中药防敏润肌唇膏对皮肤刺激性和致敏性研究*

宋西卫，夏庆梅，武昊昀，刘志东

（1.天津中医药大学,现代中药发现与制剂技术教育部工程研究中心研究生，天津 300193；2.天津中医药大学，天津 30019）

中药防敏润肌唇膏对皮肤刺激性和致敏性研究*

宋西卫1，夏庆梅2，武昊昀2，刘志东2

（1.天津中医药大学,现代中药发现与制剂技术教育部工程研究中心研究生，天津 300193；2.天津中医药大学，天津 30019）

[目的]考察中药防敏润肌唇膏对皮肤的刺激及致敏作用，并进行安全性评价。[方法]用皮肤刺激及致敏反应评分表评价中药防敏润肌唇膏对皮肤的刺激、致敏反应。[结果]中药防敏润肌唇膏对家兔正常皮肤及破损皮肤的平均刺激分值均﹤0.50分，即家兔单次及多次性涂用此唇膏后完整皮肤及破损皮肤的涂药部位均未见异常改变。在致敏性实验中,中药防敏润肌唇膏对豚鼠未见致敏作用,而阳性药2,4-二硝基氯苯见有极强致敏性。[结论]中药防敏润肌唇膏对家兔皮肤无刺激性，对豚鼠无致敏性，是一种安全性较好的外用制剂。

中药防敏润肌唇膏；皮肤刺激性；致敏性；动物实验研究

唇炎是一种较常见的口腔黏膜疾病，中药防敏润肌唇膏为本校自制，具有凉血活血、解毒透疹的功效，以及抗炎抗菌抗病毒等作用，治疗唇炎疗效显著。本实验依据外用药皮肤刺激性及致敏性实验要求进行了皮肤刺激性及致敏性的实验研究，观察中药防敏润肌唇膏对皮肤的刺激及致敏反应，了解中药防敏润肌唇膏在外用给药过程中的安全性，以期为临床用药提供参考。

1 实验材料

1.1 药品和试剂 中药防敏润肌唇膏、赋形剂（空白唇膏）均自制，硫化钠（Na2S）（天津市光复精细化工研究所）。

1.2 动物 日本大耳白家兔，体质量1.5～2.5 kg，雌雄各半，由天津中医药大学动物中心提供，合格证号：SCXK（津）2005-0001。豚鼠，体质量 280～320 g，雌雄各半，由天津中医药大学动物中心提供，合格证号：SCXK（京）2006-0006。

2 方法

2.1 家兔皮肤刺激性实验

2.1.1 实验动物的处理与分组 选取家兔20只，雌雄各半，体质量1.5～2.5 kg。用10%Na2S将家兔的背部脊柱两侧脱毛，选脱毛24 h后无破损皮肤家兔备用，脱毛范围约为3 cm×3 cm，涂药面积约为2.5 cm×2.5 cm[1]。随机分为为完整皮肤组Ⅰ、Ⅱ和破损皮肤组Ⅲ、Ⅳ，每组5只。破损皮肤模型的制作方法：用大头针划直径为2 cm的“#”形擦伤，注意只刺破表皮，不伤及真皮，以有轻度渗血为度。

2.1.2 单次给药皮肤刺激实验 于脱毛及破皮损皮肤后第2天,分别在第Ⅰ和第Ⅲ组家兔左侧脱毛区均涂抹赋形剂1.0 g，右侧脱毛区均涂抹中药防敏润肌唇膏1.0 g。敷上纱布，用无刺激性胶布固定。每只动物分笼饲养，涂药后24 h用无菌温水清洗药物，清洗后在1、24、48、72 h肉眼观察并记录涂抹部位有无红斑和水肿等情况，刺激强度的评价参照“2.1.4”项下操作。

2.1.3 多次给药皮肤刺激实验 分别在第Ⅱ和第Ⅳ组家兔左侧脱毛区均涂抹赋形剂1.0 g，右侧脱毛区均涂抹中药防敏润肌唇膏1.0 g。涂药1次/d，连续涂抹14 d，从第2天开始，每次涂抹前应剪毛，用温水清除残留受试物。从末次除去药物及赋形剂后1 h开始观察并记录涂抹部位有无红斑和水肿等情况，1次/d，连续观察14 d，刺激强度的评价参照“2.1.4”项下操作。

2.1.4 刺激性评价 对涂抹部位有无红斑 (包括焦痂)和水肿等情况进行评分[2]，根据下列公式计算平均积分值，分值小于0.5为无刺激性；分值小于2.99为轻度刺激性；分值小于6.0为中度刺激性；分值大于6.0为强刺激性。

公式：刺激分值＝（红斑反应总分＋水肿反应总分）/每组动物数

2.2 豚鼠皮肤致敏性实验

2.2.1 动物处理、分组及实验方法 将白色豚鼠30只按体质量及性别随机分成3组，每组10只（雌雄各半）。第1组给予受试药物中药防敏润肌唇膏，第2组空白对照组给予赋形剂，第3组阳性对照组给予1%2，4－二硝基氯苯。于给药前24h，将豚鼠背部两侧被毛，去毛区范围每侧约9cm2（3cm×3cm）。取受试物1.0g涂在动物左侧脱毛区，用一层油纸及两层纱布覆盖，再以无刺激胶布固定。将动物分笼饲养，持续6h。第7天和第14天，以同样方法各重复致敏1次，共计3次。空白对照组和阳性对照组作相同方法的给药处理。于末次给受试药物致敏后14d，将受试物1.0g涂于豚鼠背部右侧脱毛区；空白对照组涂赋形剂1.0g；阳性对照涂1%2，4－二硝基氯苯。各组保留药物6h后再去掉药物，即刻观察，然后于24、48、72h再次观察豚鼠皮肤过敏反应情况。

