6213株细菌院内分布及耐药分析

章小花 陈 松 陈 君

6213株细菌院内分布及耐药分析

章小花 陈 松 陈 君

细菌；敏感性试验；耐药监测

随着各种抗菌药物的广泛使用，耐药细菌也日渐增多，因此做好细菌耐药监测工作为临床提供参考尤为重要。本研究收集本院临床分离的细菌，分析其菌群分布、耐药性。

1 材料与方法

1.1 细菌来源 选择我院2015年1月—9月临床分离的细菌，剔除同一患者相同部位的重复菌株，不收集厌氧菌和真菌。标本来源有痰、尿液、分泌物、血液、胆汁。

1.2 方 法 细菌鉴定和药敏试验采用VITEK compact系统。质控菌株为大肠埃希菌ATCC25922，金黄色葡萄球菌 ATCC25923，铜绿假单胞菌ATCC27853，粪肠球菌ATCC29212，肺炎克雷伯菌ATCC700603，肺炎链球菌ATCC49619。

1.3 药敏试验 抗菌药物分别是青霉素（PEN）、苯唑西林（OXA）、氨苄西林（AMP）、氨苄西林/舒巴坦（SAM）、亚胺培南（IMP）、红霉素（ERY）、克林霉素（CLI）、庆大霉素（GEN）、高浓度庆大霉素（GEH）、环丙沙星（CIP）、复方磺胺甲恶唑(SXT）、四环素（TCY）、万古霉素（VAN）、美罗培南（MEM）、头孢吡肟（PEN）、头孢他啶（CAZ）、头孢噻肟（CTX）、头孢哌酮/舒巴坦（SCF）、哌拉西林（PIP）、哌拉西林/他唑巴坦（TZP）、阿米卡星（AMK）、左氧氟沙星（LVE），莫西沙星（MXF）、利奈唑胺（LZD）、头孢呋辛（CXM）、氨曲南（AZT）。

1.4 产超广谱β-内酰胺酶（ESBLs）检测 按2015 年CLSI推荐方法用CTX（30μg）和CTX/克拉维酸（30μg/10μg）两组纸片检测大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌中ESBLs，复合制剂与但要抑菌环相差5mm判为ESBLs（+）。

1.5 结果判断和数据分析 药敏判断采用美国临床实验室标准协会（CLSI）2015年标准判断药敏试验结果耐药、中介和敏感，以WHONET5.6软件进行数据分析。

2 结 果

2.1 病原菌分离构成比 去除重复，只计算首分离共计6213株细菌，其中革兰阳性菌株1746株，占28.1%，革兰阴性菌株4138株，占66.6%，金葡菌339株，占5.0%，肠球菌属741株，占11.9%，肠杆菌科细菌2787株，占44.8%，非发酵菌1332株，占21.4%，其他尚有肺炎链球菌、流感嗜血杆菌等。病原菌分离构成比见表1。

表1 6213株病原菌分离构成比

2.2 细菌分布 细菌分布依次为痰31.5%（1959/ 6213），尿液22.5%（1401/6213），分泌物9.1%（567/ 6213），血液6.7%（417/6213），胆汁1.7%（111/6213）。

2.3 细菌药敏分析

2.3.1 金黄色葡萄球菌 金黄色葡萄球菌中耐甲氧西林的金黄色葡萄球菌（methicillin-resistant Staphylococcus aureus，MRSA）占33.6%，MRSA对β-内酰胺类、大环内酯类、氨基苷类、喹喏酮类耐药率较高，除复方磺胺甲噁唑敏感性均较高以外对其他所测试的抗菌药物，MRSA敏感率明显低于甲氧西林敏感的金黄色葡萄球菌（methicillin-sensitive Staphylococcus aureus，MSSA），所有金黄色葡萄球菌中没有对万古霉素、利奈唑胺耐药的菌株。见表2。

2.3.2 肠球菌 粪肠球菌对氨苄西林仍较敏感，敏感率达96.6%，未发现对万古霉素耐药的粪肠球菌。粪肠球菌和屎肠球菌对万古霉素和利奈唑胺均极敏感，粪肠球菌和屎肠球菌对万古霉素敏感率为别为100%%和90.9%，对利奈唑胺敏感率为别为97.5% 和99.1%。屎肠球菌对抗菌药物的敏感性低于粪肠球菌。见表3。

表2 金黄色葡萄球菌抗菌药物敏感性分析

表3 肠球菌抗菌药物敏感性分析

2.3.3 肠杆菌科细菌 大肠埃希菌及肺炎克雷伯菌对除头孢他啶以外的第1、2、3代头孢菌素的耐药率均较高，对哌拉西林/他唑巴坦和头孢哌酮/舒巴坦的敏感率较高，对阿米卡星的敏感率可达90%。大肠埃希菌对碳青霉烯类的敏感率可达99%，肺炎克雷伯菌对亚胺培南的敏感率仅有92.0%。大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌中产 ESBLs株分别占 46.8%和32.3%。见表4。

2.3.4 非发酵菌 铜绿假单胞菌和鲍曼不动杆菌对临床常用抗菌药的耐药率普遍较高，铜绿假单孢菌对碳青霉烯类的亚胺培南和美罗培南的耐药率接近30%，多重耐药率（MDR）为12.44%。鲍曼不动杆菌对亚胺培南和美罗培南的耐药率高达50%以上，多重耐药率达到30.5%。见表5。

