慢性乙型肝炎肝组织铁含量与其分级分期的关系及临床意义

王志东 张子军

铁在人体中含量约为4 g, 主要存在两类功能性结构中。一种含量占70%左右, 以红细胞中的血红蛋白、肌纤维中的肌红蛋白的形式存在；另一种含量占30%, 以铁蛋白或含铁血黄素等贮存铁的形式贮存于骨髓和肝、脾中。铁是线粒体呼吸链和核糖核酸氧化酶及还原酶的组成成分, 在体内氧化-还原反应中起着重要作用。而肝脏是其贮存和代谢的重要器官, 因此, 肝脏铁代谢异常与肝脏疾病密切相关。通过对2006年1月～2013年12月115例慢性乙型肝炎的肝组织中的沉积性含铁血黄素染色, 以期了解其与慢性乙型肝炎分级和分期的关系。

1 资料与方法

1.1 一般资料 慢性乙型肝炎患者共计115例。男75例,女40例, 年龄21～61岁, 平均年龄31.4岁。慢性乙型肝炎诊断的分级和分期根据2005年9月中华医学会传染病与寄生虫病学分会、肝病学分会联合修订的《病毒性肝炎防治方案》进行。依据分级和分期的结果进行分组［轻度(A)、中度(B)、重度(C)］, 每组33例；另设肝硬化组(16例)。总计四组。

1.2 研究方法 以中性甲醛固定肝穿组织、85%～100%梯度酒精脱水、二甲苯透明、650石蜡包埋。切片厚度3～4 μm, 每例切4张, 分别进行常规染色(HE法)、网状纤维染色(Gomori法)、胶原纤维染色(Masson法)和含铁血黄素染色(Schmeltzer法)［1］。切片根据常规染色、网状纤维染色、胶原纤维染色进行慢性乙型肝炎的分级和分期；铁染色结果观察：①显色程度：分弱、中、强, 分别用1、2、3表示。②显色范围：a.高倍视野显色范围<1/4；b.高倍视野显色范围1/4～2/4；c.高倍视野显色范围2/4～3/4；d.高倍视野显色范围>3/4。③显色指数=显色程度×显色范围：取其均数为每张切片检测指标的最终显色指数。

1.3 统计学方法 采用统计学软件SPSS13.0进行数据处理。计量资料以均数±标准差(±s)表示, 采用t检验。P<0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 网状纤维染色中, 网状纤维被染成黑色, 背景呈淡黄色；胶原纤维染色中, 胶原纤维被染成绿色, 背景呈红色。

2.2 含铁血黄素染色中, 铁颗粒被染为蓝色, 背景呈淡红色。在轻、中度两组可见肝细胞内少量阳性表达；重度及肝硬化组阳性表达细胞数明显增多, 并与肝纤维化程度呈明显的正相关性。重度肝炎及肝硬化组织中含铁血黄素染色的表达明显高于轻度及中度慢性肝炎(P<0.01)。见表1。

表1 慢性乙型肝炎分级分期含铁血黄素(±s)

表1 慢性乙型肝炎分级分期含铁血黄素(±s)

注：重度肝炎及肝硬化组织中含铁血黄素表达明显高于轻度及中度慢性肝炎, aP<0.01

项目 含铁血黄素轻度A(G0-2S0-2)1.50±1.26中度B(G3S3)3.30±1.64重度C(G4S4)6.00±3.63a肝硬化 8.01±3.28a

3 讨论

肝脏铁负荷增加所导致的结果常表现为肝脏纤维化或肝硬化。其病理组织学表现为肝组织门脉区最先积聚铁而最易受损, 肝细胞中存在异常多的棕色色素(含铁血黄素沉积)与组织内增多的结缔组织, 在铁过载后期表现更为明显。

这项研究结果表明, 慢性乙型肝炎肝组织分级分期的逐渐增高, 肝组织内含铁血黄素染色指数也逐渐增加, 特别在重型肝炎和肝硬化的肝组织中增加明显。慢性乙型肝炎肝组织中含铁血黄素染色指数增加, 推测和下列因素相关：①肝细胞坏死时, 细胞中的贮存铁进入血液, 进而又被其他细胞吸收。②肝脏炎症, 门脉压力增高, 导致脾功能亢进, 红细胞破坏增加, 血中血红蛋白增加, 肝细胞吸收铁负荷增加。③肝脏炎症导致其铁转化的能力下降。

肝脏纤维化与铁过剩程度有关, 有作者发现铁过剩的大鼠肝贮脂细胞内胶原合成及Disse间隙内胶原沉积增加, 提示铁可直接促进肝胶原合成［2］。铁过剩可促进自由基及脂质过氧化的发生与溶酶体破坏, 导致细胞损伤［3］。铁过剩引起肝纤维化可能也因自由基与胶质过氧化使溶酶体破坏导致细胞损伤, 激活间质胶原合成系统, 从而引起肝纤维化。

Sebastiani等［4］通过回顾性研究发现：慢性乙型肝炎患者, 肝脏铁沉积和血清铁水平升高都很常见, 而血清铁的水平与铁蛋白水平正相关, 从而间接说明慢性乙型肝炎患者的血清铁蛋白水平是普遍升高的。冯红萍［5］对89例慢性乙型重症肝炎患者动态检测甲胎蛋白与血清铁蛋白的变化情况时发现, 血清铁蛋白随病情加重而逐渐升高, 以重症肝炎升高最为显著。而且, 随着病情的转化, 血清铁蛋白水平也随之变化, 最终生存下来的患者血清铁蛋白由高转低, 而最终死亡的患者血清铁蛋白则持续处于高水平, 证实了血清铁蛋白与肝脏病变严重程度一致。

从既往的研究成果及本项研究结果看, 在乙型肝炎的发病过程中, 机体铁负荷过重增加了肝细胞的损伤。若采取一些减轻机体铁负荷的方法, 如：低铁饮食、避免不必要的大量输血等, 可能会减轻乙肝患者的肝损伤。

［1］中华医学会编丛.临床技术操作规范病理学分册.北京：人民军医出版社, 2004(04):1.

［2］Pietrangelo A, Rocchi E, Schiaffonati L, et al.Liver gene expression during chronic dietary iron overload in rats.Hepatology, 1990(11):798.

［3］Ozaki M, Kawabata T, Awai M.Iron-catalyzed Hydroxyl radicals in vitro.Biochem , 1998(250):589.

［4］Sebastiani G, Tempesta D, Alberti A.Hepatic iron overload is common in chronic hepatitis B and is more severe in patients coinfected with hepatitis D virus.J Viral Hepat, 2012(19):170-176.

［5］冯红萍.甲胎蛋白与血清铁蛋白联合检测在慢性乙型重症肝炎中的临床意义.现代诊断与治疗, 2007(18):232-233.