590例血培养病原菌耐药性分析

周建宁 江苏省涟水县人民医院 223400

近几年，抗生素不断更新使得临床对抗生素的依赖性越来越高，同时，随着临床抗生素的使用不规范、不合理，使细菌对抗生素的耐药性呈现多样化。新的耐药菌株的不断出现，使得细菌耐药性监测显得尤为重要，血液感染是临床常见的一种形式，起病重，易引起全身症状，预后较差，故及早发现、及早治疗尤为重要。现收集我院2012年1月－2013年12月血培养阳性病例，进行细菌分布及耐药性分析，结果如下。

1 材料与方法

1.1 标本来源 收集本院化验室2012年1月－2013年12月所有临床送检血培养结果阳性的病例，剔除同一患者相同培养结果。

1.2 试剂 血培养瓶：浙江康泰公司；细菌鉴定试剂：珠海迪尔细菌鉴定板，杭州天和微生化反应管；药敏纸片：浙江康泰公司；血平板及药敏M－H培养基：郑州安图；质控菌株：ATCC25923金黄色葡萄球菌，ATCC25922大肠埃希氏菌，ATCC27853铜绿假单胞菌。

1.3 方法 抽取患者血液5～10ml无菌注入血培养瓶中，孵育，每天混匀1次，按照《全国检验操作规范（第3版）》要求出现阳性指征接种血平板，阴性培养5d时盲种，如有细菌生长，细菌鉴定到种，按照美国临床和实验室标准协会（CLSI）2012版标准并结合江苏省《各种细菌必须纳入药敏实验》，选定药物纸片采用纸片扩散法（K－B法）做细菌药物敏感实验，结果采用WHONET5.6软件进行统计分析。

2 结果

2.1 细菌分布 590例患者分离菌株中，革兰阳性菌449株，占76.1%，革兰阴性菌141株，占23.9%，其具体分布见表1。

表1 血培养阳性细菌分布表（%）

2.2 主要细菌耐药情况

2.2.1 革兰阳性菌耐药情况。在金黄色葡萄球菌中，耐甲氧西林金黄色葡萄球菌（MRSA）的比例占79.4%，耐甲氧西林的表皮葡萄球菌和溶血葡萄球菌比例也分别达到75.3%和87.5%，而未发现耐万古霉素及替考拉宁葡萄球菌。革兰阳性葡萄球菌耐药情况见表2。

表2 主要革兰阳性菌耐药情况表（%）

2.2.2 主要革兰阴性菌耐药情况。大肠埃希氏菌、铜绿假单胞菌和类产碱假单胞菌对亚胺培南耐药率分别为0%、31.2%、20.8%，对哌拉西林／他唑巴坦、头孢哌酮／舒巴坦和阿米卡星的耐药率也较好，对于其他抗菌药物，大肠埃希氏菌耐药率均＞30%，可能与产ESBLs菌株比例较高有关。主要革兰阴性菌耐药情况见表3。

3 讨论

血培养在临床微生物检验常规工作中占有很重要的成分，特别对于诊断为败血症患者，是确定是否存在致病菌的首要方法。随着抗生素的种类越来越多，以及临床对于抗生素的应用不规范，导致现在的病原菌耐药性分布呈现地域性和多样性变化。

表3 主要革兰阴性菌耐药情况表（%）

根据此次分析，我院2012－2013年临床血液感染病原菌以革兰阳性菌为主，比例为76.1%，且以金黄色葡萄球菌比例最高，与以往许多文献报道以凝固酶阴性的葡萄球菌为主的结果不同［1，2］，有文献报道，在抗生素时代初期，血流感染的主要病原菌为革兰阴性杆菌。近20年来革兰阳性球菌已成为主要病原菌，特别是免疫损伤人群［3］。

凝固酶阴性的葡萄球菌（CNS）的检出一直以来颇有争议，因为CNS不产生血浆凝固酶，毒力较弱，再加上CNS感染一般需要特定的侵入途径，才能引发血液感染，所以很长时间内都被认为极少为致病的病原菌，但近年有文献［4］报道CNS能产生多糖胞间黏附素等致病因子，有一定的致病能力，特别是对儿童等免疫力低下人群。在我院分离的革兰阳性球菌中，CNS仍占22.71%，虽然低于以往文献报道，但由于我院采用的单侧单瓶的培养方法，仍然不能排除污染菌的可能。对于CNS是否为污染的判定，有关文献报道［5］，污染的CNS由于大部分是条件致病菌，污染的量一般较少，所以出现阳性报警的时间一般比同类病原菌长，推荐以血培养阳性报警时间结合临床资料综合判断。总之，对于CNS的检出，应结合临床，并积极与相关人员核实可能发生污染的情况，综合分析检测结果。另一方面，通过严格标本采集过程无菌化操作，推行双侧双瓶送检，降低污染的发生率。

本次分析中，耐甲氧西林金黄色葡萄球菌（MRSA）占79.4%，耐甲氧西林凝固酶阴性葡萄球菌（MRCNS）也占到85.5%（118／138），我院在分析中，以头孢西丁代替苯唑西林做苯唑西林敏感性测定，测定结果以苯唑西林报告。从分析结果看，MRSA和MRCNS呈现多重耐药，但本次分析未发现耐万古霉素和替考拉宁菌株。说明葡萄球菌引起的重症感染，使用万古霉素和替考拉宁仍然有效。

在我院的分析中，血培养病原菌革兰阴性菌所占的比例为23.9%，其中多耐药大肠埃希氏菌多见，除亚胺培南、哌拉西林／他唑巴坦、头孢哌酮／舒巴坦和阿米卡星外，耐药率都＞30%，值得引起临床重视。

通过以上分析可以看出，我院血培养病原菌种类多样，且多耐药菌株比例高，应该引起临床高度重视，对于疑似血液感染患者，应该尽早进行血液培养，根据培养的结果，结合临床分析，合理选择抗生素种类，避免盲目使用抗生素，加剧细菌的耐药性。

［1］ 薛峰，吕媛.Mohnarin 2009年度报告：血标本来源的细菌耐药监测〔J〕.中国临床药理学杂志，2011，27（5）：352－356.

［2］ 李进，矛小波，杨丹丹.某院2010－2011年血培养分析〔J〕.检验医学与临床，2012，32（15）：2061－2062.

［3］ 顾兵，潘世扬，魏雪菲，等.南京地区2004－2007年血培养病原菌分布和耐药性变迁〔J〕.中华检验医学杂志，2009，32（18）：889－894.

［4］ 侯宏，高岭，王霞，等.2009至2011年南京地区儿童血培养中病原菌的分布及耐药性分析〔J〕.检验医学，2013，28（11）：1030－1032.

［5］ 关幼华，周金凤，区云枝.血培养菌株分布与阳性报警时间的意义〔J〕.检验医学，2013，28（4）：263－266.