阻塞性呼吸暂停低通气综合征患者血清sCD40L、IL-18、IL-6及MMP-9的水平及意义

范嘉铨，陈飞鹏，黄华兴

(广州医学院第二附属医院呼吸内科，广东广州510260)

阻塞性呼吸暂停低通气综合征患者血清sCD40L、IL-18、IL-6及MMP-9的水平及意义

范嘉铨，陈飞鹏，黄华兴

(广州医学院第二附属医院呼吸内科，广东广州510260)

目的探讨阻塞性睡眠呼吸暂停低通气综合征(OSAHS)患者血清炎症因子(sCD40L、IL-18、IL-6、MMP-9)的临床意义。方法选择OSAHS患者(其中轻度30例，中、重度30例)为实验组，另选择健康者30例为正常对照组，测定各组血清sCD40L、IL-18、IL-6、MMP-9的水平。测定睡眠呼吸暂停低通气指数(AHI)、最低脉搏血氧饱和度(SpO2)。结果①比较正常对照组、轻度OSAHS组、(中、重度)OSAHS组血清sCD40L、IL-18、IL-6、MMP-9的水平，发现OSAHS组比正常对照组明显升高，差异均有统计学意义(P＜0.01)；②OSAHS组血清sCD40L、IL-18、IL-6、MMP-9水平密切相关，且分别与睡眠呼吸监测指标(AHI、最低SpO2)密切相关。结论OSAHS患者血清炎症因子sCD40L、IL-18、IL-6、MMP-9的水平升高，表明OSAHS是一种与炎症密切相关的疾病。

阻塞性睡眠呼吸暂停低通气综合征；可溶性CD40L配体；白细胞介素-18；白细胞介素-6；基质金属蛋白酶-9

阻塞性睡眠呼吸暂停低通气综合征(OSAHS)是指睡眠时上气道塌陷阻塞引起的呼吸暂停和通气不足，伴有打鼾、睡眠结构紊乱，频发血氧饱和度下降、白天嗜睡等症状，并可引发多脏器功能损害，是一种发病率高、严重影响生活和危及生命的疾病，是高血压、冠状动脉粥样硬化性心脏病、肺源性心脏病和脑卒中等心脑血管疾病的独立危险因素。根据国外不同国家流调资料研究[1]，伴有嗜睡症状的OSAHS患病率男性为4%～7.5%,女性约2%；国内流调资料显示，伴有嗜睡症状的OSAHS在成年人中的患病率为3%～5%[2]。近些年研究发现，OSAHS可能是一种炎症相关的疾病，多种炎性细胞、炎性因子参与OSAHS睡眠结构紊乱的发生、发展过程，但具体机制并不完全清楚。本研究旨在探讨OSAHS患者血清多种炎症因子的变化，为OSAHS炎症机制提供一定证据。

1 材料与方法

1.1 研究对象选择2O11年1月至2012年10月在广州医学院第二附属医院睡眠中心经多导睡眠监测仪(美国伟康Alice4)诊断为OSAHS的患者60例，均为男性，年龄24～56岁，平均(40±16)岁；体重指数(BMI)为(26.20 2.69)kg/m2。按照呼吸暂停低通气指数(AHI)将OSAHS组进一步分为轻度组(5次／h≤AHI＜15次／h)30例，中、重度组(15次／h≤AHI) 30例。选择同期在广州医学院第二附属医院就诊，

经多导睡眠监测仪监测AHI＜5次／h的年龄、BMI与OSAHS组相匹配的30例男性作为对照组。所有入选者均无冠心病史，无糖尿病，近2周内无感染、创伤和手术，未使用过抗炎药物，无全身性疾病(如恶性肿瘤、甲状腺功能减低症、肾上腺皮质增生症)，无长期服用非甾体类药和口服抗凝药等病史。各组研究对象年龄、体指数无统计学差异(P＞0．05)，具有可比性。

1.2 方法

1.2.1 多导睡眠呼吸监测(PSG监测)所有研究对象保证在安静舒适的状态下，应用美国伟康公司Alice4多导睡眠呼吸监测仪连续监测研究对象至少7h睡眠时的口鼻气流、胸腹呼吸运动、体位及鼾声，记录并计算出：睡眠呼吸暂停低通气指数(AHI)、最低SaO2等睡眠呼吸指数。OSAHS的诊断依据中华医学会呼吸病学分会睡眠呼吸疾病学组制定的诊断标准，即睡眠呼吸暂停低通气指数(apnea hypopnea index，AHI)，指平均每小时睡眠中呼吸暂停加上低通气的次数)≥5次／h。AHI＜5则排除OSAHS。

1.2.2 标本处理各组均于PSG监测的次日晨7：00空腹抽取静脉血4mL，尽快离心后取血清，置-80oC保存待测(严格按照试剂说明书要求)。

1.2.3 sCD40L、IL-18、IL-6、MMP-9的检测四者都是采用ELISA法。sCD40L、IL-6试剂盒购自上海蓝基生物有限公司，IL-18、MMP-9试剂盒购自美国R&D SYSTEMS，四者严格按照试剂说明书要求进行检测。四者采用的都是生物素双抗体夹心酶联免疫吸附法。两者在终止反应后30min内在波长450nm的酶标仪上读取数值，绘制标准曲线，根据标准品的浓度及对应的OD值计算出标准曲线的直线回归方程，再根据样品的OD值在回归方程上计算出对应的样品浓度。其他血脂成分由我院检验科完成。

