布地奈德雾化吸入对哮喘患儿外周血Th1/Th2平衡的调节作用

赵敏芳，吴香君

(1.浙江省台州市黄岩区计划生育指导站，浙江 台州 318020; 2.浙江省台州市第一人民医院，浙江 台州 318020)

支气管哮喘是一种以气道高反应性和慢性炎症性气道阻塞为特征的变态反应性疾病，许多细胞因子和炎性介质参与了这个病理过程。近年来的研究证实，支气管哮喘的发病机制主要与T1/T2型细胞因子比例失衡密切相关[1]，而白细胞介素4(IL－4)和γ－干扰素(IFN－γ)是维持Th1/Th2细胞比例的关键分子。布地奈德混悬液属第2代肾上腺皮质激素，有较高的糖皮质醇受体结合力，抗感染效果强，是目前唯一可雾化给药的吸入型皮质激素[2－3]。近年来动物研究发现，布地奈德雾化吸入具有调节哮喘大鼠Th1/Th2免疫平衡的作用[4]，但对哮喘患儿外周血Th1/Th2细胞因子的调节作用国内外鲜有报道。笔者观察布地奈德雾化吸入对哮喘患儿外周血IL－4，IFN－γ，IgE水平的干预及患儿肺功能的影响，并以健康儿童作对照，探讨其对外周血Th1/Th2平衡的调控作用及防治哮喘的作用机制。现报道如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料

选择台州市第一人民医院儿科门诊2009年6月至2010年3月就诊急性发作期的哮喘患儿45例作为治疗组，诊断均符合中华医学会儿科分会呼吸学组制订的哮喘诊断标准;其中男24例，女21例;年龄9～14岁，平均(11.7±1.9)岁;所有患儿在纳入研究前4周内均无感染性疾病史和免疫抑制剂应用史，未曾用过类似白三烯受体拮抗剂、色甘酸钠、酮替芬或其他抗组胺类药物，排除合并皮质醇增多症、佝偻病、营养不良者，无心、肝、肾等严重的器质性疾病。另取正常儿童(本院同期健康体检儿童)30例作为对照组，其中男 16例，女 14例;年龄 8～14岁，平均(11.5±1.7)岁。两组患者在性别、年龄方面比较无显著性差异(P＞0.05)，具有可比性。

1.2 治疗方法

治疗组予以布地奈德混悬液(即普米克令舒，阿斯利康制药有限公司)1 mL/次，采用压缩雾化吸入机雾化吸入，2次/d，15～20 min/次，连用1周。分别在治疗前后抽取静脉血检测IL－4和IFN－γ，并进行日夜间症状评分，而对照组仅在入组前测定1次。

1.3 观察指标

IL－4和IFN－γ检测:用淋巴细胞分离液从肝素抗凝血分离外周血单个核细胞(PBMC)，1×109/mL细胞加入植物血凝素(PHA)100 g/L，37℃、5%CO2培养 48 h，收集上清液，用双抗体夹心ELISA法检测IL－4和IFN－γ含量。试剂盒购于法国Daclone公司，严格按试剂盒说明书进行操作。

日夜间症状评分:日间症状记分0分为无咳嗽、胸闷、气喘、呼吸困难等症状;1分为症状轻或间隙出现，仅轻微不适，可能被忽视;2分为症状中度或频繁出现，表现为不适或影响正常活动至少1次;3分为症状持续，影响活动。夜间症状记分0分为夜间无症状;1分为憋醒1次或早醒症状;2分为憋醒2次以上(包括早醒的症状);3分为夜间经常憋醒，但可间断入睡;4分为失眠，端坐呼吸，不能平卧。

1.4 统计学方法

2 结果

2.1 两组治疗前后患儿血浆IL－4和IFN－γ水平变化

治疗组患儿治疗前培养上清PBMC中IL－4水平明显高于对照组，IFN－γ水平明显低于对照组(均 P＜0.01)，经布地奈德雾化吸入治疗1周后，患儿IL－4水平较治疗前明显降低，IFN－γ水平较治疗前上升(P＜0.01或 P＜0.05)。结果见表1。

表1 对照组与治疗组治疗前后IL－4和IFN－γ水平比较(±s)

表1 对照组与治疗组治疗前后IL－4和IFN－γ水平比较(±s)