2.2.2 致敏性评价 记录各时间豚鼠皮肤过敏反应分值[2-3]，计算皮肤过敏反应程度的分值[4]，以评价中药防敏润肌唇膏的致敏性程度。

3 实验结果

3.1 皮肤刺激性实验 实验结果见表2～3,完整组1次给药组（Ⅰ）和多次给药组（Ⅱ），皮肤刺激反应平均分值均值小于0.5，破损组1次给药组（Ⅲ）的最高积分为0.4，多次给药组（Ⅳ）的皮肤刺激反应最高积分小于0.5，各组动物饮食、活动正常，刺激强度评价均为无刺激。

表1 中药防敏润肌唇膏1次用药对皮肤刺激的反应分值The value of irritation reaction of a single-dose ofanti-anaphylaxisHerbal Lipstick’son the rabbit’s skin 分

即中药防敏润肌唇膏与赋形剂单次、多次给药后对完整皮肤与破损皮肤的平均反应分值均无明显差异，刺激强度评价均为无刺激。

3.2 皮肤致敏性实验 实验结果见表4，在激发接触受试药物中药防敏润肌唇膏（或赋形剂，或2，4－二硝基氯苯）后 6、24、48、72h，第 3 组阳性药物对照组豚鼠皮肤出现明显溃烂、红斑或水肿；其皮肤组织形态经进行病理学检查,可见表皮角化层变薄，部分动物表皮角化层缺失、水疱、充血等，即呈现显著的过敏反应性炎症损伤性表现。根据皮肤致敏性评价标准，有高度的致敏作用。第1组和第2组在激发接触后6、24、48、72h均未见豚鼠皮肤出现溃烂、红斑或水肿；其皮肤组织形态仅部分动物皮肤可见表皮角化层轻度变薄,但未见炎细胞浸润、溃疡、水疱、充血等病变。结果表明中药防敏润肌唇膏及其赋形剂外用接触豚鼠皮肤后均无致敏作用。

表2 中药防敏润肌唇膏多次用药对皮肤刺激的反应分值The value of irritation reaction of multiple use ofAnti-anaphylaxis Herbal Lipstick’son the rabbit’s skin

表3 中药防敏润肌唇膏皮肤致敏性反应分值(±s) The value of allergy reaction of the Anti-anaphylaxisHerbal Lipstick on them ice’s skin(±s)

表3 中药防敏润肌唇膏皮肤致敏性反应分值(±s) The value of allergy reaction of the Anti-anaphylaxisHerbal Lipstick on them ice’s skin(±s)

中药防敏润肌唇膏赋形剂2,4-二硝基氯苯组即刻（1h）0 0 6.8±0.98 24h 0 0 7.6±0.78 48h 0 0 5.1±0.83 72h 0 0 3.2±1.02100致敏率（%）00致敏反应强度无致敏性无致敏性高度致敏性激发后不同时间皮肤过敏反应的分值组别

4 讨论

中药防敏润肌唇膏是治疗各种急性、慢性唇炎的外用制剂，通过皮肤刺激性及致敏性实验观察动物皮肤短期接触中药防敏润肌唇膏所产生的反应情况，结果表示对家兔完整皮肤及破损皮肤刺激均未见异常改变，外用接触后无刺激作用。对豚鼠完整皮肤和破损皮肤均未见明显的毒性刺激性损伤作用，无致敏作用，表明中药防敏润肌唇膏在临床应用中是一种安全性较好的外用制剂。

[1]陈 奇.中药药理研究方法学[M].北京:人民卫生出版社,1993:164-166.

[2]袁伯俊,王治乔.新药临床前安全性评价与实践[M].北京：军事医学科学院出版社,1997:152-154.

[3]蔡承铿,钟赛贤,赵振新,等.各类化妆品毒性试验研究[J].中国公共卫生,1993,6(9):268-269.

[4]中华人民共和国卫生部药政局.新药临床前研究指导原则汇编[S].北京：气象出版社，1994:204-208.

Skin irritation and allergy testof the Anti-anaphylaxisHerbal Lipstick

SONGXi-wei，XIAQing-mei，WUHao-yun
（Tianjin University of TCM，Engineering Research CenterofModern ChineseMedicine Discovery and Preparation Technique，Ministry ofEducation，Tianjin 300193，China）

[Objective]The experimenton the skin irritation and allergy of the Anti-anaphylaxis Herbal Lipstick(AHL)was performed for safety assessment.[Methods]Response tablewasused to assess the skin irritation and allergy of AHL.[Results]The average reaction values of AHL in normalor injured skin were both lower than 0.50.No irritation reaction occurred in complete skins and damaged skins afterapplying AHL forone timeormany times.Theallergic reactionswere observed afterapplied 2,4-dinitrochlorobenzene,whilenotob-served afterapplying AHL.[Conclusion]AHL showed no irritation orallergy effect to skin.The results indicated that the lipstick wasef-fective and safe.

Anti-anaphylaxisherbal lipstick;Skin irritation;allergic test

R285.5

A

1672-1519(2010)02-0153-03

国际科技合作计划项目（2007DFC31670）；国家科技支撑计划项目（2007BAI47B00）；天津中医药大学校级科研课题（XJ200703）：中药防敏润肌唇油的药效学研究。

宋西卫（1987-），女，硕士研究生，主要从事缓控释制剂的研究。

刘志东。

2009-09-30）