖性能密切相关[22-23]。苏禽6号蛋鸡血清VTG含量前期与海兰褐蛋鸡基本相当，后期却明显较低，提示苏禽6号蛋鸡繁殖性能低于高产蛋鸡。苏禽6号蛋鸡早期腹脂率高于海兰褐蛋鸡，说明苏禽6号蛋鸡早期腹脂沉积比海兰褐蛋鸡多。

3.2 育成前后期脂代谢指标比较

本研究的各血清脂代谢指标中只有FFA在苏禽6号蛋鸡和海兰褐蛋鸡中均存在显著差异，提示FFA的明显减少对2个鸡种的发育均较重要。腹脂率和肝脏指数均只在苏禽6号蛋鸡中有显著差异，而在海兰褐蛋鸡中无显著差异，提示地方蛋鸡腹脂和肝脏发育后期受脂质代谢影响较大，而高产蛋鸡则受影响较小，分析这可能和高产蛋鸡的长期选择有关。

3.3 苏禽6号蛋鸡脂代谢指标相关性分析

相关性分析可以为育种中特定性状的选育提供一个较为合适的选择指标。苏禽6号蛋鸡早期血清TG含量与FFA显著负相关，与TC、HDL无相关性，而TC与HDL显著正相关。东乡绿壳蛋鸡血清TG含量与TC极显著正相关，与HDL显著负相关[24]。如皋黄鸡血清TC含量与TG、HDL都是极显著正相关[25]。综上，说明不同品种鸡血脂各指标间相关性有所差异。苏禽6号蛋鸡早期血清TC含量还与LDL显著正相关，与肉鸭早期血清中TC含量与LDL的相关性一致[26]，但是苏禽6号蛋鸡TC含量与FFA无相关性，而肉鸭TC含量与FFA显著正相关[26]，说明不同禽类早期血脂代谢指标存在差异。另外，本研究中苏禽6号蛋鸡早期血清TG含量与FFA显著负相关，且这2个指标与VLDLy和腹脂率等指标的相关性正好相反，说明苏禽6号蛋鸡可以根据血清TG或是FFA含量判断对方的含量，并估计其他脂质相关指标的大致情况，提示血清TG或FFA可作为选择脂质代谢性状的潜在指标。分析血脂代谢指标与其他性状指标的相关性也能为脂代谢性状或其他性状的选育提供理论指导，如成年萧山鸡血浆TC含量与屠体重、半净膛重、全净膛重均呈显著正相关，提示可通过血浆TC含量的选择进而选择萧山鸡产肉性能[27]。限饲的肉鸡脂肪组织中c-myc原癌基因表达量与血清TG含量呈显著负相关，提示可通过c-myc基因表达量的选择进而选择脂质代谢性能[28]。因此，对苏禽6号蛋鸡早期血清脂质代谢指标与其他性状指标的相关性分析有望为各性状的选择提供新思路，值得进一步研究。

3.4 血清脂代谢研究展望

患有脂肪肝出血综合征的鸡血清中TG、TC和LDL含量显著高于正常鸡，而HDL含量则显著低于正常鸡，说明TG、TC和LDL含量的升高和HDL含量的降低会导致鸡肝脏脂肪病变，并造成脂质代谢紊乱，降低生产性能[12]。因此，对鸡脂质代谢进行调控可以改善或提高生产性能。肉鸡饲喂益生菌胶囊可以显著降低血清TG、TC和LDL含量[29]。在罗曼蛋鸡性成熟时期，血清TG、TC、VLDLy和VTG均有显著提高，通过上调肝脏-血液-卵巢信号轴上各相关基因的表达，卵黄的形成和卵泡的发育均得到促进[30]。在蛋鸡体内使用RNAi对2个重要的脂质代谢相关基因ACACA和SREBP1进行敲低，可以显著降低血清TG、TC、HDL和LDL含量，并降低鸡蛋中TC和LDL含量，影响蛋品质[31]。蛋鸡日粮中添加白藜芦醇可以降低血清TG、TC、LDL和VLDL含量以及卵黄TC含量，提高饲料转化率、鸡蛋蛋白高度和哈氏单位[32]。饲养方式也能调控鸡脂质代谢，例如与笼养相比，散养可以降低血清TC含量，提高鸡肉品质[33]。苏禽6号蛋鸡早期血清脂代谢指标反映了其育成期的脂质代谢水平，间接反映其营养和健康情况，为苏禽6号蛋鸡进行早期脂质代谢调控奠定了基础。

4 小结

苏禽6号蛋鸡从10周龄到18周龄发育过程中，腹脂率显著升高，FFA、VTG和肝脏指数显著降低。与海兰褐蛋鸡相比，苏禽6号蛋鸡腹脂率、血清TG含量较高，HDL含量较低，而VTG含量前期相当，后期则明显较低。苏禽6号蛋鸡血清TG含量与VLDLy、腹脂率显著正相关，与FFA显著负相关；TC、HDL和LDL三者之间均显著正相关。总体上苏禽6号蛋鸡早期血脂代谢稳定。