肺炎支原体肺炎患儿血清IL-37、IL-18水平变化的研究

刘桂兰　孙　萍　钟海平　吴正庚

南昌大学医学院第一附属医院，江西省南昌市　330006



肺炎支原体肺炎患儿血清IL-37、IL-18水平变化的研究

刘桂兰孙萍钟海平吴正庚

南昌大学医学院第一附属医院，江西省南昌市330006

MPP是小儿肺炎常见的种类之一，近年来其发病率明显增高，并且呈小年龄化趋势[1]，肺炎支原体(MP)已成为小儿下呼吸道感染的重要病原，反复感染后还可引起慢性咳嗽、反复喘息,与支气管哮喘有关，可能对哮喘的产生、加重、慢性化起了一定作用[2],发病机制仍不十分清楚，目前认为机体在MP感染后产生强烈的免疫应答反应是MPP最为重要的发病机制[3]。

IL-18是一个重要的前炎症细胞因子，在多种炎症性疾病中都升高； IL-37作为一个抗炎细胞因子而受到广泛重视，其抗炎作用与IL-18关系密切，但MPP患儿血清IL-37水平变化及其与病情的关系如何？IL-37、IL-18二者的关系如何？国内未见相关报道,因此，本研究通过检测MPP患儿急性期和恢复期血清IL-37、IL-18水平变化，通过与正常儿童对照，探讨血清IL-37、IL-18在肺炎支原体肺炎中的作用及与病情的关系，从而进一步探讨肺炎支原体肺炎的免疫学发病机制,为临床治疗肺炎支原体肺炎提供新的方法及一定的理论依据。

1资料和方法

1.1一般资料选取2014年3-12月在我院儿科住院确诊为MPP的患儿40例为MPP组，其中男21例，女19例；年龄1～10岁，平均年龄(4.18±1.99)岁；另选同期健康体检儿童40例为对照组，其中男17例，女23例，年龄1～10岁，平均年龄(4.58±1.96)岁，两组男女性别组成及年龄比较，差异均无统计学意义(P>0.05),具有可比性。

1.2入选标准MPP急性期诊断符合诸福棠《实用儿科学》中诊断标准[4]，重症MPP的诊断标准参考俞珍惜等[5]文献。恢复期：以急性发作期患儿经阿奇霉素治疗，体温正常至少2周以上，咳嗽、咳痰等临床症状明显缓解或消失；肺部体征及X线表现消失或明显减轻。入选MPP组患儿需排除有过敏性疾病、哮喘及心、肝、肾脏器质性疾病史。排除结核、细菌等其他病原微生物感染；入选前未经大环内酯类药物、激素及免疫调节剂治疗。对照组，近4周无任何感染、过敏性疾病及药物服用史，无器质性疾病史。

1.3实验方法采集MPP组患儿入院治疗前、恢复期及对照组儿童的静脉血测定各项指标；IL-37、IL-18及MP-IgM的测定严格按：人IL-37及IL-18酶联免疫吸附测定(ELISA)试剂盒(厦门慧嘉生物科技有限公司提供CUSABIO试剂盒)、肺炎支原体抗体检测试剂盒(被动凝集法，珠海丽珠试剂股份有限公司)说明书进行操作。

1.4统计学处理采用SPSS17.0统计软件对所得数据进行处理，资料数据用均数±标准差(±s)表示,性别差异比较采用χ2检验；各组样本均数比较方差齐性分析后采用t检验；相关性分析采用pearson直线相关分析；P<0.05为差异具有统计学意义。

2结果

2.1MPP组急性期、恢复期和对照组血清IL-37、IL-18水平的比较MPP组急性期血清IL-37、IL-18水平均高于恢复期及对照组，差异均有统计学意义(P<0.01)，MPP组恢复期IL-37、IL-18水平高于对照组，差异均有统计学意义(P<0.01)，见表1。

表1　MPP组急性期、恢复期和对照组血清IL-37、IL-18水平的比较(±s，pg/ml)

表1　MPP组急性期、恢复期和对照组血清IL-37、IL-18水平的比较(±s，pg/ml)

