2017—2021年云南省猪瘟病原学和血清学监测情况分析

胡媛媛，张 懿，赵屹钦，曾邦权，王俊美，杜 润，赵 珍，张 然，何依蓉，陈红艳，张文东，赵焕云

（1.云南农业职业技术学院，云南昆明 650031；2.云南省动物疫病预防控制中心，云南昆明 650000）

猪瘟（classical swine fever，CSF）是一种由猪瘟病毒（classical swine fever virus，CSFV）感染引起的高度急性、热性、接触性传染病，是世界动物卫生组织（WOAH）规定的必须通报的猪重要传染病[1]，也是我国农业农村部《国家动物疫病监测与流行病学调查（2021—2025年）》中要求的重点防治动物疫病[2]，于2017年退出国家强制免疫计划[3]。2022年，农业农村部将CSF 从一类动物疫病调为二类动物疫病，要求以疫病净化为防治重点，不断完善养殖场生物安全体系，严格落实各项综合防控措施，积极开展场群或区域净化工作，不断实现净化目标。因此，持续做好CSF 病原及免疫抗体监测是进一步扩大CSF净化区域的基础。

国家统计局云南调查总队发布的《2021年云南省畜牧业发展情况》数据显示，2021年云南省生猪出栏4 192 万头，排名全国第五，较上年增加739 万头，同比增长21.4%。云南省养殖模式复杂，既有高度集约的养殖企业，也不乏众多小型规模养殖场及家庭散养户，加之云南省地理位置特殊，边境线漫长，导致CSF 防控难度加大。根据《国家猪瘟防治指导意见（2017—2020年）》[4]及《2017—2021年云南省动物疫病监测与流调计划》，对2017—2021年云南省16个州市的CSF 流行及免疫状况进行了调查，以期为云南省CSF 防控及净化提供依据。

1 材料与方法

1.1 样品

2017—2021年，按照配额抽样方法在云南省16 个州市共采集猪组织、棉拭子等病原学样品63 224 份，血清学样品146 547 份（表1）。

表1 2017—2021年云南省CSF 血清学及病原学样品信息 单位：份

1.2 主要仪器与试剂

Thermo Fisher MultiskanTMFC 酶标仪，购自美国Thermo 公司；96 通道全自动核酸提取仪，购自西安天隆科技有限公司；ABI QuantStudio 7 flex 荧光定量PCR 仪，购自美国ABI 公司。病毒DNA/RNA 核酸提取试剂盒（4.0），购自西安天隆科技有限公司；PrimeScript One Step RT-PCR Kit，购自宝生物工程（大连）有限公司；CSFV Antibody Test Kit，购自韩国金诺生物科技有限公司。

1.3 检测方法

1.3.1 血清学检测 按照CSFV 抗体检测试剂盒说明书，对采集的猪血清进行CSFV 抗体检测。

1.3.2 病原学检测 按照《猪瘟诊断技术》（GB/T 16551—2020）所述方法，合成荧光定量RT-PCR检测引物，对采集的猪组织及棉拭子样品进行CSFV 核酸检测。

1.4 数据统计分析

应用Excel 2013软件对检测结果进行统计分析。

2 结果与分析

2.1 血清学监测情况

2.1.1 空间分布 2017—2021年，云南省猪血清学样品的C S F V 抗体合格率为8 2.5 9%（121 037/146 547）。不同州市统计结果（图1）显示，云南省大多数州市每年的CSFV 免疫抗体合格率均高于国家要求的70%，低于70%的4 个州市分别为昭通市、德宏州、丽江市和临沧市，其中，德宏州连续3年（2018—2020年）抗体合格率低于70%，2020、2021年临沧市抗体合格率分别为66.71%、63.33%；2017年昭通市抗体合格率为63.95%，2020年丽江市也低于70%。大多数州市的年均CSFV 抗体合格率保持平稳，昭通、文山、德宏等州市波动相对较大。

图1 2017—2021 云南省不同州市CSFV 抗体合格率

2.1.2 时间分布 结果（图2）显示，2017—2021年云南省CSFV 免疫抗体合格率分别为82.94%、81.47%、80.79%、80.24%、82.53%，均平稳保持在80%以上。

图2 2017—2021年云南省CSFV 抗体合格率

2.1.3 群间分布 结果（图3）显示，2017—2021年云南省规模场抗体合格率为83.85%（46 401/55 338），散养户为81.83%（74 636/91 209），规模场略高于散养户，但差异不显著（P＞0.05）。

图3 2017—2021年云南省不同养殖方式CSFV 抗体合格率

2.2 病原学监测情况

2.2.1 空间分布 2017—2021年，云南省15 个州市（大理州未开展病原学检测）猪组织及棉拭子样品的CSFV 核酸阳性率为1.13%（713/63 224）。不同州市统计结果（图4～5）显示，除西双版纳州、丽江市未检测到阳性外，其余州市阳性率为0.22%～3.74%，其中文山州阳性率最高，达到3.74%，曲靖市、德宏州、普洱市阳性率较低，分别为0.31%、0.22%、0.42%。同一州市不同年度阳性率也各有不同，其中文山州2017—2020年阳性率均维持在0～2.54%，但2021年突然升高至19.00%；保山市的阳性率也在2019年有异常升高情况，达8.89%。

