通窍活血汤对脑梗死急性期大鼠MTL及GAS的调节作用*

安朋朋 李 红 唐 明 杨秀丽 张 毅 徐伟俊 唐晓晓

（1.山东省青岛市海慈医疗集团，山东 青岛 266033；2.山东省青岛开发区第一人民医院，山东 青岛 266555）

通窍活血汤对脑梗死急性期大鼠MTL及GAS的调节作用*

安朋朋1李 红1唐 明1杨秀丽1张 毅1徐伟俊1唐晓晓2

（1.山东省青岛市海慈医疗集团，山东 青岛 266033；2.山东省青岛开发区第一人民医院，山东 青岛 266555）

目的 研究通窍活血汤对脑梗死急性期大鼠胃动素及胃泌素的影响。方法 制备大鼠大脑中动脉梗死模型，随机分为脑梗死组、通窍常规剂量组、通窍低剂量组、西咪替丁组、假手术组、并设正常组。分别给予生理盐水、通窍活血汤常规剂量、通窍活血汤低剂量、西咪替丁、生理盐水灌胃，并于4、7 d后测定胃动素（MTL）、胃泌素（GAS）含量。结果 脑梗死组4、7 d时MTL、GAS含量较相应正常组、假手术组及通窍常规剂量组大鼠有明显升高（P＜0.01）；与通窍低剂量组相比，通窍常规剂量组更能明显降低MTL、GAS水平（P＜0.01）。4 d时西咪替丁组、通窍常规剂量及低剂量MTL、GAS水平较7 d时明显偏高（P＜0.05）。结论 通窍活血汤能有效调节脑梗死急性期胃动素及胃泌素的表达，并且与剂量成正比关系，此可能为其治疗脑梗死后胃肠功能障碍的机制。

通窍活血汤 脑梗死急性期 胃动素 胃泌素 调节

脑梗死是严重威胁人类生命健康的临床常见病之一，具有高发病率、高死亡率、高致残率的特点［1-2］。脑梗塞死亡率及致残率的高低往往取决于急性期治疗是否得当，尤其是常见并发症的治疗［3］。胃肠功能障碍是脑梗死急性期最常见的并发症之一［4-5］。目前应用常规H2受体阻滞剂及质子泵抑制剂疗效欠佳。本研究即从脑梗死血瘀致病的基本病机出发，观察通窍活血汤对胃动素（MTL）及胃泌素（GAS）的调节作用，验证活血化瘀中药对脑梗死急性期胃肠损伤的保护性作用，并探讨其可能的药理机制。现报告如下。

1 材料与方法

1.1 实验动物 健康雄性清洁级Wistar大鼠，体质量（200±20）g。由山东大学动物实验中心提供，动物合格证号：0009265。

1.2 试药与仪器 通窍活血汤组方为桃仁9 g，红花9 g，赤芍 3 g，川芎 3 g，生姜 9 g，大枣 21 g，老葱 3 根，按照药物比例为 3∶3∶1∶1∶3∶7∶10 配制，并加麝香 0.15 g，黄酒250 mL。以上药物均由青岛市海慈医疗集团3级实验室提供并配制。西咪替丁片（规格为0.2 g/片。昆明振华制药厂有限公司生产，批准文号：国药准字H53020657）。0.9%氯化钠注射液、10%水合氯醛、蒸馏水（青岛市海慈医疗集团提供）。DPC-GAMMA-C12型γ计数器 （美国德普公司）；MTL、VIP放射免疫分析药盒（北方生物技术有限公司）。

1.3 动物分组及模型制备 采用线栓法制备大鼠大脑中动脉梗死模型。将大鼠分为通窍常规剂量组、通窍低剂量组、脑梗死组、假手术组、西咪替丁组，并设正常组。共计6组，每组各8只。各组大鼠每日给予灌胃1次，通窍常规剂量组给予2 mL质量浓度为1.3 g/mL通窍活血汤灌胃；通窍低剂量组给予1 mL 0.9%氯化钠注射液加质量浓度为1.3 g/mL通窍活血汤1 mL稀释后灌胃；西咪替丁组按照0.1 g/kg标准灌胃。其余各组给予2 mL 0.9%氯化钠注射液灌胃。

1.4 指标测定 空腹采下腔静脉取血4 mL，2 mL注入含7.5%2Na-EDTA和抑肽酶各40 μL的试管中，混匀，4℃，3000 r/min离心 10 min，取血浆，置-70℃保存待测MTL；另2 mL注入非抗凝试管，置4℃，3000 r/min离心10 min，取血清，-70℃保存待测GAS。