表4 肠杆菌科细菌抗菌药物敏感性分析

3 讨 论

葡萄球菌，特别是金黄色葡萄球菌是引起院内感染的重要病原菌，国内有很多监测一直在跟踪金黄色葡萄球菌的药物敏感性，如GPRS、SEANIR等。本研究金黄色葡萄球菌中MRSA占33.6%，在全国处于较低水平[1]。MRSA对β-内酰胺类、大环内酯类、氨基苷类、喹喏酮类耐药率较高，MRSA敏感率明显低于MSSA。所有金黄色葡萄球菌中没有对万古霉素、利奈唑胺耐药的菌株。近年来，有关万古霉素异质性耐药金葡菌（heterogeneous vancomycin-interme-diates taphylococcus aureus，hVISA）的研究显示[2-3]，hVISA在万古霉素的压力下还会转化为万古霉素中介的金黄色葡萄球菌（VISA），为防止VISA和耐万古霉素的金黄色葡萄球菌（VRSA）的出现，医院应监管万古霉素治疗用量。

表5 非发酵菌抗菌药物敏感性分析

肠球菌也是引起院内感染的常见菌。万古霉素也是治疗肠球菌感染的常用药物。本研究未发现对万古霉素耐药的粪肠球菌。屎肠球菌对抗菌药物的敏感性明显低于粪肠球菌。本次监测检出对万古霉素耐药的屎肠球菌18株。我国耐万古霉素的屎肠球菌（VRE）发生率不高，低于5%[4]，但其导致的感染病死率较高，且可将对万古霉素的耐药基因传给其他细菌，如耐万古霉素金黄色葡萄球菌（MRSA），警示我们必须更加严格执行院内感染控制措施,以减少VRE的发生。

革兰阴性菌中，大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌的分离数量仍居前列。质粒介导的ESBLs和AmpC是大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌对β内酰胺类药物的主要耐药机制。产酶菌株感染的患者在病死率、住院时间和治疗费用上均高于非产ESBLs菌株感染的患者[5-6]。本研究中大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌中产ESBLs株分别占46.8%和32.3%。大肠埃希菌及肺炎克雷伯菌对第1、2、3代头孢菌素的耐药率均较高，对酶抑制剂复合药物敏感率较高，对阿米卡星的敏感率可达90%。本研究中大肠埃希菌对碳青霉烯类的敏感率达99%，肺炎克雷伯菌对亚胺培南的敏感率仅有92.0%。近年来耐碳青霉烯的肺炎克雷伯菌常有报道，特别是KPC-2型碳青霉烯酶在浙江等地似有流行趋势[7]。这提醒我们必须合理应用碳青霉烯抗生素，防止在抗生素压力下筛选出耐药的肠杆菌科菌，一旦这类菌株暴发流行将给临床治疗造成极大的困难。在药敏特点上，多黏菌素B、黏菌素和替加环素对碳青霉烯耐药肠杆菌科菌的MIC均较低，可为临床治疗提供选择。

铜绿假单胞菌是引发院内感染的重要病原菌。铜绿假单胞菌的耐药性近年来比较稳定，由该菌引起的菌血症死亡率达到70%。本次监测中，多重耐药的铜绿假单胞菌株发生率为12.44%。鲍曼不动杆菌是仅次于铜绿假单胞菌的第2种常见的非发酵病原菌。本次监测中，发生率为35.5%。鲍不动杆菌的耐药现状不容乐观。鲍曼不动杆菌对抗菌药物的敏感性整体较差，并且由多药耐药向泛耐药菌株发展。因此临床医生对鲍曼不动杆菌引起的感染可能会感到更为棘手。目前治疗鲍曼不动杆菌感染需依赖药敏实验结果选药并联合用药。对于泛耐药菌株，应引起各医院的高度重视，并采取及时有效的防控措施。

［1］郭宇，王辉，赵春江，等.2013年中国革兰阳性球菌多中心耐药监测研究［J］.中华检验医学杂志，2015，6（38）：373-381.

［2］Ho PL，Lo PY，Chow KH，et al.Vancomycin MIC creep in MRSA isolates from 1997 to 2008 in a healthcare region in Hong Kong［J］.J Infect，2020，60（2）：140-145.

［3］ Musta AC，Riederer K，Shemes S，et al.Vancomyein MIC plus heteroresistance and outcome of methicillin-resistant Staphylococcus aureusbacteremia：trends over 11 years［J］.J Clin Microbiol，2009，47（6）：1640-1644.

［4］郭宇，王辉，赵春江，等.2012年中国16家医院革兰阳性球菌耐药监测研究［J］.中华微生物学和免疫学杂志，2013，33（6）：401-408.

［5］Tumbarello M，spanu T，sanguinetti M，et a1.Bloodstream infections caused by extended-spectrum-β-1actamase-producing Klebsiella pneumoniae：risk factors，molecular epidemiology and clinical outcome［J］.Antimicrob Agents Chemother，2006，50（2）：498-504.

［6］杨彬，张坚磊，郭影，等.2011年第四季度天津市细菌耐药性监测［J］.中华医院感染学杂志，2012，22（16）：3639-3642.

［7］ Cai JC，Zhou HW，Zhang R，et al.Emergence of serratia marcescens，klebsiellapneumoniaeand escherichia coli possessing the plasmid-mediated carbapenem-hydmlizing beta-lactamase KPC-2 in intensive care units from a Chinese hospital［J］.Antimicrob Agents Chemother，2008，52 （6）：2014-2018.

（收稿：2015-12-26 修回：2016-01-22）

杭州市第三人民医院检验科（杭州 310009）

章小花，Tel：13656713427