润降利膈颗粒的制备和质量控制＊

董军伟，李国川，焦立红，彭安堂

(1.河北省石家庄市中医院制剂室，河北 石家庄 050051;2.河北医科大学中医学院，河北 石家庄 050091)

润降利膈丸是我院注册制剂(注册号为冀药制字Z20051118)，由北沙参、郁金、柴胡、枳壳、茯苓、浙贝、豆蔻、瓦楞子、白及、丹参10味中草药组方研制而成，具有养阴益胃、顺气开郁之功效，对胃阴不足、肝气犯胃所致胃气上逆、吞咽不利、胸闷烧心、胃嘈杂、反胃、腹胀等有良好的治疗效果，用于治疗食道炎、胃炎的效果显著。笔者在原水丸剂的基础上将其改制成颗粒剂，以方便患者服用，提高疗效，并以柚皮苷含量为指标，采用正交试验法优选颗粒剂工艺。现将制备工艺及质量控制方法报道如下。

1 仪器与试药

岛津LC-10AT型高效液相色谱仪，KQ-500DV型数控超声清洗机(昆山市超声仪器有限公司);TD200型分析天平(天津天平仪器有限公司);DHG-9070A型电热鼓风干燥箱(上海一恒科学仪器有限公司)。润降利膈颗粒(石家庄市中医院制剂室，批号为20100416，20100417，200418);郁金对照药材(批号为 121008-200304)、柴胡对照药材(批号为120992-200301)、丹参对照药材(批号为0766-200417)、枳壳对照药材(批号为120981—200403)均购自中国药品生物制品检定所;所用试剂均为分析纯。

2 方法与结果

2.1 煎煮工艺优选

2.1.1 柚皮苷含量测定[1-2]

色谱条件:色谱柱为 Kromasil C18柱(200 mm ×4.6 mm，5 μm)，柱温为室温，流速为1.0 mL/min，流动相为乙腈-0.1%磷酸溶液(20 ∶80)，等度洗脱，检测波长为 283 nm，进样量为 20 μL。理论板数按柚皮苷不低于3 000。

溶液制备:精密称取柚皮苷对照品6.61 mg，置25 mL容量瓶中，加甲醇溶解，并稀释至刻度，得到每1 mL含264.50 μg的对照品溶液。精密量取提取液50 mL置蒸发皿中，挥干，残渣用精密量取的50 mL甲醇溶解，回流提取2 h，取出放冷，离心;取上清液浓缩至5 mL，移至25ml容量瓶中，用甲醇定容，摇匀，静置，过0.22 μm微孔滤膜，即得供试品溶液。

标准曲线绘制:取对照品溶液，以甲醇溶液分别配制质量浓度为 264.50，132.25，66.13，33.06，26.45，13.23 μg/mL 的对照品溶液，取上述溶液，分别进样20 μL，测定。以柚皮苷质量浓度为横坐标(X)、峰面积积分值为纵坐标(Y)绘制标准曲线，回归方程为Y=14 477.828 7 X+25 249.230 5，r=0.999 5(n=6)。结果表明，柚皮苷质量浓度在13.23～264.50 μg/mL范围内与峰面积积分值线性关系良好。

样品含量测定:取正交试验项下各提取液，按上述方法测定柚皮苷含量。

2.1.2 正交试验

选加水倍数(因素A)、煎煮时间(因素B)、煎煮次数(因素C)为考察因素，以柚皮苷的含量为评价指标，对润降利膈颗粒的煎煮工艺进行优选。用L9(34)正交表安排试验，因素水平见表1。按处方量比例分别称取北沙参5 g，郁金3.3 g，柴胡2 g，炒枳壳3.3 g，茯苓 5 g，豆蔻 2 g，白及 3.3 g，浙贝母 3.3 g，丹参 5 g，瓦楞子(煅)3.3 g，平行称取9份，按L9(34)表下条件进行提取(每次提取前均加水浸泡40 min)，滤过，合并滤液。依法制备供试品溶液，测定柚皮苷含量。正交试验结果见表2，方差分析结果见表3。可见，最佳煎煮工艺为A3B2C2，即加12倍量的水，煎煮2次，每次煎煮60 min。

