羊角拗根脂溶性成分的GC-MS分析

晏小霞，李晓霞，张新蕊，王茂媛，王祝年

中国热带农业科学院热带作物品种资源研究所农业部华南作物基因资源与种质创制重点实验室，儋州571737

羊角拗［Strophanthus Divaricatus(Loureiro) Hooker et Arnott］为夹竹桃科(Apocynaceae)羊角拗属(Strophanthus de Candolle)植物，在我国主要分布于海南、福建、广东、广西、贵州等地［1］。羊角拗为传统民间草药，其根、茎、叶、种子、花均可入药［2］，具有强心、消肿、利尿、镇静、止痛、止痒、杀虫等功效，用于治疗风湿关节痛、小儿麻痹后遗症、多发性脓肿、腱鞘炎、皮癣、毒蛇咬伤、跌打、骨折、乳痈、心力衰竭等症［3］;其茎、叶民间也常用作杀虫剂。

羊角拗全株均有毒，其毒性成分主要为强心苷。目前已分离鉴定了羊角拗苷、羊角拗异苷、夹竹桃糖苷、洋地黄糖苷、铃兰新苷、塔洛糖苷、鼠李糖苷、考多苷、考多异苷、毒毛旋花苷等20多种强心苷［4-8］。我国的羊角拗资源较为丰富，为有效开发羊角拗资源，寻找其中有药用价值的生物活性成分，笔者采用气相色谱-质谱联用(GC-MS)的方法对羊角拗根的脂溶性成分进行分析。

1 材料与方法

1.1 材料

羊角拗根于2009年8月份采自海南省临高县和舍镇，经中国热带农业科学院热带作物品种资源研究所王祝年研究员鉴定为夹竹桃科羊角拗属植物羊角拗［Strophanthus Divaricatus(Loureiro)Hooker et Arnott］，凭证标本(20090820)存放于中国热带农业科学院热带作物品种资源研究所。

1.2 方法

1.2.1 脂溶性成分提取方法

取自然风干羊角拗根粉碎后用95%乙醇室温浸提3次，减压回收乙醇至无醇味。将乙醇提取物分散于水中成悬浊液，经石油醚萃取后减压浓缩得到黑色油状提取物备用。

1.2.2 GC-MS分析

试验用毛细管气相色谱-质谱联用仪(HP6890/ 5975C GC/MS联用仪，美国安捷伦公司)对脂溶性成分进行分析。

气相色谱条件:色谱柱为Zebron ZB-5MSI，5% Phenyl-95%DiMethylpolysiloxane(30 m×0.25 mm ×0.25 μm)弹性石英毛细管柱，柱温45℃(保留2 min)，以5℃/min升温至320℃，保持2 min;汽化室温度250℃;载气为高纯He(99.999%);柱前压7.62 psi，载气流量1.0 mL/min;进样量1 μL;分流比40∶1，溶剂延迟时间4 min。

质谱条件:离子源为EI源;离子源温度230℃;四极杆温度150℃;电子能量70 eV;发射电流34.6 μA;倍增器电压1108 V;接口温度280℃;质量范围20～450 amu。

2 结果与分析

按上述条件对羊角拗根的脂溶性成分进行GCMS分析，离子流程图见图1。通过HPMSD化学工作站，结合NIST05质谱图库和WILEY275质谱图库进行鉴定，确认了其中 27种成分，占总含量的60.86%。按峰面积归一化法计算出各化学成分的相对含量，结果见表1。

图1 羊角拗根脂溶性成分总离子流图Fig.1 Total ion chromatogram of the liposoluble components from roots of Strophanthus Divaricatus

表1 羊角拗根脂溶性成分的GC-MS分析结果Table 1 Chemical constituents of the liposoluble components from roots of Strophanthus Divaricatus

2 3 4 0.4 3 麦角甾-5 -稀醇E r g o s t -5 -e n o l C 2 8 H 48 O 4 0 0 0.5 8 0 2 4 4 0.8 4 豆甾醇S t i g m a s t e r o l C 29 H 48 O 4 1 2 2.5 0 3 2 5 4 1.5 5 蒲公英赛酮T a r a x e r o n e C 30 H 48 O 4 2 4 2.8 4 4 2 6 4 2.6 8 α -香树脂醇α -A m y r i n C 30 H 50 O 4 2 6 1.3 0 6 2 7 4 3.7 9 何帕-2 2 ( 2 9 ) -烯-3 β -醇H o p -2 2 ( 2 9 ) -e n -3 β -o l C 30 H 50 O 4 2 6 3 2.7 0 1

从表1可见，羊角拗脂溶性成分主要为三萜类，占总峰面积量的36.85%，此外还有酯类(9.02%)、脂肪酸(4.43%)、甾体(3.49%)等成分。在已鉴定的27个化学成分中，相对含量大于1%的有10个，其中含量较高的成分依次为何帕-22(29)-烯-3β-醇(32.70%)、棕榈酸乙酯(6.35%)、2-十五烷酮(4.76%)、蒲公英赛酮(2.84%)、豆甾醇(2.50%)、棕榈酸(2.08%)。

3 讨论与结论

本研究发现，在羊角拗根脂溶性成分中何帕-22 (29)-烯-3β-醇含量最高，占总量的32.70%。何帕烷三萜类化合物广泛存在于细菌中，在真菌以及高等植物中也能发现此类化合物的踪迹。研究发现，细菌源的何帕烷三萜类化合物对细胞膜的稳定具有重要作用［9］，而植物源的何帕烷三萜类化合物作用研究较少。本研究发现羊角拗中何帕-22(29)-烯-3β-醇含量较高，为下一步研究提供了新的方向。

棕榈酸具有特殊香气和滋味，按我国GB2760-89规定，可用于配制各种食用香料，也用作消泡剂和其他食品添加剂的原料。棕榈酸异丙酯、棕榈酸异辛酯具有与皮肤相容性好、滋润皮肤、渗透力强等优点，被广泛应用于人体各种护肤品中［10］。此外，棕榈酸还具有抗肿瘤、抗衰老活性［11，12］。羊角拗根脂溶性成分中棕榈酸及其酯类含量较高(8.43%)，可以开发作为提取棕榈酸的原料。

蒲公英赛酮广泛存在于多个科属的植物中，具有抗癌、消炎［13］、杀虫［14］等活性，具有广阔的开发前景。本研究发现羊角拗根脂溶性成分中含有一定量的(2.84%)蒲公英赛酮，为深入研究羊角拗在抗癌、抗病毒以及杀虫、抑菌等方面的活性提供了理论依据。

本研究运用GC-MS的方法，对羊角拗根脂溶性成分进行了分析，共鉴定出27个化合物，占其总量的60.86%，对其未鉴定出的成分有待进行进一步研究。

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