注:与对照组比较，▲P ＜0.01;与治疗前比较，＊P＜0.05，#P ＜0.01(下表同)。

对照组(n=30)治疗组(n=45)治疗前治疗1周后32.25 ± 14.67 68.57 ± 21.63▲39.67 ± 16.81#45.91 ± 19.68 24.82 ± 8.26▲39.52 ± 17.42＊

2.2 治疗组患儿治疗前后日夜间症状评分

治疗组患儿经布地奈德雾化吸入治疗1周后，日夜间症状评分均较治疗前明显降低(均 P＜0.01)。见表2。

表2 治疗组患儿治疗前后日夜间症状评分(±s)

表2 治疗组患儿治疗前后日夜间症状评分(±s)

治疗前治疗1周后2.8 ± 0.6 0.8 ± 0.3#3.2 ± 0.8 1.0 ± 0.4#

3 讨论

随着免疫学、分子生物学的发展，越来越多的研究证明Th1/Th2失衡引起的免疫功能紊乱在哮喘发病机制中起着重要作用[5]。正常情况下，Th1细胞分泌IL－2和IFN－γ，促进Th0细胞向Th1分化，同时抑制Th2型细胞因子的分泌;Th2细胞分泌IL－4，IL－5，IL－13等，其中IL－4是关键分子，可抑制IFN－γ分泌，促进Th0细胞向Th2分化，促进Th2细胞分泌IL－5和IL－13，从而募集嗜酸性粒细胞，介导B细胞分泌IgE，最终导致哮喘的一系列病理生理变化。哮喘时Th1/Th2型细胞因子平衡失调，Th2型细胞效应增强，Th1型细胞效应减弱，尤其是IL－4/IFN－γ的比例与哮喘的进展密切相关，因而常以此比例来间接反映Th1/Th2的比例。调整Th1/Th2平衡，纠正Th1细胞向Th2细胞漂移状况，使免疫反应由Th2型向Th1型逆转，是目前治疗哮喘的最有效途径[6]。

布地奈德是目前临床应用最广泛的吸入性糖皮质激素。吸入的布地奈德首先穿过细胞膜，与细胞质内的激素受体结合，再穿透细胞核膜，进入细胞核起到抗炎作用。未与激素受体结合的布地奈德可与长链不饱和脂肪酸通过酯化形成复合物而无活性，当激素受体从细胞核内出来后，该复合物又通过酯解作用游离，与激素受体结合，再进入细胞核而抗炎，客观上延长了在肺部的储留时间，从而加强了肺部的局部抗炎效果。而这种独特作用仅在肺部组织细胞中发生，在血中布地奈德会被迅速清除掉，从而不会增加全身不良反应[2，7]。金小红等[4]动物研究发现，哮喘急性发作时存在Th1/Th2失衡，布地奈德雾化吸入可调节Th1/Th2的平衡。左志通等[8]通过临床研究发现，Th1/Th2失衡与哮喘发病密切相关，布地奈德雾化吸入可通过调节Th1/Th2的平衡而治疗哮喘。本研究结果显示，治疗组哮喘患儿治疗前培养上清PBMC中IL－4水平明显高于对照组，IFN－γ水平明显低于对照组。说明哮喘患儿存在着Th1/Th2平衡失调，免疫状态由Th1向Th2“克隆漂移”。本研究结果发现，治疗组经布地奈德雾化吸入治疗1周后，患儿IL－4水平较治疗前明显降低，IFN－γ水平较治疗前上升，同时患儿日夜间症状评分明显改善。表明布地奈德雾化吸入能调节Th1/Th2细胞因子平衡，使免疫反应由Th2型向Th1型逆转，从而达到治疗哮喘的目的。

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[3]Mirici A，Meral M，Akgun M.Comparison of the efficacy of nebulised budesonide with parenteral corticosteroids in the treatment of acute exacerbations of chronic obstructive pulmonary disease[J].Clin Drug Invest，2003，23(1):55－62.

[4]金小红，李昌崇，陈存国，等.支气管哮喘大鼠血管内皮生长因子与γ－干扰素、白细胞介素－4变化的相关性及布地奈德干预对其的影响[J]. 实用儿科临床杂志，2009，24(4):282－284.

[5]韩诗淼，崔雁辉.支气管哮喘患者外周血单核细胞因子Th1/Th2失衡的检测[J].中国基层医药，2007，14(3):439－440.

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[8]左志通，陈宝华，王 旭，等.布地奈德雾化吸入对轻中度支气管哮喘患者Th1/Th2细胞因子平衡的影响[J].临床肺科杂志，2010，15(2):177－178.