1.2.4 统计学处理应用SPSS 13.0软件进行统计分析。数据用均数±标准差(x±s)表示，组间比较采用方差分析和LSD检验，变量间的相关性采用Spearman相关分析。P＜0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 OSAHS各组与正常对照组在年龄、体重、BMI的比较中，差异无统计学意义。

2.2 比较OSAHS组(轻度组、(中度、重度)组)与正常对照组血清sCD40L、IL-18、IL-6、MMP-9水平中发现OSAHS各组比正常对照组明显升高，差异均有统计学意义(见表1)。

2.3 OSAHS组的严重程度越重，sCD40L、IL-18、IL-6、MMP-9水平越高，差异有统计学意义。

2.4 OSAHS组血清sCD40L、IL-18、IL-6、MMP-9水平分别与睡眠呼吸有关监测指标密切相关(见表2)。

表1 各组基本情况比较

表1 各组基本情况比较

注：OSAHS：阻塞性睡眠呼吸暂停低通气综合征；AHI：呼吸暂停低通气次数；SpO2：脉搏氧饱和度；sCD40L：可溶性CD40L配体；IL-18：白细胞介素-18；IL-6：白细胞介素-6；MMP-9：基质金属蛋白酶-9；与对照组比较aP＜0.01；与轻度OSAHS组比较bP＜0.01；

组别例数AHI(次/h)最低SpO2(%)sCD40L(ng/L)IL-18(ng/L)IL-6（pg/ml）MMP-9(ng/L)正常对照组轻度OSAHS组中、重度OSAHS组F值P值30 30 30 1.35±0.98 8.91±3.00a54.99±16.49ab269.072＜0.01 89.67±3.45 80.05±7.35a65.97±8.63ab63.709＜0.01 1.32±0.77 3.88±0.90a8.86±2.25ab203.535＜0.01 9.18±5.14 22.60±3.79a41.89±6.76ab281.261＜0.01 12.3±2.85 27.23±3.56a35.45±6.59ab200.355＜0.01 715.08±358.23 130.610±290.37a3095.84±1059.91 98.809＜0.01

表2 OSAHS组血清sCD40L、IL-18、IL-6、MMP-9与睡眠呼吸指数间相关性

3 讨论

白细胞介素-18(IL-18)属于IL-1家族，具有免疫调节功能。它作为辅助性T细胞1型(Th1)细胞因子，能促进Th1分化，抑制B淋巴细胞合成IgE，诱导自然杀伤细胞或T淋巴细胞合成与释放IFN-γ。同时IL-18还刺激白细胞介素-8(IL-8)、白细胞介素-13(IL-13)、肿瘤坏死因子(TNF-α)及单核细胞集落刺激因子(GM-CSF)的合成，许多免疫细胞包括单核细胞、巨噬细胞、淋巴细胞、粒细胞都受IL-18的调控。临床研究[3，4]发现，血清基础IL-18水平增高可预测未来冠心病事件的发生，且其预测价值独立于经典的危险因子和其他炎性因子。

基质金属蛋白酶-9(MMP-9)是MMPs家族中重要成员，在动脉粥样硬化斑块处的血管重构、斑块的不稳定及其破裂而诱发的心脑血管疾病中都扮演着重要角色。Zauridakis等[5]对124例稳定型心绞痛患者的研究显示，MMP-9是冠状动脉病变进展的独立预测因子。Blankenberg等[6]研究显示，MMP-9/R279Q基因多态现象与稳定型心绞痛患者心血管事件的发生相关。

白细胞介素-6(IL-6)是一种多效细胞因子，是由单核细胞、T淋巴细胞、B淋巴细胞等分泌产生的，它能活化炎症细胞，诱导黏附分子和炎性趋化因子的表达，参与动脉粥样硬化的炎性反应过程。Ciftci等[7]研究发现IL-6水平在睡眠呼吸暂停综合征中增高，本研究结果提示IL-6水平与OSAHS的病情相关，与文献报道相符。

可溶性CD40L配体(sCD40L)是在T淋巴细胞中发现的，并通过与CD40结合在B细胞免疫应答中发挥重要作用。CD40和CD40配体都已经确定存在于一些其他类型的细胞中，包括血管内皮细胞、平滑肌细胞、单核细胞、巨噬细胞和血小板。在这些细胞中，CD40(与CD40结合)可触发各种炎症介质的细胞因子的表达：IL-1、IL-6、IL-12和肿瘤坏死因子-α；趋化因子、单核细胞趋化蛋白-1和IL-8；黏附分子、ICAM-1和VCAM-1；基质金属蛋白酶；生长因子；凝血组织因子。这些现象提示sCD40L在动脉粥样硬化各个阶段均起着关键的作用。国外研究[8]发现不稳定型心绞痛患者比健康人或稳定型心绞痛者有较高的血浆sCD40L水平，而且增高的sCD40L具有复发高风险性。