图4 云南省各州市CSFV 核酸阳性率

图5 2017—2021 云南省各州市CSFV 核酸阳性率

2.2.2 时间分布 结果（表2、图6）显示，2017—2021年，云南省CSFV 核酸阳性率分别为0.52%、0.74%、1.10%、1.02%、2.42%，除2020年略有下降外，整体呈上升趋势，2021年阳性率最高，达到2.42%；阳性州市所占比例呈波动趋势，2019年占比最高，高达86.67%。

图6 2017—2021年云南省CSFV 核酸阳性率

表2 2017—2021 云南省CSFV 阳性州市统计

2.2.3 群间分布 结果（图7）显示，2017—2021年，云南省规模场CSFV 阳性率为0.76%（180/23 708），散养户为1.44%（425/29 477），屠宰场为1.08%（108/10 039）。规模场CSFV 核酸阳性率较低，在2019年达到峰值，随后呈下降趋势；散养户阳性率呈逐年上升趋势，2021年高达4.15%；屠宰场阳性率除2019年略有下降外，整体都维持在较高水平。

图7 2017—2021年云南省不同养殖方式CSFV 核酸阳性率

3 讨论

3.1 血清学监测

疫苗免疫是防控CSF 的重要手段[5]。2017—2021年云南省CSFV 免疫抗体合格率为80.24%～82.94%，整体免疫效果较好，但不同州市抗体水平略有差异，少部分州市部分年份抗体水平低于70%。结合病原学检测结果发现，免疫抗体合格率低于70%的州市其同年CSFV 病原学阳性率也有所上升，提示疫苗免疫合格率降低一定程度上增加了CSF 发病风险，应持续加强疫苗免疫，提高抗体水平。

规模养殖场连续5年抗体合格率均稳定维持在80%以上，散养户虽也达到了国家标准，但波动比较大，说明2017年CSF 退出国家强制免疫后，规模养殖场受国家免疫政策变化影响不大，但散养户根据地方财政配套情况自行制定免疫计划，难以保证免疫密度和免疫效果，加之中大型养殖场的人员配套、实验室建设、仓储运输等软硬件管理能力均较强，有效免疫、适时补免等工作的开展也远远优于散养户，所以规模养殖场免疫抗体合格率高于散养户，与谢嘉宾等[6]、王佳芸等[7]研究结果相近。

3.2 病原学监测

从空间分布上看，2017—2021年，除西双版纳和丽江外，云南省各州市均有不同程度的CSFV阳性检出，且大多数州市的阳性率相对稳定，但个别州市浮动较大，尤其是2021年文山州、2019年保山市阳性率有异常上升情况，结合同年两个州市CSFV 免疫合格率均在80%以上，排除疫苗免疫失败原因，猜测CSFV 阳性率异常升高可能与病毒基因变异及猪场日常管理存在疏漏等因素有关，具体原因有待进一步研究。

从时间分布上看，2018、2019年CSFV 阳性州市分布范围最广，可能与频繁调运有关。同年由于非洲猪瘟暴发，猪群免疫力下降，造成多种疾病混合感染，使得CSFV 病原阳性率也随之升高。整体来看，除2020年CSFV 病原阳性率略有下降外，云南省CSFV 病原学阳性率呈上升趋势，说明云南省CSF 疫情发生风险逐年增加，建议在做好疫苗免疫的前提下，加强猪场日常管理，做好清洁消毒工作。

从群间分布上看，2017—2021年，除规模场外，散养户、屠宰场的CSFV 病原阳性率整体呈上升趋势，尤其散养户阳性率增加较为明显。规模场在资金、技术等方面的优势使其疫病防控能力强于散养户，因此免疫密度低和抗体合格率低的散养户发生CSF 的风险更大，应着重对其加强免疫及监测；同时，屠宰场作为畜禽流通的重要一环，其阳性率增加应引起警惕，建议严格做好消杀工作，防止CSFV 扩散。

3.3 两者关系

从病原学、血清学监测结果来看，云南省连续5年CSFV 免疫抗体合格率均高于70%，并保持稳定，但CSFV 病原学阳性率却整体升高。进一步比较各州市数据发现，在CSFV 免疫抗体合格率低的情况下，多数州市同年CSFV 病原阳性率相较往年升高；在CSFV 免疫抗体合格率高于80%的情况下，部分州市仍有较高的CSFV 病原阳性率，说明疫苗虽有一定的保护效果，但由于病毒在不断变异，其对不同毒株间的交叉保护作用有限[8]。