1.5 统计学处理 应用SPSS13.0统计软件。计量资料以（±s）表示，组间比较采用方差分析和F检验。P＜0.05为差异有统计学意义。

2 结 果

2.1 各组MTL含量比较 各组同一时间MTL水平的比较见表1。4 d与7 d时正常组与假手术组大鼠各组血清MTL水平相比均无差异（P＞0.05）。西咪替丁组与通窍低剂量组血清MTL水平相比无明显差异 （P＞0.05）；通窍活血汤常规、低剂量、西咪替丁组MTL水平较同一时间正常及假手术组亦均有升高（P＜0.01）；4 d时脑梗死组MTL水平较正常组、假手术组及通窍常规剂量组均有明显升高（P＜0.01），比通窍低剂量组略有升高（P＜0.01），与西咪替丁组相近；通窍常规量组较低剂量组、西咪替丁组更能降低MTL水平 （P＜0.01）；7 d时脑梗死组较其余各组均明显升高 （P＜0.01），通窍常规剂量组较西咪替丁组MTL水平降低（P＜0.05），较通窍低剂量组则明显降低（P＜0.01）。

各组不同时间MTL水平比较见表1。4 d时西咪替丁组、通窍常规剂量及低剂量组MTL水平较7 d时明显偏高（P＜0.05）；脑梗死组、正常对照组及假手术组不同时间前后对比MTL含量变化无差异 （P＞0.05）。

表1 各组大鼠MTL含量比较（pg/mL，±s）

表1 各组大鼠MTL含量比较（pg/mL，±s）

与正常对照组比较，▲P＜0.05，▲▲P＜0.01；与假手术组比较，▼P＜0.05，▼▼P＜0.01；与脑梗死组比较，■P＜0.05，■■P＜0.01； 与西咪替丁组比较，★P＜0.05，★★P＜0.01；与通窍常规剂量比较，☆P＜0.05，☆☆P＜0.01；与通窍低剂量组比较，*P＜0.05，**P＜0.01；与同组 4 d 比较，◇P＜0.05，◇◇P＜0.01。 下同。

组 别 n正常组 8假手术组 8脑梗死组 8西咪替丁组 8通窍常规剂量组 8通窍低剂量组 8 4 d 117.01±11.38▼▼■■★★☆☆**117.67±12.73▲▲■■★★☆☆**189.51±13.48▲▲▼▼☆☆*7 d 119.79±10.61▼▼■■★★☆☆**120.27±11.48▲▲■■★★☆☆**183.05±14.49▲▲▼▼★★☆☆**177.45±13.64▲▲▼▼☆☆ 152.16±12.66▲▲▼▼■■☆◇151.23±7.46▲▲▼▼■■★★ 138.72±8.02▲▲▼▼■■★**◇174.21±14.25▲▲▼▼■☆☆** 156.60±11.87▲▲▼▼■■☆☆◇

2.2 各组GAS含量比较 各组同一时间GAS水平比较见表2。4 d与7 d时正常组与假手术组大鼠GAS水平相比均无明显差异（P＞0.05）。西咪替丁组与通窍低剂量组GAS水平相比无明显差异（P＞0.05）；通窍常规剂量、低剂量、西咪替丁组GAS水平较相应正常及假手术组亦均有升高（P＜0.01）；脑梗死组GAS水平较其余各组均明显偏高 （P＜0.01）；4 d时通窍常规剂量组GAS水平比低剂量组偏低（P＜0.05），比西咪替丁组降低更明显 （P＜0.01）；7 d时通窍常规剂量组较西咪替丁组、通窍低剂量组GAS水平明显降低（P＜0.01）。

表2 各组大鼠GAS含量比较（pg/mL，±s）

表2 各组大鼠GAS含量比较（pg/mL，±s）

组 别 n正常组 8假手术组 8脑梗死组 8西咪替丁组 8通窍常规剂量组 8通窍低剂量组 8 4 d 130.51±8.03▼▼■■★★☆☆**136.93±13.48▲▲■■★★☆☆**216.28±12.12 ▲▲▼▼★★☆☆**7 d 135.29±6.97▼▼■■★★☆☆**132.12±10.39▲▲■■★★☆☆**209.02±6.38▲▲▼▼★★☆☆**184.10±9.45▲▲▼▼■■☆☆ 173.11±10.65▲▲▼▼■■☆☆◇166.64±11.48▲▲▼▼■■★★* 152.14±8.54▲▲▼▼■■★★**◇180.42±10.08▲▲▼▼■■☆ 168.48±8.01▲▲▼▼■■☆☆◇

各组不同时间GAS水平的对比见表2。4 d时西咪替丁组、通窍常规及低剂量GAS水平较7 d时明显偏高（P＜0.05）；脑梗死组、正常组及假手术组不同时间前后对比血清GAS含量变化无差异（P＞0.05）。