组别nIL-37IL-18MPP组急性期40111.33±70.83 170.70±68.55 MPP组恢复期4028.28±13.62a61.25±30.97a对照组4017.35±15.35ab31.28±13.56abF值32.56842.177P值<0.001<0.001

注：a与MPP组急性期比较，P<0.01；b与MPP组恢复期比较，P<0.01。

2.2MPP组重症和轻症患儿血清IL-37、IL-18水平的比较MPP组中,重症患儿急性期和恢复期血清IL-37、IL-18水平高于轻症患儿，差异均有统计学意义(P<0.05)，见表2。

表2　MPP组重症和轻症患儿血清IL-37、IL-18水平的比较(±s，pg/ml)

表2　MPP组重症和轻症患儿血清IL-37、IL-18水平的比较(±s，pg/ml)

组别nIL-37急性期恢复期IL-18急性期恢复期重症17169.18±68.5834.59±12.81226.06±50.5783.76±26.76轻症2368.57±31.2423.61±12.49129.78±48.5144.61±22.31t值6.2352.7206.0564.903P值<0.0010.01<0.001<0.001

2.3MPP患儿急性期IL-37与IL-18的关系MPP患儿急性期血清IL-37水平与IL-18水平呈显著正相关(r=0.670，P<0.01)。见图1。

图1　MPP患儿急性期IL-37与IL-18的关系

3讨论

MPP有临床症状复杂、肺外损害重等特征，到目前为止，MPP发病机制仍不十分清楚，国内外研究[6]均证实体液免疫和细胞免疫共同参与了MPP的发病过程，其中细胞介导的免疫反应失衡以及大量细胞因子的释放失衡，在MPP的发病过程中起着重要作用。

本研究结果显示：MPP患儿血清IL-37及IL-18水平急性期明显高于恢复期及正常对照组，而疾病组和对照组不同性别之间血清IL-37及IL-18水平均无差异,提示IL-37及IL-18 在MPP的发病中可能起了重要作用，与性别无关。

IL-18作为重要的炎症细胞因子，在多种自炎症性疾病[7，8]的进展期中均升高，国内多项研究显示MP感染后及MPP患者血清IL-18水平升高，且与病情严重程度呈正相关[8，9]。本研究结果也显示：MPP患儿血清IL-18水平急性期明显高于对照组及恢复期,其中重症患儿无论是急性期还是恢复期均较轻症患儿显著升高，证实了炎症因子过度释放导致机体免疫损伤,表明血清IL-18可能可以反映炎症反应程度，作为MPP病情严重程度评估的一个指标。

IL-37是新近发现的IL-1F成员，在某些炎症组织中高表达，前炎症因子IL-18、IFN-γ、IL-1β以及TNF能促进IL-37的合成[10]。研究表明，IL-37具有抗炎和免疫抑制作用,在许多炎症性疾病的发生发展中起重要保护作用,其炎性保护作用与抑制炎性因子的表达水平密切相关[10~14]。IL-37可以通过巨噬细胞有效地抑制前炎症细胞因子产物，抑制TLR诱导的前炎症因子的释放及DCs 的活性，作为一种天然炎症调节因子，在调节免疫炎症反应方面起到重要作用。本研究结果显示，MPP患儿血清IL-37水平急性期明显高于对照组及恢复期,其中重症患儿急性期和恢复期均较轻症患儿显著升高; 由此推测， MPP患儿急性期及重症组血清IL-37水平升高可能是由于前炎症因子IL-18升高而启动的机体负反馈机制抑制炎症的过度表达所致。与IL-18一样，IL-37可能也可以作为MPP病情严重程度评估的一个指标。

已有的研究证实，IL-37与IL-18对炎症的作用分别起到抑制和促进作用，其呈正相关的机制可能与IL-37的抑制炎症机制有关。IL-37的控制炎症机制与IL-18密切相关，相关实验证明，IL-37主要与IL-18的天然抑制剂IL-18结合蛋白(IL-18BP)结合,增强IL-18BP对IL-18的抑制能力,而IL-18是通过与IL-18Rα链和β链组成的受体复合物结合, 诱导IFN的表达，因此 IL-37可以抑制IFN-γ的产生；IL-37还可以进入细胞核与Smad3结合形成一个功能性复合物,影响基因转录, 并抑制TLR诱导表达促炎症性细胞因子以及DCs的活化[15]；IL-37可以抑制STAT1-4、 c-Jun和p38丝裂原激活蛋白激酶(MAPK)的功能，促进糖原合成酶激酶(GSK)-3α/β磷酸化，发挥抗炎作用[16]。通过相关性比较分析发现：MPP患儿急性期血清IL-37与IL-18水平呈显著正相关，提示二者相互影响。推测MPP患儿急性期，血清IL-37水平随着IL-18的升高而上升，可能与在机体遭受MPP感染、促炎因子IL-18释放增多、炎症损伤加重、机体进行保护性负反馈调节、增加 IL-37的释放、抑制炎症反应有一定关系。