表1 因素水平表

2.2 质量控制

2.2.1 性状

本品为棕褐色颗粒剂。

2.2.2 薄层色谱鉴别

丹参[3]:精密称取润降利膈颗粒粉末10.00 g，加乙醚50 mL超声提取30 min，过滤，挥干乙醚，残渣加乙酸乙酯5 mL溶解，作为供试品溶液;精密称取丹参对照药材粉末1.00 g，加乙醚50 mL超声提取30 min，过滤，过滤，挥干乙醚，残渣加乙酸乙酯5 mL溶解，作为对照药材溶液;按处方比例取不含丹参药材的润降利膈颗粒粉末8.55 g，按上述方法制成阴性对照品溶液。分别吸取上述3种溶液各20 μL，点于同一硅胶G板上，以苯-乙酸乙酯(19∶1)为展开剂，展开，取出，晾干。结果供试品溶液色谱中，在与对照药材溶液色谱相应位置上显相同颜色的斑点，阴性对照无干扰(图1 A)。

表2 正交试验结果表

表3 方差分析结果

枳壳[4]:精密称取润降利膈颗粒粉末10.04 g，加乙醇超声提取30 min，滤过，滤液浓缩至2 mL作为供试品溶液;精密称取枳壳对照药材粉末1.05 g，加乙醇超声提取30 min，滤过，滤液浓缩至2 mL作为对照药材溶液;按处方比例取不含枳壳的润降利膈颗粒9.08 g，按上述方法制成阴性对照品溶液。取上述3种溶液各20 μL，点于同一硅胶G板上，以氯仿-甲醇(10∶1)为展开剂，展开，取出，晾干，置紫外灯365 nm下检视。结果供试品溶液色谱中，在与对照药材溶液色谱相应位置上显相同颜色的荧光斑点，阴性对照无干扰(见图1 B)。

柴胡[5-6]:精密称取润降利膈颗粒粉末10.23 g，加甲醇50 mL，超声提取30 min，滤过，滤液浓缩至适量作为供试品溶液;精密称取柴胡对照药材粉末1.02 g，加甲醇50 mL，超声提取30 min，滤过，滤液浓缩至适量作为对照药材溶液;按处方比例取不含柴胡的阴性对照药材共9.64 g，按上述方法制成阴性对照品溶液。分别吸取上述3种溶液各20 μL，点于同一硅胶G板上，以乙酸乙酯-95%乙醇-水(18∶2∶1)为展开剂，展开，取出，烘干，置紫外灯365 nm下检视。结果供试品溶液色谱中，在与对照药材溶液色谱相应位置上显相同颜色的荧光斑点，阴性对照无干扰(图1 C)。

郁金[7-8]:精密称取润降利膈颗粒粉末10.01 g，加甲醇50 mL超声提取40 min，过滤，滤液浓缩至1 mL作为供试品溶液;精密称取郁金对照药材粉末1.00 g，加甲醇50 mL超声提取40 min，过滤，滤液浓缩至1 mL作为对照药材溶液;按处方比例取不含郁金药材的润降利膈颗粒粉末9.04 g，按上述方法制成阴性对照品溶液。分别吸取上述3种溶液各10 μL，点于同一硅胶G板上，以氯仿-甲醇-甲酸(96∶4∶0.7)为展开剂，展开，取出，105℃烘干，置紫外灯365 nm下检视。结果供试品溶液色谱中，在与对照药材溶液色谱相应位置上显相同颜色的荧光斑点，阴性对照无干扰(图1 D)。

图1 薄层色谱图

3 讨论

本制剂由水丸改为颗粒剂后，方便患者了服用，尤其方便了食道炎患者。通过正交设计确定了润降利膈颗粒的提取工艺为加12倍水，每次煎煮60 min，煎煮2次。采用丹参、枳壳、柴胡、郁金的薄层色谱鉴别作为质量控制方法，结果明显，斑点清晰，阴性对照无干扰，重现性好。薄层色谱法作为医院制剂的质量控制方法，不但能满足药监部门的要求，而且操作方便、节约成本，待条件成熟时可将定量分析方法引入制剂质量控制。综上所述，本制剂工艺及质量控制方法可靠。

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