仙草中表儿茶素的结构鉴定

邱 挺,林晓翠,王碧玉

福州大学化学化工学院,福州 350108

仙草中表儿茶素的结构鉴定

邱 挺＊,林晓翠,王碧玉

福州大学化学化工学院,福州 350108

通过高效液相色谱从仙草乙醇萃取物中分离并制备出样品,利用紫外光谱、质谱、红外光谱、核磁共振方法鉴定其为表儿茶素,从而建立了从仙草中分离制备表儿茶素的方法。

仙草;表儿茶素;结构鉴定

表儿茶素 (Epicatechin)属于儿茶素类,儿茶素类物质是一种重要的酚类物质。植物中的天然抗氧化成分除了生育醇、抗坏血酸、类胡萝卜素、生物碱之外,酚类物质是分布最广、种类及含量最多的成分。经研究表明,儿茶素类物质具有清除自由基、抑制肿瘤、抗诱变、抗病毒、降脂助消化、护肤美容等多种生物活性[1]。

仙草 (Hsian-tsao,M esona procum bensHemsl)属于唇形科草本植物,在我国分布广泛。对其抗氧化成分的研究分析已表明,仙草水萃取物的抗氧化性极佳,强于生育醇,稍优于二丁基羟基甲苯(BHT)[2]。洪千雅等[3,4]的研究结果表明,仙草提取物中的主要抗氧化组分为原儿茶酸、咖啡酸、豆甾醇、熊果酸、山奈酚、芹菜素等,其中主要为多酚类物质。而从仙草中提取分离制备得到表儿茶素还未见文献报道。

本文通过高效液相色谱从仙草乙醇提取物中分离制备出表儿茶素,并通过紫外光谱、质谱、红外光谱、核磁共振四个方面对其进行结构鉴定,从而建立了从仙草中分离制备表儿茶素的方法。

1 材料与方法

1.1 试剂与仪器

仙草:购自建瓯,全草 80℃干燥后经粉碎,通过35目筛网,收集于密封袋中,保存于 0～4℃备用;甲醇(色谱纯);其它试剂均为分析纯。

Varian高效液相色谱仪,配有 C18液相色谱柱、PS210溶剂传输装置、ProStar330二极管阵列检测器、液相收集器 PS704;气相色谱-质谱联用仪,GCMS2010(日本岛津公司);Vector 22红外光谱仪(Bruker);Avance AMX-400核磁共振仪 (Bruker); MF10B研磨机 (德国)。

1.2 样品制备

取仙草粉末 10 g,以 100 mL乙醇在 60℃下萃取2 h,连续萃取三次,所得萃取液过滤后,得仙草乙醇萃取液,冷藏备用。萃取液先以分析型高效液相色谱寻找最佳分离条件,再以此条件于制备型高效液相色谱进行重复收集与分离,最终得到的样品,在55℃下真空干燥,卸压后氮气保护,备用。制备的样品 (为黄色无定形粉末)采用硫氰酸铁化法[5]测定其抗氧化性,结果证实其具有一定的抗氧化性。

1.3 液相色谱分析条件

色谱柱为 Varian Microsorb-MV C18150 mm× 4.6μm,流动相为甲醇:水 =15%:85%,柱流速 1δ4.76(1H,d,HO-R)显示为与 C相接的 O-H信号,归属于 C3-OH信号。δ4.09(H,d,H-C-Ar)显示为样品的 C-H信号,归属于 H-2信号。δ2.78(H,q,HC-O)显示为样品的 C-H信号,归属于 H-3信号。δ1.25(2H,d,H-C-R)显示为样品的伯基 C-H信号,归属于 H-4信号。

综合上述分析结果与表儿茶素的质谱、红外和紫外光谱等特性数据,可以确定样品为表儿茶素(Epicatechin),分子式为 C15H14O6,结构式如图 3中预测的结构一致。

图5 样品的1H NMR谱图Fig.51H NMR spectrum of sample

3 结论

通过高效液相色谱分离并制备得到的样品,经结构鉴定为表儿茶素,为仙草中含有表儿茶素的首次报道,并对其进行抗氧化性能测定,结果证实其具有一定的抗氧化性,为仙草乙醇提取物的抗氧化组分之一。本文的研究结果对仙草中已分离纯化的酚类抗氧化成分进行了补充,为今后更全面地进行仙草抗氧化性的研究打下了基础。

1 Wu SL(吴松兰),Zou H(邹洪).Analysis of catechins in leaves of acer truncatum bunge byHPLC.J Anal Sci(分析科学学报),2008,24:173-175.

2 Kazuki H,Shinichi K,Michio Y.Natural antioxidants and active oxygen removers in food cos metics and phar maceuticals.Chem Abstr,1996,124,200690r.

3 Hung CY,Yen GC.Antioxidant activity of phenolic compounds isolated fromM esona procum bensHemsl.J Agric Food Chem,2002,50:2993-2997.

4 Hung CY,Yen GC.Extraction and identification of antioxidative components of Hsian-taso(M esona procumbensHemsl). Lebens m-W iss u-Technol,2001,34:306-311.

5 Mitsuda H,Yasumoto K, Iwami K.Antioxidative action of indole compounds during the autoxidation of linoleic acid.Eiyo to Shokuryo,1996,19:210-214.

6 Lv HT(吕海涛),Sun HF(孙海峰),Qu BH(曲宝涵),et al.Simultaneous determination of six phenolic compounds in apple juice by high performance liquid chromatography.Chin J Anal Chem(分析化学),2007,35:1425-1429.

Identification of Epicatechin fromM esona procum bensHem sl

Q IU Ting＊,L IN Xiao-cui,WANGBi-yu
College of Chem istry and Chem ical Engineering,Fuzhou University,Fuzhou,Fujian 350108,China

Sample was separated and prepared through HPLC from the ethanol extract ofM esona procum bensHemsl,and itwas identified as epicatechin by ultraviolet spectrum,mass spectrum,infrared spectrum and NMR.The separation and preparation method for epicatechin fromM.procum bensHemslwas established.

M esona procum bensHemsl;epicatechin;identification

Q503;R284.1

A

1001-6880(2010)05-0798-03

2009-03-20 接受日期:2009-07-10

福建省科技厅重点资助项目(2007N0043)

＊通讯作者 Tel:86-591-22866234;E-mail:tingqiu@fzu.edu.cn