由此推论：IL-37及IL-18可能参与了MPP的发生、发展；MPP患儿 IL-37及IL-18二者互为影响，在一定程度上有助于临床监测病情。

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(编辑落落)

摘要目的：研究肺炎支原体肺炎(MPP)患儿不同时期血清白细胞介素-37(IL-37)及白细胞介素-18(IL-18)的水平变化，并探讨其在MPP发生、发展中的作用及意义。方法：(1)采用双抗体夹心酶联免疫法(ELISA)测定40例MPP患儿(MPP组)急性期和恢复期血清IL-37及IL-18水平，与40例健康体检儿童(对照组)进行比较；(2)比较MPP重症与轻症患儿血清IL-37及IL-18水平变化；(3)分析MPP组急性期IL-37与IL-18的相关性。结果：(1) MPP组急性期血清IL-37及IL-18水平均显著高于恢复期及对照组，差异均有统计学意义(P<0.01)； (2)MPP组恢复期血清IL-37及IL-18水平高于对照组，差异均有统计学意义(P<0.01)；(3) MPP组重症与轻症比较，重症患儿血清IL-37、IL-18水平呈在急性期和恢复期均高于轻症患儿，差异均有统计学意义(P<0.05)；(4)MPP急性期血清IL-37及IL-18水平呈显著正相关(P<0.01)。结论：(1)IL-37及IL-18可能参与了MPP的发生、发展；(2)IL-37及IL-18二者互为影响，在一定程度上有助于临床监测病情。

关键词IL-37IL-18肺炎支原体肺炎儿童

Mycoplasma Pneumoniae Pneumonia in Children with Changes in Serum Levels of IL-37, IL-18 of Study

LIU Guilan,SUN Ping,ZHONG Haiping,etal.TheFirstAffiliatedHospitalofNanchangUniversity，NanchangCity，JiangxiProvince330006

ABSTRACTObjective:Study of children with mycoplasma pneumoniae pneumonia (MPP) at different times of serum interleukin 37 (IL-37) and interleukin 18 (IL-18) levels of change, and to explore its role in the occurrence and development of MPP and significance.Methods:(1) With double antibody sandwich enzyme-linked immunoassay (ELISA) determination of 40 cases of children with MPP acute phase and convalescence, serum levels of IL-37 and IL-18,and compared with 40 cases of healthy check-up children (control group) were compared;(2)MPP severe and mild serum IL-37 and IL-18 level changes;(3)compare the MPP acute IL-37 and the correlation of IL-18.Results:(1)MPP children with acute phase serum IL-37 and IL-18 levels were significantly higher than that of recovery and healthy controls children, differences were statistically significant (P<0.01); (2)the recovery of serum IL-37 children with MPP and level of IL-18 children is higher than the healthy controls, differences were statistically significant (P<0.01);(3)the MPP children with severe compared with mild, severe patients serum IL-37, IL-18 level were higher than in children with mild acute phase and convalescence and the differences were statistically significant (P<0.05);(4)MPP acute phase serum IL-37 and IL-18 were significantly positive correlation (P< 0.01).Conclusion:(1)IL-37 and IL-18 maybe have involved in the occurrence and development of mycoplasma pneumoniae pneumonia;(2)IL-37 and IL-18 both influence each other. in a certain extent, It is helpful to the clinical monitoring condition.

KEY WORDSIL-37,IL-18,Mycoplasma pneumoniae pneumonia,Child

收稿日期2015-04-23

中图分类号：R725.6

文献标识码：A

文章编号：1001-7585(2015)18-2428-03