规模猪场猪瘟病原及抗体监测分析

何 芳,周望平

（湖南省畜牧兽医研究所,湖南长沙410131）

猪瘟是当前生猪的一类重大疫病，从2008年开始列为动物疫病强制免疫项目，但仍对我国生猪养殖业构成很大的威胁。据相关报道及监测数据资料统计，我国的病死猪中有30%与猪瘟有关。近几十年，猪瘟的流行情况及临床、病理发病特点等方面发生了很大变化，以非典型性型猪瘟为主，临床表现为母猪流产、产死胎及新生仔猪死亡，且经常发生于免疫猪群；很多猪场即使将疫苗接种剂量加大数倍，更换不同的免疫程序，仍不能完全控制疫情，这给猪瘟的诊断和防制带来了新的困惑。笔者从2014年起对湖南省部分规模生猪养殖场开展猪瘟病原及抗体监测，并对监测情况进行综合分析，以期探寻猪瘟的发生动态和流行规律，为指导和制定猪瘟防控政策和措施提供参考。

1 材料与方法

1.1血清与组织样品

样品采集时间为2014年5～12月，血清共计1 613份，其中经产母猪血清样品899份，后备母猪422份，公猪292份。组织样品85份。采集于我省部分规模化猪场。

1.2采样方法

样品采用随机采样方法，分别采集公猪、经产母猪、后备母猪的血液，分离血清，于湖南省畜牧兽医研究所兽医兽药实验室检测。根据猪场的生产实际，公猪全采，母猪临产前15天不采血。

1.3检测试剂盒

猪瘟抗体的测定采用IDEXX的ELISA试剂盒，批号为：99-43220D191/C945。

1.4 ELISA操作方法

ELISA操作方法以及结果判定参照试剂盒说明书进行，试验成立条件：只有阴性对照的平均OD450大于0.50，阳性对照的阴断率大于50%，该检测结果才能有效。若试验不成立，有可能是实验操作失误造成，应重读说明书，再操作一次。被检样本的阻断率大于或等于40%，该样本就可以判定为阳性（有CSFV抗体存在）；被检样本的阻断率小于或等于30%，该样本就可以判定为阴性（无抗CSFV抗体存在）；被检样本的阻断率在30%～40%之间，就应在数日后再对该动物进行重测；重测结果仍为可疑，就应用血清中和实验方法鉴定。

1.5病原检测方法

猪瘟病原检测采取两步法RT-PCR技术，引物扩增片段长度508bp，上游引物 CSFVF:5'-GCTCCTGGTTGGTAACCTCGG-3'， 位 于 基 因组的 5 076～5 096位；下 游引物 CSFVR:5'-TGATGCTGTCACACAGGTGAA-3'，位于基因组的5 584～5 564位。疫苗作为阳性对照能扩增出1条约508 bp的特异性条带，而阴性对照是空白，CSFV病料若也扩增出约508 bp的特异性条带，则判定为结果阳性；空白或是其他长度的条带，则为阴性。

2 检测结果

2.1猪瘟病原的检测结果

共对我省21个规模猪场采集的85份病料进行了猪瘟的病原检测，其中6个猪场共9份病料中猪瘟核酸阳性（RT-PCR方法），阳性场中5个猪场为中小型猪场，1个为种猪场。猪场的猪瘟阳性检出率为28.6%，病料的猪瘟阳性检出率为10.6%。

2.2猪瘟抗体监测结果

共对我省9个规模猪场采集的1 613份血清进行了猪瘟的抗体检测，结果显示经产母猪猪瘟抗体阳性率82%，合格率64%；后备母猪猪瘟抗体阳性率80%，合格率60%；公猪猪瘟抗体阳性率93%，合格率 86%（ 表 1）。

表1 种猪群猪瘟抗体检测结果

3 结果分析

3.1从猪瘟的病原的检测结果来看：2014年21个规模猪场猪瘟核酸阳性猪场的检出率为28.6%（ 6/21），病料的猪瘟检出率为 10.6%（ 9/85），较 2013年11个规模猪场猪瘟核酸阳性猪场的检出率为36%，病料的猪瘟检出率为23%，2014年规模猪场的猪瘟发病数有了一定的下降。

3.2从猪瘟抗体水平监测来看：自全面实施猪瘟强制免疫以来，我省规模猪场的猪瘟抗体整体水平有了很大的提升。目前，我省规模猪场的猪瘟抗体水平维持在：经产母猪群的猪瘟抗体阳性率在67%以上，平均阳性率在82%，合格率在50%以上，平均合格率在64%；后备母猪群的猪瘟抗体阳性率在42%以上，平均阳性率在80%，合格率在19%以上，平均合格率在60%；公猪群的猪瘟抗体阳性率在57%以上，平均阳性率在93%，合格率在40%以上，平均合格率在86%。

4 讨论

4.1 猪瘟免疫效果效果不佳的原因

我省规模猪场普遍存在猪瘟抗体水平偏低，整齐度不好的现象。引起猪瘟免疫效果不好的问题，是一个综合性的问题，要根据各个猪场的实际进行分析，主要问题存在于：一是猪群自身的健康状况不佳，对免疫应答的反应不强，这主要体现在一些经产老母猪或自身感染病毒影响免疫应答的猪，这部分猪最好采用猪瘟监测及逐步淘汰的方法来改善整个生产母猪群健康状况。二是免疫的时机不对，主要是针对仔猪免疫后效果不佳，这个问题要借助猪瘟抗体水平的系统全面的检测和跟踪来确定各个猪场的免疫时间，减少母源抗体对仔猪免疫的干扰，制订猪场个性化的免疫计划。三是免疫操作不当，这个问题在管理不规范的猪场时有发生，所以要针对关键环节进行关键管理，减少人为因素带来的影响。四是猪场的过度药物保健，部分药物对免疫应答的影响已经被业界证实，过度或不适宜的药物保健会对免疫应答产生负面影响，在注射疫苗前后，要对保健药物进行选择或不用药。

4.2 提高预防意识

猪瘟的发生现主要以散发的形式存在，且多发生管理不规范、卫生条件较差的饲养条件下，这与养殖户对猪瘟的认识、生物安全意识等有很大的关系，发病的猪场有很大一部分都忽视疫苗的作用，采取不打苗或打次苗。所以，对于这种现象，应该是提高养殖户对疾病的认识，加强卫生和生物安全意识。