3 讨 论

脑梗死急性期胃肠功能障碍多被认为与胃酸分泌过多及胃肠动力异常引起［6-7］。胃泌素是最强的促胃酸分泌的激素，可使壁细胞最大限度分泌胃酸［8］。急性脑梗死后在应激等因素刺激下脑组织及胃肠组织缺血缺氧，迷走神经及胃肠黏膜神经丛高度兴奋，刺激胃泌素分泌，血清胃泌素水平升高，胃酸分泌增多，增强了胃酸对胃肠黏膜的损害，引起胃黏膜糜烂、溃疡出血［9］。MTL则能强烈刺激上消化道机械运动和生理肌电活动，引起胃肠周期性收缩运动［10］。同时MTL作为脑肠肽，也是中枢促进胃肠运动的主要调控因素之一，其调控机制与下丘脑—脑垂体功能轴密切相关［11］。急性脑梗死后脑组织破坏，颅内压升高，直接或间接压迫下丘脑等结构，促使血浆MTL浓度升高。MTL的释放量与胃肠活动成正比，MTL释放增多，胃肠蠕动增快，MTL释放减少，胃肠蠕动减慢［12］。胃肠的异常运动破坏了胃肠黏膜的屏障功能，从而引起胃肠的相关症状。

本实验研究结果表明，MTL及GAS在脑梗死急性期的含量均显著升高。无论4 d还是7 d脑梗死组两种胃肠激素含量远高于正常组及假手术组。由此可以推测，MTL、GAS的升高与脑梗死急性期胃肠功能障碍发生有密切联系。同时MTL及GAS将有可能成为急性脑梗死早期胃肠功能障碍的判断标准之一。

血瘀是急性脑梗死的致病因素，同样也是脑梗死发生的病机的关键［13］。血瘀贯穿于急性脑梗死的各个部位及阶段，因此脑梗死胃肠功能障碍的发生与血瘀密切相关［14］。化瘀通络不仅是治疗急性脑梗死的有效法则，同样对防治急性期胃肠功能障碍有积极意义。通窍活血汤是清代王清任《医林改错》中活血化瘀的代表方剂之一，该方具有活血、通窍、行瘀、通经之效［15］。本研究结果发现通窍活血汤和西药干预后两种激素水平均较脑梗死组有所降低，且常规剂量组较低剂量组激素水平调节更为明显。也从侧面反映了MTL、GAS降低可能有助于胃肠功能的恢复。结合实验结果可知，通窍活血汤通过降低MTL、GAS水平，减少因脑梗死而出现的胃酸过度分泌及胃肠运动异常，减轻了胃肠功能障碍的症状，且通窍活血汤的疗效与剂量成正比。

本实验研究提示MTL及GAS的升高可作为脑梗塞胃肠功能障碍早期判断要点，证实了通窍活血汤对脑梗死急性MTL及GAS具有较好的调节作用，充分说明了活血化瘀法对急性脑梗死胃肠损伤具有良好的保护性作用，也为临床应用提供了有效方药。

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The Regulatory Effect of Tongqiaohuoxue Decoction on MTL and GAS of Rats with Cerebral Infarction in Acute Period

AN Pengpeng，LI Hong，TANG Ming，et al.Haici Medical Center of Qingdao City，Shandong Province，Shandong，Qingdao266033，China

Objective:To observe effect ofTongqiaohuoxue Decoctionon changes of motilin （MTL） and gastrin（GAS） of rats with cerebral infarction in acute period.Methods:Cerebral infarction models were made and randomly divided into cerebral infarction group，Tongqiaohuoxue Decoctionroutine dose group，low dose group，Cimetidine group，sham operation group，and control group.The rats were given Saline，Tongqiaohuoxue Decoctionroutine dose，Tongqiaohuoxue Decoctionlow dose，Cimetidine，and Saline enema separately.At 4th day and 7th day，inferior vena venous blood samples were collected to detect the MTL and GAS concentrations by radioimmunoassay.Results:At 4th and 7th day the MTL and GAS of cerebral infarction group were still higher than those of normal group，sham operation group andTongqiaohuoxue Decoctionroutine dose group （P＜0.01）；Compared withTongqiaohuoxue Decoctionlow dose group，MTL and GAS inTongqiaohuoxue Decoctionroutine dose group decreased （P＜0.01） significantly.In 4th day，MTL and GAS in Cimetidine group，Tongqiaohuoxue Decoctionroutine dose group andTongqiaohuoxue Decoctionlow dose group were higher than those in 7 th day （P＜0.05）.Conculsion:Tongqiaohuoxue Decoctioncan effectively regulate the expression of motilin （MTL） and vasoactive intestinal peptide（GAS），which is proportional to dose.It may be the mechanism treating gastrointestinal dysfunction after cerebral infarction.

Tongqiaohuoxue Decoction；Acute period of cerebral infarction；Motilin；Gastrin；Regulating

R285.5

A

1004-745X（2014）07-1276-03

10.3969/j.issn.1004-745X.2014.07.025

山东省中医药科技发展计划项目（2009-203）

2014-04-02）