胆囊结石患者胆道幽门螺杆菌的检测探析

徐庆 顾国平 张立红

(江苏省无锡市中医医院检验科 江苏无锡 214001)

胆囊结石患者胆道幽门螺杆菌的检测探析

徐庆 顾国平 张立红

(江苏省无锡市中医医院检验科 江苏无锡 214001)

目的 探讨胆道幽门螺杆菌是否形成胆囊结石的重要因素。方法 在我院选取2008年6月至2010年8月的胆结石患者50例作为实验组,另外选取非胆结石患者35例作为对照组,并采用酶联免疫吸附试验以及免疫组织化学技术对实验组与对照组的结石、胆囊黏膜中的幽门螺杆菌以及结石进行检测。结果 实验组中胆汁与结石幽门螺杆菌的阳性率明显高于胆囊黏膜的阳性率,具有明显差异。结论 单纯的幽门螺杆菌并不能促成胆囊结石的形成,但是不能排除它是形成胆囊结石的因素之一。

胆囊胆石 胆道 幽门螺杆菌

胆结石在我国是一个高发率的疾病,而且也会导致其他的疾病。它是引起重症胆道感染最终产生胆道肿瘤的首要原因。因此预防以及治疗胆道结石就具有很重要的迫切性。我们需要加深对胆结石形成机制的探索,从而能够更好的对胆结石进行研究。本研究就这方面进行了研究,取得了较好的效果,报道如下。

1 临床资料

在我院选取2008年6月至2010年8月的胆结石患者50例作为实验组,男性26例,女性24例,年龄27～81岁,平均年龄51岁。所有被试都因患有慢性胆囊炎或胆囊结石进行了腹腔镜胆囊切除手术。另外选取非胆结石患者35例作为对照组,男性12例,女性13例。年龄26～82岁,平均年龄50岁。所有被试因非胆结石病进行过胆囊切除术。实验组患者在手术前3d没有服用抗生素。胆囊组织采用中性的福尔马林固定。其胆汁和结石标本也在无菌条件下利用无菌注射器进行采集,置于冰箱内保存。

2 方法

2.1 实验材料

采用酶联免疫吸附试验以及免疫组织化学技术对实验组与对照组的结石、胆囊黏膜中的幽门螺杆菌以及结石进行检测。

2.2 胆汁、结石检测

2.2.1 胆汁、结石检测步骤 刮取被试结石表面与中心成分大约6kg,碾碎并且加入5mL的生理盐水,抽取其中的2mL放入PV管中。胆汁的标本在常温下融化,再抽取其中的1mL放进PV管,加入1mL的生理盐水。将其在混合器进行摇匀混合,再采取以下步骤: (1)把PV管放入4℃的离心机中,12000转,10min离心,4℃保存,等待检测;(2)拿出酶标版,按照顺序依次加入100uL阳性、100uL阴性对照液以及100uL待测样品,并对标本进行编号;(3)在对照液与样品液中都假如50uL的酶标溶液,进行彻底摇匀混合;(4)在恒温箱中孵育1h;(5)进行6洗涤,每次洗涤之间间隔15s;(6)每孔加入A、B液各50uL;(7)在恒温下孵育15min;(8)每孔加进50uL终止液,终止其反应。

2.2.2 胆汁、结石检测标准 30min后在酶标仪上读取数值。临界值:阴性值×150%+0.06;样品值大于临界值则为阳性,小于临界值则为阴性。

2.3 胆囊黏膜检测

利用PV9000免疫组化对胆囊黏膜中的幽门螺杆菌进行检测。

表1 实验组胆汁、结石与胆囊黏膜的幽门螺杆菌检测结果

2.4 统计学方法

SPSS 13.0对数据进行处理,采用卡方检验,P<0.05则差异显著。

3 结果

实验组结石、胆汁以及胆囊黏膜的幽门螺杆菌检测结果。在实验组中,50例胆囊黏膜中有11例幽门螺杆菌检测呈阳性,36例胆汁标本中有22例成阳性,42例结石标本中有30例成阳性。胆汁与结石的幽门螺杆菌的阳性率明显高于胆囊黏膜组的,差异显著,(表1)。

在对照组中,35例胆囊黏膜中有10例幽门螺杆菌检测呈阳性, 26例胆汁标本中有15例呈阳性,胆汁的幽门螺杆菌的阳性率明显高于胆囊黏膜组的,差异显著。

4 讨论

幽门螺杆菌呈S形或者是螺旋状,其中主要的毒性因子具有粘附素、粘液酶、尿素酶等等。幽门螺杆菌的感染成遍及式分布。不同国家,不同地区它的感染力都存在着明显的差异。随着年龄的增长,感染还会出现明显的家族聚集性。从研究中可以发现对照组也就是非胆结石患者于胆结石患者的胆囊黏膜与胆汁的阳性率之间并没有显著差异。但是也不能因此而妄下结论认为幽门螺杆菌对于胆结石的形成没有相关性。它可能会有以下可能性:(1)幽门螺杆菌成为致病菌可能需要一定的条件,也就是说可能需要一定的条件才会导致胆结石的形成;(2)可能与油门螺杆菌的毒性有关,虽然有感染可是并不一定会引起发病;(3)幽门螺杆菌可能是形成胆结石的因素之一,通过与其他因素的共同作用最最终才会导致胆结石的形成。

不管怎样,目前对于胆道系统螺杆菌的检测还处于初级阶段,检测结果还有很大的差异,对于螺杆菌与胆结石形成之间的相关性还没有完全确定。所以,随着关于这方面研究的不断深入,螺杆菌与胆结石的形成、恶化之间的关系会日益明朗化。

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2011-08-13