本研究结果发现血清中sCD40L、IL-18、IL-6、MMP-9水平在OSAHS患者与正常对照组相比明显增高(P＜0.01)，sCD40L、IL-18、IL-6、MMP-9水平与患者AHI呈正相关，与睡眠呼吸障碍事件时最低SpO2呈负相关，说明sCD40L、IL-18、IL-6、 MMP-9与OSAHS患者病情严重程度有关，OSAHS患者病情越重，sCD40L、IL-18、IL-6、MMP-9水平越高；血清sCD40L、IL-18、IL-6、MMP-9水平相互密切相关。OSAHS是一种氧化应激性疾病，睡眠中反复出现的间歇性低氧和再氧合对组织产生类似于缺血-再灌注的损伤，促使多种炎性细胞(如白细胞、单核细胞等)活化，产生过多的自由基、超氧阴离子等，直接损害内皮细胞，引起各种炎症因子的释放。本研究结果说明OSAHS存在明显的炎性反应，OSAHS可能是一种炎症相关的疾病。

[1]Udwadia ZF,Doshi AV,Lonkar SG,et al.Prevalence of sleepdisordered breathing and sleep apnea in middle-aged urban Indian men[J].Am J Respir Crit Care Med,2004,169(2):168-173.

[2]上海市医学会呼吸病学分会睡眠呼吸病学组.上海市30岁以上人群阻塞性睡眠呼吸暂停低通气综合征流行病学调查[J].中华结核和呼吸杂志，2003,26(5)：268-272.

[3]Hulthe J.McPheat W，Samnegard A,et a1．Plasma interleukin(IL)18 concentrations is elevated in patients with previous myoceardial infarction and related to severity of coronary atheroselero-sis independently of Creactive protein and IL-S[J]．Atherosclerosis，2006,188(2)：450-454.

[4]范嘉铨,陈飞鹏.阻塞性睡眠呼吸暂停低通气综合征患者血清白细胞介素-18、基质金属蛋白酶-9水平及意义[J].实验与检验医学,2011,29(3):224-226.

[5]Zouridakis E,Avanzas P,Arroyo-Espliguero R,et al.Markers of inflammation and rapid coronary artery disease progression in patients with stable angina pectoris[J].Circulation,2004,110(13): 1747-1753.

[6]Blankenberg S，Rupprecht HJ，Poifier 0，et a1．Plasnma concentrations and genetic variations of matrix metalloproteinase 9 and prognosis with cardiovascular disease[J]．Circulation，2003，107 (12)：1579-1585．

[7]Ciftci TU,Kokturk O,Bukan N,et al.The relationship between serum cytokine levels with obesity and obstructive sleep apnea syndrome[J].Cytokine 2004,28(2):87-91.

[8]Heeschen C,Dimmeler S,Hamm CW,et al.CAPTURE Study Investigators:soluble CD40 ligand in acute coronary syndromes[J].N Engl J Med 2003,348(12):1104-1111.

Expression and clinical significance of soluble CD40 ligand，interleukin-18，interleukin-6 and matrix metalloproteinase-9 in obstructive sleep apnea hypopnea syndrome patients

FAN Jiaquan,CHEN Feipeng,HUANG Huaxing.Second Affiliated Hospital of Guangzhou Medical University,Guangzhou 510260,China.

ObjectiveTo investigate the clinical significance of soluble CD40 ligand(sCD40L),interleukin-18(IL-18),interleukin-6(IL-6),matrix metalloproteinase-9(MMP-9)in obstructive sleep apnea hypopnoea syndrome(OSAHS)patients without complications.Methods All observed subjects were divided into 4 groups:control subjects,mild OSAHS,moderate OSAHS and severe OSAHS.Serum sDC40L,IL-18,IL-6,MMP-9 concentrations were measured and compared.Furthermore，the sleep apnea hypopnea index(AHI)and lowest pulse oxygen saturation(SpO2)were detected too.Results①Compared to control subjects,the serum levels of sCD40L,IL-18,IL-6 and MMP-9 were increased significantly in OSAHS patients(P＜0.01).②sCD40L,IL-18, IL-6 and MMP-9 related to each other and closely related AHI and SpO2respectively.Conclusion The serum levels of sCD40L, IL-18,IL-6 and MMP-9 were increased in OSAHS patients,indicated that OSAHS perhaps closely related to the inflammation.

Obstructive sleep apnea-hypopnea syndrome；Soluble CD40 ligand；Interleukin-18；Interleukin-6；Matrix metalloproteinase-9

:R766，R446.62文献识别码：A

1674-1129(2013)02-0115-03

10.3969/j.issn.1674-1129.2013.02.004

广州市医药卫生科技项目（201102A213011）

范嘉铨，男，1977年生，主治医师，呼吸病学研究。

陈飞鹏，教授，研究生导师，呼吸内科主任。