不同栽培方式对灵芝活性成分的影响*

袁学军，陈永敢，陈光宙，陈忠荫，李艳丽

（琼州学院生物科学与技术学，海南 三亚 572000）

灵芝的生物活性成分十分丰富，丰富的生物活性成分决定了它功能的多样性[1]。据有关研究表明，目前已分离到灵芝的150余种活性成分，有多糖类、核苷类、生物碱类、氨基酸、蛋白质类、三萜类和矿质元素等[2]，具有抗肿瘤、保肝解毒、预防心血管系统疾病、抗过敏、抗衰老、抗神经衰弱、治疗高血压、慢性支气管炎、支气管哮喘等作用[3]。除医学外，灵芝在食品、饮品以及保健品产业都占有一定的市场与地位，具有较高的观赏价值及经济价值[4]。灵芝既不同于一般药物对某种疾病起治疗作用，亦不同于一般营养保健食品只对某一方面营养素的不足进行补充和强化，它的独特之处主要在于它是在整体上双向调节人体机能平衡，调动机体内部活力，调节人体新陈代谢，提高自身免疫能力，促使全部的内脏或器官机能正常化，从而从根本上达到治病强身保健的目的[3]。

目前，国内外学者已经对药用灵芝中活性成分进行不同的研究：灵芝活性蛋白[5-8]、灵芝多糖[9-11]、灵芝三萜[12-14]和灵芝酸[15-17]等，到目前为止，还没有关于不同栽培方式对灵芝活性成分的影响的报道。

1 材料与方法

1.1 材料和药品

1.1.1 材料

灵芝采收后及时将污物清理干净，在60℃的条件下在干燥箱内干燥24 h，然后用20目的粉碎机粉碎，最后用带拉链的塑料带密封备用。

1.1.2 药品

葡萄糖，广州化学试剂厂；熊果酸和香草醛，上海晶纯试剂有限公司；牛白蛋白、考马斯亮蓝G250，国药集团化学试剂有限公司；活性炭、蒽酮、三氯甲烷、磷酸、冰乙酸、氯化钠、硫酸铵、碳酸氢钠、盐酸、氢氧化钠、无水乙醇、硫酸和高氯酸均为分析纯。

1.2 方法

1.2.1材料来源

野生灵芝来源于尖峰岭自然保护区，栽培用的菌种来源于从尖峰岭自然保护区获得的经过分离出的同一管母种，栽培料用直径15 cm、长20 cm印度紫檀的木段，发菌结束后进行不同方式的栽培，其他条件均相同。

1.2.2 测定方法

灵芝多糖的测定参考蒽酮-硫酸法[18]，用葡萄糖做的标准曲线为：y=0.7622x+0.0122，R2=0.998。

灵芝蛋白的测定参考考马斯亮蓝G-250法[18]，用牛血清白蛋白做的标准曲线为：y=0.6643x+0.0009，R2=0.999。

灵芝三萜的测定参考直接光度法测定法[19]，用熊果酸做的标准曲线为：y=0.4144x-0.01，R2=0.9934。

1.3 统计分析

用南京农业大学王韶华教授发明的stst软件进行统计分析。

2 结果与分析

不同栽培方式对灵芝活性成分的影响见表1。

表1 不同栽培方式对灵芝活性成分的影响

从表1可知，灵芝多糖方面，尖峰岭处理的和野生的相比无显著性差异，可能是由于菌种来源于同一子实体，前期一个是在实验室中发菌，一个是在自然中发菌，但子实体生长阶段条件则基本相同的缘故；其他处理之间均存在显著性差异，其中椰糠处理的最高，可能是菌丝也能从椰糠中吸收一部分糖分，且椰糠中糖分相对丰富，而太白山处理的多糖含量最低，可能是由于太白山土壤贫瘠造成的，灵芝多糖含量由高到低的顺序为椰糠、尖峰岭、野生、果园、太白山，因此，灵芝多糖的含量与栽培基质有直接关系。

灵芝蛋白方面，尖峰岭处理的和野生的相比无显著性差异，造成的原因与多糖相同，其他处理之间均存在显著性差异，其中椰糠处理的最高，但西校区处理的最低，这与多糖含量不同。灵芝蛋白含量由高到低的顺序为椰糠、尖峰岭、野生、太白山、果园，因此，灵芝蛋白的含量也与栽培基质有直接关系。

灵芝三萜方面，尖峰岭处理的和野生的相比无显著性差异，其他处理之间均存在显著性差异，其中椰糠处理的最高，西校区处理的最低，灵芝三萜含量由高到低的顺序为椰糠、太白山、野生、尖峰岭、果园，因此，灵芝蛋白的含量也与栽培基质有直接关系。

3 讨论与结论

灵芝多糖、蛋白、三萜类化合物是灵芝中的主要活性物质，也是衡量灵芝质量的重要指标[20]。该研究对同一灵芝菌不同栽培方式的多糖、蛋白和三萜含量进行了比较，结果表明，由于分离的子实体来源于尖峰岭，前期人工发菌，出菇返回原生地，出菇条件相同，所以和野生相比，3种活性成分的含量无显著性差异，但不同处理之间差异性极显著，这说明产地的子实体活性物质的含量不同，这可能与周围基质中的养分含量的多少有关。

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